刘宁
- 作品数：29 被引量：44H指数：4
- 供职机构：新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金科技基础性工作专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 新疆植物种质资源整合共享及重要植物类群生物学特性研究
- 刘志勇马艳明谭敦炎冯缨郭君邱娟王永刚蒋国伟刘宁赵万里肖菁张东亚
- 针对该区植物种质资源保护与利用存在家底不清、缺乏总体规划和统筹协调、资源保存条件和研究手段落后、信息和资源未能实现社会共享、对新疆特殊环境重要植物类群研究缺乏等问题，该项目组织7家疆内主要植物资源保存和研究单位开展新疆植...
- 关键词：
- 关键词：植物种质资源花卉植物
- 一种甜瓜苗水培装置
- 本实用新型公开了一种甜瓜苗水培装置，包括第一定植半圆管，所述第一定植半圆管的一侧安装有连接合页，所述第一定植半圆管的一侧通过连接合页活动连接有第二定植半圆管，所述第一定植半圆管和第二定植半圆管的内壁均开设有孔洞，所述第一...
- 邓超宏颜国荣徐麟刘宁王威赵连佳王帆阿布都克尤木·阿不都热孜路子峰严青青
- 棉蚜P450 CYP6CY3的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备被引量：5
- 2017年
- 【目的】克隆得到棉蚜(Aphis gossypii)P450 CYP6CY3,将其开放阅读框(ORF)在原核细胞中进行表达,纯化融合蛋白,多次免疫小鼠获得CYP6CY3多克隆抗体,为进一步分析CYP6CY3在棉蚜不同组织部位的分布及其在抗性中的作用打下基础。【方法】利用RT-PCR及3′-RACE技术克隆获得CYP6CY3的ORF,并对其进行生物信息学及系统进化分析。构建重组质粒pET32a-CYP6CY3,转化大肠杆菌transetta(DE3)进行原核表达,利用切胶回收法获得纯化的融合蛋白,继而用纯化得到的融合蛋白免疫昆明白小鼠制备鼠抗棉蚜CYP6CY3多克隆抗体;ELISA检测鼠抗CYP6CY3蛋白多克隆抗体的效价,并通过Western blot及免疫组化检测该抗体特异性。【结果】棉蚜CYP6CY3 ORF长1 266 bp,编码421个氨基酸,预测蛋白分子量为48.8 k D,理论等电点为8.99,不含有信号肽序列,属亲水性蛋白;氨基酸序列包括W×××R、AG××T、E××R、P××F×PE/DRT和F××G×××C×G 5个P450家族的特征基序。通过NCBI Blastx进行同源序列的比对分析,棉蚜CYP6CY3氨基酸序列与豌豆长管蚜(Acyrthosiphon pisum)(XP_001948581.1)氨基酸一致性最高,达到81%,与麦双尾蚜(Diuraphis noxia)(XP_015379193.1)一致性为79%,与桃蚜(myzus persicae)(AHB52749.1)氨基酸序列一致性为76%,4种蚜虫的氨基酸序列都含有位于螺旋K中参与稳定核心结构的E××R完全保守序列及P450基因标志性的F××G×××C×G(358—367)血红素结合位点的共有序列。使用MEGA5软件构建系统进化树,显示棉蚜、豌豆长管蚜、麦双尾蚜及桃蚜聚为一类,亲缘关系较近。通过原核表达得到的CYP6CY3融合蛋白的相对分子量约为66 k D,基于纯化的CYP6CY3重组蛋白多次免疫昆明白小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测获得的鼠抗CYP6CY3抗体效价达到1﹕409 600。Western blot和免疫组化进一步证实,该抗体既能与异源表达的CYP6CY3蛋白特异性结合,也能与棉蚜组织中存在的天然CYP6CY3蛋白特异�
- 魏原杰王亚美黄丽娜刘宁赵洁艾新宇刘小宁
- 关键词：棉蚜原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 番茄麦蛾生物学特性观察及人工饲料优化
- 2023年
- 番茄麦蛾Tuta absoluta是一种寡食性生物入侵害虫,可对番茄造成极大的危害,严重危胁新疆地区的番茄产业。由于对新入侵番茄麦蛾生物学特性缺乏了解,而且在实验室饲养困难,因此本研究旨在明确番茄麦蛾幼虫的龄期,评估温度对番茄麦蛾发育历期、存活率和繁殖力的影响,并优化人工饲料。依据番茄麦蛾幼虫头壳宽度和蜕皮次数将幼虫划分为4个龄期;设置了20℃、25℃、30℃和35℃温度梯度处理,发现25℃幼虫期为11.04 d,短于20℃,并长于30℃,35℃时不能完成幼虫期的发育。25℃条件下麦蛾的存活率和繁殖力均高于30℃和20℃,说明25℃是番茄麦蛾发育的最适温度。并设计了3种饲料饲养番茄麦蛾,其中取食C饲料的平均单雌产卵量最多,约为39枚,发育历期最短为40 d,说明C饲料是比较合适的饲料,为番茄麦蛾室内繁殖奠定基础。
- 李亚茹张连军刘宁蔡新辉刘小宁
- 关键词：生物学特性温度人工饲料
- 一种玉米果穗剪
- 本实用新型涉及一种玉米果穗剪，设置有剪刀手柄和刀片，剪刀手柄剪刀手柄的前端连接有固定环；固定环内沿粘有软橡胶层，剪刀手柄的两把手之间连接有带扭力弹簧的齿轮卡口，固定环中间开有刀片通过槽，固定环未端连接在剪刀手柄的一把手顶...
