冮宏映
- 作品数：10 被引量：139H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子对缩小兔急性心肌梗死面积作用的观察被引量：8
- 2002年
- 目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接 4点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及心电图QRS积分观察rhbFGF对兔急性心肌梗死面积的影响。结果 :①血清心肌酶学观察 :2组左前降支结扎后 2 4h与基础值比较血清谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、α 羟丁酸脱氢酶均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,2组左前降支结扎后48h与基础值比较 ,除生理盐水组的谷草转氨酶和rhbFGF组的谷草转氨酶及乳酸脱氢酶同工酶外 ,其它均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。左前降支结扎后 48h ,rhbFGF组较生理盐水对照组乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶及肌酸激酶MB同工酶明显降低 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生理盐水对照组乳酸脱氢酶同工酶 ,左前降支结扎后48h与左前降支结扎后 2 4h比较升高 ,而在rhbFGF组降低 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。②心电图QRS积分 :左前降支结扎后 6周rhbFGF组QRS积分 (4 3 0± 0 95 )
- 李易马雁冰孙林冮宏映光雪峰蒲里津
- 关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子急性心肌梗死心肌酶学心电图
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子对缺血心肌的保护作用
- 2002年
- 目的 探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)在急性心肌缺血中对缺血心肌细胞的保护作用。方法 无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (LAD) ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接四点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及电镜病理观察rhbFGF对缺血心肌的保护作用。结果 ①血清心肌酶学观察 :结扎LAD后 2 4h及4 8h心肌酶AST、LDH、LDH - 1、CK、CK -MB、HBDH与术前比较显著升高 ,术后 4 8hrhbFGF组心肌酶CK -MB较生理盐水对照组明显降低 ;术后 4 8h与 2 4h相比较 ,LDH - 1在生理盐水对照组升高而在rhbFGF组降低 ;②电镜观察 :与生理盐水对照组相比rhbFGF组心肌细胞间可见大量毛细血管生长 ,新生血管周围可见趋于正常的心肌细胞。结论 rhbFGF可缩小心肌梗死面积 ,对缺血心肌细胞可能有直接的保护作用。
- 李易孙林马雁冰孙茂盛冮宏映楚天舒光雪峰
- 关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子缺血心肌心肌缺血
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子对缺血心肌血管结构的作用观察
- 2004年
- 目的 观察重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhb FGF)对缺血心肌血管结构的作用。方法 建立兔急性心肌梗死模型 ,将 rhb FGF直接四点注射入兔缺血心肌内 ,通过病理切片图像分析观察缺血心肌血管管壁及管腔变化情况。结果 rhb FGF组与生理盐水组平均管壁厚度分别为 6周 :(2 0 .70± 9.94 ) μm,(18.88± 9.6 5 ) μm,P>0 .0 5 ;12周 :(2 9.87± 12 .96 )μm,(18.13± 11.33)μm,P<0 .0 1;管壁管腔比值分别为 6周 :0 .2 5± 0 .12 ,0 .2 4± 0 .0 2 ,P>0 .0 5 ;12周 :0 .33± 0 .14 ,0 .2 4± 0 .0 9,P >0 .0 5。结论 rhb FGF促缺血心肌血管新生到一定时期 (可能小于 12周 ) ,血管数量不再增长 ,只是血管管腔增大 ,管壁增厚 ,发生血管重构。
- 孙林李易光雪峰冮宏映马雁冰戴长柏
- 关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子血管重构
