刘柏林
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
- 供职机构：甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马铃薯ARF基因RNAi载体的遗传转化及对其试管薯生理特性的影响被引量：2
- 2015年
- 用含有ADP核糖基化因子（ARF）基因的干扰载体的农杆菌转化马铃薯栽培品种＂甘农薯2号＂,获得转化植株48株,经卡那霉素抗性筛选和PCR检测证明ARF基因已成功整合到马铃薯基因组中。用实时荧光定量PCR检测表明,转化植株中ARF基因的表达较对照均有不同程度的下降,在转基因株系Z-11和Z-12中,ARF基因表达的干扰程度分别高达92.53%和93.22%。对转基因植株诱导的试管薯的淀粉、可溶性糖、蛋白质、蔗糖和葡萄糖含量测定结果表明,与未转基因的对照相比,转基因植株的淀粉含量提高了4.29%~34.27%,蛋白质含量提高了1.47%~7.35%,可溶性糖含量提高了1.44%~17.39%;蔗糖含量提高了11.53%~53.84%,而葡萄糖含量降低了6.06%~21.21%。
- 裴瑞芳刘英刘柏林张宁司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯转基因植株生理指标
- 马铃薯块茎休眠解除过程的形态学观察与鉴定被引量：1
- 2013年
- 利用石蜡切片分析了室温储存条件下马铃薯栽培品种‘Favorita’块茎休眠解除过程中的形态组织学变化,并对块茎中的淀粉和蛋白质含量的变化作了研究。结果显示,马铃薯块茎在休眠期芽眼分生组织细胞停止分裂,伴随着休眠的解除,芽眼分生组织细胞开始分裂且分裂速度越来越快,芽原基最终形成一个完整的芽,伴随此过程,观察到芽原基周围部分细胞程序性死亡最终发育形成环纹、螺纹导管的现象;马铃薯块茎从休眠解除到芽的萌发过程中淀粉含量则出现下降且淀粉颗粒逐渐由规则卵圆形变为较小的不规则状,在靠近芽原基的分化部位蛋白质含量有明显上升趋势。室温储存60 d的块茎被认为完全解除休眠。
- 文义凯刘柏林卢蔚雯张宁司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯块茎休眠组织学细胞学
- 马铃薯块茎休眠与发芽抑制差减cDNA文库构建及相关功能基因克隆
- 马铃薯在我国乃至世界都是第四大粮食作物。马铃薯块茎的休眠与发芽对于马铃薯的种植栽培以及生产加工极为重要。关于马铃薯块茎休眠与发芽的研究大都集中在储藏生理、遗传及细胞生物学方面。生产实践中主要通过低温或者化学抑制剂来控制储...
- 刘柏林
- 关键词：马铃薯电子克隆
- 文献传递
- 马铃薯microRNA及其靶基因的预测与功能分析被引量：2
- 2010年
- 根据miRNA序列在植物中的高度保守性,通过拟南芥、水稻、玉米等植物中已知的miRNA序列与马铃薯的表达序列标签(EST)、基因组测序序列(GSS)以及核酸数据库中的序列进行比对,最后通过在线比对软件blastx去掉编码序列,共发现32条新的miRNAs,并且这32条前体均可折叠形成miRNA家族的标准二级结构;利用新发现的马铃薯miRNAs通过在线软件miRU和miRU2与编码蛋白的数据库比对,预测到了100个靶基因,分别编码与马铃薯生长发育、新陈代谢、信号转导、转录调节、胁迫反应等相关的蛋白.
- 李世风张宁刘柏林杜宏辉司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯MICRORNA靶基因
- 马铃薯乙烯响应因子基因的克隆表达及生物信息学分析被引量：5
- 2013年
- 根据番茄ERF5基因(NM_001247583.1)序列设计引物,采用RT-PCR方法得到马铃薯ERF基因的cDNA,并对其进行生物信息学及表达分析.结果表明:该cDNA全长789bp,阅读框为732bp,编码243个氨基酸.序列同源性分析表明该基因序列与番茄ERF5基因的序列同源性达82%,氨基酸序列同源性达70%.对该马铃薯ERF基因的氨基酸序列经BLAST进行多序列比对,发现该氨基酸序列的98～160bp为AP2结构域,属于AP2/EREBP转录因子的EREBP亚族ERF类.蛋白质三级结构预测表明该基因的AP2结构域非常保守.对ERF基因进行荧光定量PCR分析,表明该基因可能参与了马铃薯块茎解除休眠与发芽过程的调控.
