刘静静
- 作品数：14 被引量：34H指数：3
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- 山东部分地区毛皮动物肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及系统发育分析被引量：17
- 2013年
- 为确诊近两年造成毛皮动物(狐狸、貉子、水貂)死亡的主要细菌性病原,本研究在流行病学调查基础上,对新鲜病死毛皮动物进行临床症状观察、病理学检查,同时取病变肝、肺、气管为样品分离纯化细菌,对所分离的细菌进行形态特征、理化特性检查及药敏试验、致病性试验和16S rRNA基因的分子鉴定。结果显示,从剖检病死毛皮动物的肺、肝、气管组织等均检出同种细菌,分离菌株对菌必治和舒巴坦高度敏感,对小白鼠具有较强致病作用,与已知的肺炎克雷伯氏菌16S rRNA序列的同源性为98.6%～100%。综合分析,该分离菌株为克雷伯氏菌属的肺炎克雷伯氏菌。
- 钟世勋朱瑞良崔国林左雪梅杨世发梁漫飞孙婧刘静静
- 关键词：毛皮动物肺炎克雷伯氏菌RRNA系统发育分析
- 传染性法氏囊病病毒VP2单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制
- 用重组IBDV-VP2 蛋白免疫BALB/c 小鼠，制备免疫脾细胞，与SP2/0 骨髓瘤细胞触合，获得三株稳定分泌抗VP2 蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。间接免疫荧光试验(IFA)证明，三株单抗均与VP2 发生...
- 刘静静王永山欧阳伟夏兴霞潘群兴王晓丽毕振威诸玉梅朱瑞良
- 鸡组织中禽波氏杆菌间接免疫荧光组化定位检测方法的建立被引量：1
- 2015年
- 为研究禽波氏杆菌感染鸡后在体内组织器官中的定植规律及其在不同组织细胞中的定位、定量状况,本试验对禽波氏杆菌感染鸡组织器官的固定剂进行了筛选,制备石蜡切片,选择良好的粘片剂,利用纯化的兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG作为一抗,建立了能进行禽波氏杆菌抗原定位检测的间接免疫荧光组化法,并对禽波氏杆菌人工感染鸡进行了检测。经多次优化,确定将10%中性福尔马林作为固定剂固定组织24h,0.1%多聚-L-赖氨酸作为切片的粘片剂。最佳工作条件为2%脱脂奶粉37℃封闭30min;兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG 1∶100稀释,4℃孵育过夜;荧光素标记羊抗兔二抗1∶20稀释,37℃作用30min。该方法重复性和特异性检测良好,对禽波氏杆菌感染雏鸡组织器官的检测结果表明,该法能特异性地对鸡组织器官中的禽波氏杆菌进行抗原定位,气管、肺脏、肝脏、心脏、脾脏、肾脏中的禽波氏杆菌抗原均呈现特异性荧光信号,同细菌分离鉴定方法检测的阳性符合率为99.27%。试验结果表明,本试验所建立的间接免疫荧光组化法可作为一种有效的检测方法用于禽波氏杆菌致病机制的研究。
- 杨萍萍赵雪刘静静贺晓华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌组织器官
- 禽波氏杆菌鸡胚强毒株对雏鸡的致病性
- 2017年
- 以从孵化场将出壳鸡胚中分离到的鸡胚强毒株禽波氏杆菌LL09作为试验菌株,分别经鼻腔、眼睛和腹腔3种感染方式和1,7,14,21d不同日龄感染海蓝褐蛋雏鸡,检测其致病过程、病理变化,以及LL09在不同感染方式和不同感染日龄对雏鸡的生长抑制和NDV灭活苗免疫后HI抗体水平的影响差异。结果发现:LL09能引起雏鸡眼睛分泌物增多,咳嗽等呼吸道症状,且能入侵内脏组织,导致气管黏膜纤毛细胞脱落,肺出血,心肌细胞、肝细胞、脾细胞、肾小管上皮细胞等变性坏死等病理变化。3种感染方式中以腹腔感染危害最为严重,入侵内脏组织的比例最高,对雏鸡的生长抑制作用最强,对NDV免疫后HI抗体水平的影响最大,其次是经鼻腔感染组和经眼睛感染组。LL09分别于不同日龄感染雏鸡结果发现,感染日龄与LL09对雏鸡的危害直接相关,越早期感染,对雏鸡的体质量抑制越严重,对NDV免疫后的HI抗体水平的影响越大,内脏组织的感染几率越高。尤其是1d和7d感染组危害比较严重,而21d感染雏鸡症状不明显,且未在除气管和肺脏以外的内脏组织中检测到LL09的感染。对禽波氏杆菌LL09鸡胚强毒株的致病性检测结果表明,LL09作为鸡胚分离株,同样可以导致禽类的呼吸道感染,且能入侵内脏组织,以腹腔感染和1周内感染的危害最为严重。