- 颜国荣王威刘宁宋雨白玉婷肖菁
- 文献传递
- 一种花生种植施肥机
- 本实用新型涉及花生种植领域，具体公开了一种花生种植施肥机，包括底座、拌料装置、敲打装置和松土装置，所述拌料装置包括肥料仓、螺旋叶片和电机，所述电机的输出端固定连接第一转轴，所述第一转轴上设有所述螺旋叶片，所述肥料仓的底端...
- 苗昊翠李强李利民贾东海刘宁石必显侯献飞顾元国
- 文献传递
- 一种可移动式中高杆作物植株照片拍摄装置
- 本实用新型公开了一种可移动式中高杆作物植株照片拍摄装置，属于作物拍摄技术领域，包括两个背景支架与背景布，所述背景支架上设置有若干个用于背景支架固定的地锚，所述背景支架的上端设置有固定架，所述固定架的上端设置有连接杆，所述...
- 王威王帆颜国荣刘宁徐麟邓超宏赵连佳肖菁阿布都克尤木·阿不都热孜克
- 一种抗逆性种子资源基因监测用质量监控装置
- 本发明提供一种抗逆性种子资源基因监测用质量监控装置，涉及质量监控技术领域。该基于抗逆性种子资源基因监测用质量监控装置，包括壳体，所述支撑架内壁均固定连接有均匀分布的多个加热管，所述壳体内两侧侧壁中部均固定连接有风机，所述...
- 邓超宏颜国荣杨永刘宁王威徐麟张金波赵连佳阿布都克尤木·阿不都热孜李玲张学军杨文莉王帆王永刚王蕾李玉珊路子峰严青青
- 一种鹰嘴豆种植用播种装置
- 本实用新型公开了一种鹰嘴豆种植用播种装置，涉及农作物种植技术领域，包括底座上设有外壳，第一电机的输出端连接有第一转轴，第一转轴上依次套设有第一齿轮、转盘和十字型滑轨，第一齿轮上啮合连接有第二齿轮，第二齿轮一侧壁设有T型滑...
- 马艳明王威徐麟刘宁颜国荣张龑王莉肖菁
- 棉铃虫Ⅳ型几丁质酶的基因克隆、酶学性质及表达谱被引量：5
- 2019年
- 【目的】昆虫几丁质酶(chitinase, CHT)主要参与蜕皮、围食膜的降解和机体免疫防御等重要生理生长发育过程。本研究旨在对棉铃虫Helicoverpa armigeraⅣ型(group)几丁质酶基因进行克隆和表达分析,为以该基因作为棉铃虫防控的分子靶标提供理论依据。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从棉铃虫中肠中克隆Ⅳ型几丁质酶基因,分别运用DNAMAN和MEGA软件进行多序列比对和构建系统发育树。在大肠杆菌Escherichia coli(DE3)中诱导表达其体外重组蛋白,利用Western blot进一步验证;用Ni-NTA纯化柱纯化重组蛋白,之后研究该蛋白的酶学性质。qPCR分析该基因的在棉铃虫不同发育阶段和6龄幼虫不同组织中的表达谱。【结果】克隆获得棉铃虫几丁质酶基因HaCHT4(GenBank登录号:MH500771),其cDNA长1 624 bp,ORF长1 527 bp,编码509个氨基酸,预测的分子量为55.2 kD。蛋白质序列的N末端具有信号肽,中间序列部分含有一个催化结构域(catalytic domain, CAD), C末端含有一个几丁质结合结构域(chitin binding domain, CBD)。多序列比对显示,HaCHT4具有几丁质酶的保守区域;系统发育分析表明,HaCHT4属于Ⅳ型几丁质酶。重组蛋白His-HaCHT4在大肠杆菌中成功表达。纯化的重组蛋白对胶体几丁质底物具有降解活性,最适温度和pH分别为50℃和7,动力学参数K_m和V_(max)值分别为1.76±0.35 mg/mL和0.0220±0.0012μg/mL·s。qPCR分析表明,HaCHT4在1龄和2龄幼虫期的表达量显著高于其他幼虫龄期及预蛹期;主要在中肠和脂肪体中高度表达,体壁和头部中低表达。【结论】结果提示棉铃虫HaCHT4可能参与围食膜中几丁质降解过程。这些结果为深入研究HaCHT4的功能奠定了基础,并为害虫防治提供了有用的信息。
- 麦麦提艾力.阿卜杜纳斯尔马纪刘宁王威李梦鸽古新蓉王新刘小宁
- 关键词：棉铃虫几丁质酶学性质基因表达分析