- E.coli表达HEV ORF2编码蛋白第112～607氨基酸片段的免疫原性及其诱生抗体的病毒中和活性被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨E.coli表达的戊型肝炎病毒(HEV)ORF2编码蛋白第112～607氨基酸片段(pORF2-56K)的免疫原性及其诱生抗体的病毒中和活性。方法 pORF2-56K免疫小鼠和豚鼠,用ELISA检测血清抗体效价。将HEV毒种与高效价豚鼠灭活血清在体外孵育后,接种于2BS细胞,用RT-PCR检测病毒RNA的复制情况。结果E.coli表达的pORF2-56K可诱导机体产生高水平的HEV特异性抗体和强烈的免疫记忆。该抗体可在体外有效中和HEV,使之失去在2BS细胞中有效复制的能力。结论 E-coli表达的pORF2-56K具有良好的免疫原性,且其诱生抗体具有中和HEV的能力,可作为HEV重组疫苗的候选抗原。
- 李洪钊冮宏映刘晓张光明孙强明李燕马雁冰孙茂盛
- 关键词：免疫原性中和活性戊型肝炎病毒
- 一种获取巴斯德毕赤酵母高拷贝重组子的新方法被引量：10
- 2003年
- 目的 :探讨一种简化的高效获取用于表达重组蛋白的巴斯德毕赤酵母高拷贝重组子的新方法 ,即多重转化筛选法。方法 :按经典方法转化宿主菌和利用G4 18多拷贝筛选法从转化子中筛选出含目的基因表达盒拷贝数最高的菌株 ,然后以之作为新一轮的转化宿主菌。如此重复进行数轮上述转化筛选过程 ,直到获得含有尽可能多拷贝目的基因表达盒的重组子 ;同时将此方法 ,即多重转化筛选法与经典方法进行比较。结果 :与经典方法相比 ,多重转化筛选法通过筛选较少量转化子即可轻而易举地获得较多的高拷贝重组子 ,工作量更小 ,效率更高。结论 :多重转化筛选法是一种更高效地获取毕赤酵母高拷贝重组子的新方法。
- 冮宏映李洪钊
- 关键词：巴斯德毕赤酵母
- 戊型肝炎病毒ORF2编码多肽抗原的表达及其特性研究被引量：6
- 2004年
- 迄今所发现的唯一的戊型肝炎病毒 (HEV)中和表位定位于开放读码框架 2 (ORF2 )编码蛋白的第 5 78和第 6 0 7氨基酸(aa)之间的区域。将对应于此区域的基因片段通过一段柔性的甘氨酸铰链与乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)基因的 3’端相连 ,构建成HBV/HEV融合基因。该融合基因在毕赤酵母细胞内的表达产物为分子量约 2 9kDa的融合蛋白 ,具有组装成嵌合病毒样颗粒 (VLP)的能力。此嵌合VLP具有与HBsAgVLP相似的特性且保留了天然HBV/HEV双重抗原性。对此嵌合VLP特性的初步研究提示其可能具有HBV/HEV双价重组疫苗的潜在应用前景。
- 谢天宏李洪钊张光明冮宏映孙强明丁云菲马雁冰孙茂盛
- 关键词：戊型肝炎病毒中和表位
- 重组人角质细胞生长因子-2基因克隆、表达、纯化与活性分析被引量：14
- 2001年
- 从人胚肺二倍体细胞KMB17中抽提总RNA ,经RT PCR扩增获得编码人角质细胞生长因子 2 (keratinocytegrowthfactor 2 ,KGF 2 )的cDNA .克隆于硫氧环蛋白表达载体pThioHisA ,序列分析表明与文献报道一致 .经IPTG诱导 ,在大肠杆菌BL2 1中实现高效表达 ,表达量可达菌体总蛋白 10 %～15 % .菌体超声破碎 ,上清经CM SepharoseFF阳离子交换 ,Heparin Sepharose亲和层析 ,Superdex 75凝胶过滤层析纯化得到重组人KGF 2 ,纯度高于 95 % .生物活性分析表明 ,它能够促进成纤维细胞NIH 3T3的增殖 ,诱导鸡胚背根神经结神经轴突的生长 ,促进鸡胚尿囊膜血管生成 .研究结果表明 ,获得了 95 %纯度的具有生物学活性的重组人KGF 2 。
- 马雁冰李擎谢天宏李鸿钧冮宏映戴长柏孙茂盛
- 关键词：基因克隆纯化活性分析
- 巴斯德毕赤酵母表达系统优化策略被引量：93
- 2003年
- 李洪钊李亮助孙强明冮宏映
- 关键词：巴斯德毕赤酵母
- 人血纤维蛋白溶酶原K5环的基因合成、表达、纯化与活性鉴定被引量：6
- 2001年
- 根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性 ,人工合成人血纤维蛋白溶酶原 K5全基因 ,并在原核系统中以硫氧还蛋白融合蛋白的形式实现了高效表达 .重组蛋白通过 Ni2 +金属螯合层析得到初步纯化 ,通过肠激酶切割去除了融合标签 .应用鸡胚尿囊膜实验检测切割后的 rh K5的生物学活性 ,发现与对照组相比 ,rh K5能明显地降低血管管径、血管总面积以及血管总面积与视野面积的比值 ,表明切割后的产物具有显著抑制新生血管生成的生物学活性 .为进一步研究和开发抗血管生成药物奠定了基础 .
- 袁力勇马雁冰刘勇庄俊英李春宏冮宏映孙茂盛戴长柏
- 关键词：基因合成基因表达肿瘤治疗
- 轮状病毒VP7 DNA免疫研究被引量：1
- 2001年
- 目的研究促使基因分泌或膜锚定表达的基因修饰对轮状病毒 VP7DNA疫苗所诱导抗体水平的影响。方法把携带野生型 (VP7wt)、分泌型 (VP7s)和膜锚定型 (VP7tm ) 3种 VP7基因的重组 pc DNA3质粒分别免疫小鼠 ,用大肠杆菌表达的重组 VP7抗原检测 VP7特异的抗体反应 ,统计分析。结果 3种 DNA疫苗均能诱导轮状病毒 VP7特异的 Ig G抗体反应 ,但其抗体水平之间无显著性差异。结论把轮状病毒 VP7基因导入分泌或膜锚定表达途径不能增强其
- 刘勇袁力勇庄俊英李春宏冮宏映马雁冰孙茂盛戴长柏
- 关键词：分泌基因修饰DNA疫苗