- 杨萍萍朱瑞良魏凯赵雪胡莉萍刘静静
- 关键词：禽波氏杆菌雏鸡
- 间接免疫酶组化检测禽波氏杆菌在感染鸡体内的抗原定位被引量：7
- 2013年
- 本试验以超声破碎和高速离心方法提取禽波氏杆菌外膜蛋白,作为抗原免疫家兔,制备并纯化兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG,建立了能进行禽波氏杆菌抗原定位和检测的间接免疫酶组化法,并对试验条件进行了优化。对禽波氏杆菌人工感染海兰褐雏鸡的检测结果表明,该法能特异性地对气管、肺、肝、心、脾、肾中的禽波氏杆菌进行抗原定位,同细菌分离鉴定的结果符合率为100%。同时对感染鸡胚肝脏和心脏中禽波氏杆菌的检测结果均为阳性。该法具有高度敏感性和特异性特点,可用于禽波氏杆菌临床和试验感染条件下的诊断和定位检测。
- 杨萍萍刘静静赵雪贺晓华刘冠华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌抗原定位
- 一种通用型猪大肠杆菌病疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种通用型猪大肠杆菌病疫苗及其制备方法，属于动物细菌基因工程技术领域。所述疫苗，含有如下抗原：由周质伴侣蛋白Skp、MltA‑相关蛋白MipA和长链脂肪酸外膜转运蛋白Lomt形成的融合蛋白、不耐热肠毒素的B亚基...
- 张雪寒张碧成俞正玉郭芸芸刘静静茅爱华何孔旺袁朗
- 文献传递
- 16S-23S rRNA基因间隔序列PCR及RFLP对奇异变形杆菌分离株的鉴别与系统发育分析被引量：2
- 2013年
- 根据临床常见致病菌16S-23SrRNA基因间隔序列(ISR)两端的16S及23SrRNA保守序列设计PCR扩增的通用引物,对9株奇异变形杆菌和6株相近菌株应用通用引物PCR扩增16S-23SrRNA ISR序列。通过PCR长度多态性比较、RFLP分析以及部分序列测序比较,分析鉴别奇异变形杆菌。结果显示,PCR长度多态性可以将奇异变形杆菌同其余菌种进行区分;RFLP分析可以将所有试验菌种进行区分;部分序列测序可以对奇异变形杆菌进行分型。由此表明,16S-23SrRNA ISR序列PCR及RFLP分析可以简单、快速、准确的鉴定奇异变形杆菌。
- 崔国林朱瑞良左雪梅钟世勋杨世发梁漫飞孙婧刘静静
- 关键词：奇异变形杆菌16S-23SRRNAPCRRFLP
- IBDV双抗体夹心ELISA检测方法的建立和胶体金试纸条的研制
- 传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的以侵害雏鸡淋巴组织，特别是中枢免疫器官—法氏囊为主要特征的传染病。该病不仅引起患病动物死亡，而且还导致机体免疫抑制，是引起我国及世界养禽业经济损失严重的主要传染病之一...
- 刘静静
- 关键词：传染性法氏囊病病毒单克隆抗体胶体金试纸条
- 文献传递
- 一种通用型猪大肠杆菌病疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种通用型猪大肠杆菌病疫苗及其制备方法，属于动物细菌基因工程技术领域。所述疫苗，含有如下抗原：由周质伴侣蛋白Skp、MltA‑相关蛋白MipA和长链脂肪酸外膜转运蛋白Lomt形成的融合蛋白、不耐热肠毒素的B亚基...
- 张雪寒张碧成俞正玉郭芸芸刘静静茅爱华何孔旺袁朗
- 鸡胚中禽波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：1
- 2013年
- 从出现孵化率降低(80.3%)和弱雏率增多(16.5%)等现象的山东某大型海蓝褐种禽孵化场18日龄将出壳鸡胚中分离到1株禽波氏杆菌,命名为LL09株,并进行了23S rRNA的序列扩增和耐药性分析。结果表明,其23S rRNA序列与同年分离到的XT09株的同源性为100%,与其它8株B.avium的同源性为96.2%～96.6%,而与GenBank中收录的B.avium NC-010645的同源性为95.8%。该菌对所检测的14类47种药物中有28种呈现完全耐药,6种为低敏,只有13种药物比较敏感。耐受药物中包括了头孢类、青霉素类、单酰胺环类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类等常用药物,只有喹诺酮类、氨基糖苷类和呋喃类中的部分药物的杀菌效果较好。
- 杨萍萍谭燕玲赵雪刘静静贺晓华刘冠华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌鸡胚耐药性