- 冯丹刘柏林王永林张宁文义凯司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯基因克隆生物信息学QRT-PCR
- ARF基因干扰表达对不同发育阶段和贮藏条件马铃薯酶活性的影响
- 2016年
- 以前期研究获得的马铃薯栽培品种＂甘农薯2号＂ADP核糖基化因子（ARF）基因干扰表达转化植株为材料,用qRT-PCR法对转基因植株的ARF基因表达量进行了测定,结果表明,不同发育阶段转基因叶片中ARF基因的相对表达量先降低,生长后期略有增加,表明ARF基因干扰表达量随马铃薯生长发育发生改变。ARF基因干扰表达影响马铃薯叶片中酶活性,不同发育阶段转基因叶片与对照相比,多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性升高11.61%-27.84%,硝酸还原酶（nitrate reductase,NR）活性提高21.10%-41.32%,磷脂酶D（phospholipase D,PLD）活性降低2.88%-57.64%,蔗糖磷酸合成酶（sucrose phosphate synthase,SPS）活性提高29.00%-39.57%;不同温度（4℃和室温）贮藏的块茎中ARF基因的相对表达量变化趋势一致：均先降低,再升高,但前者较后者ARF基因相对表达量显著降低。室温较4℃贮藏的转基因块茎PPO活性升高30.44%-56.28%,NR活性提高17.41%-40.92%,PLD活性降低24.39%-85.11%,SPS活性提高30.89%-45.78%。室温较4℃贮藏的非转基因块茎PPO活性升高25.11%-70.66%,NR活性提高36.07%-89.62%,PLD活性降低11.35%-72.64%,SPS活性提高27.31%-61.33%。本研究通过探讨ARF基因干扰表达对马铃薯生理生化特性的影响,为进一步研究ARF基因在马铃薯生长发育调控中的作用提供一定的理论基础。
- 周香艳张宁刘柏林裴瑞芳司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯酶活性
- 马铃薯块茎休眠与发芽调控研究进展
- 马铃薯作为一种重要的粮菜兼用性作物，块茎休眠与发芽的调控对其栽培、加工及食用具有重要意义，综述马铃薯块茎休眠与发芽的物理化学调控以及基因工程调控途径，为发展马铃薯块茎休眠与发芽的新型调控途径提供依据。综上所述，马铃薯块茎...
- 刘柏林张宁文义凯瞿韵司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯块茎休眠基因工程
- 文献传递
- 马铃薯块茎休眠与发芽相关基因的发掘及分子机制
- 目的：探究环境、生理和遗传因子对生产和储藏过程中马铃薯的休眠和发芽的影响.揭示块茎休眠的解除和发芽与块茎的结构和代谢变化以及基因表达模式之间的关系.
方法：以马铃薯栽培品种“费乌瑞它”和“陇薯3号”为试验材料，...
- 司怀军刘柏林张宁文义凯杨江伟张国栋
- 关键词：马铃薯发芽过程分子机制
- 文献传递
- 3种商品化Trizol试剂提取高质量马铃薯块茎总RNA的比较被引量：4
- 2012年
- 针对马铃薯块茎含有多糖多酚的特点,选用3种快捷的商品化提取试剂提取马铃薯块茎总RNA.结果表明:3种商品化试剂均可不同程度的提取马铃薯块茎总RNA,提取的总RNA的28S、18S和5SrRNA条带清晰可见,但纯度和浓度存在较大差异;其中用Trizol裂解加柱吸附法提取的马铃薯块茎总RNA纯度较高,但浓度较低,经SMART PCR和LD-PCR检测可扩增出马铃薯块茎腺苷葡萄糖磷酸化酶小亚基(sAGP)基因和全长双链cDNA,可用于后续分子生物学试验.
- 刘柏林尤佳张宁司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯RNA提取SMART技术
- 转PPase基因对马铃薯块茎休眠相关生理特性的影响被引量：3
- 2010年
- 马铃薯块茎的休眠和发芽对于马铃薯栽培、贮藏保鲜和加工等具有十分重要的意义。本研究以25℃室温条件下贮藏90d后的转正义和反义无机焦磷酸酶(PPase)基因马铃薯Favorita的块茎为材料,对贮藏块茎的PPase活性和及Pi、可溶性糖、淀粉、蛋白质含量进行了测定,以探讨PPase基因对马铃薯相关休眠生理特性的影响。结果表明,与对照相比,转正义PPase基因的两个株系F-2-1和F-2-4块茎中的PPase活性、Pi含量和可溶性糖含量增加、淀粉含量和蛋白质含量降低,且与对照相比均达到极显著水平(只有F-2-4淀粉含量与对照相比无显著性变化);转反义PPase基因的两个株系F-1-1和F-1-2块茎中PPase活性、Pi含量和可溶性糖含量降低、淀粉含量增加,与对照相比均达到极显著性水平,而蛋白质含量与对照相比无显著性变化。
- 文义凯杜宏辉刘柏林张宁司怀军王蒂
- 关键词：马铃薯转基因植株生理特性
