卢晓风
- 作品数：50 被引量：410H指数：11
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 绿色荧光蛋白转基因成纤维细胞与义齿基托树脂复合生长状况的活体观察被引量：3
- 2004年
- 细胞与材料复合生长状况的活体动态监测可能理想地反映材料的体外生物相容性。本研究通过绿色荧光蛋白 (Green fluorescent protein,GFP)转基因技术成功标记了小鼠成纤维细胞 L 92 9。该荧光蛋白标记细胞与义齿基托树脂复合培养过程中 ,通过倒置相差显微镜和荧光显微镜活体动态监测了材料周围和材料表面细胞形态、增殖及其对材料的黏附等状况。结果发现 ,义齿基托树脂制备过程中残留的甲基丙烯酸甲酯单体表现了一过性的细胞毒作用 ,但该细胞毒作用可以通过树脂的短时间浸泡而得以消除。活体动态观察可以发现材料很轻微的毒副作用 ,表明细胞与材料复合生长状况的活体动态监测能更真实。
- 刘瑾万琳卢晓风李胜富张杰程惊秋
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因技术成纤维细胞义齿基托树脂生物医用材料
- 锌离子对sTRAIL分子聚合状态及肿瘤细胞杀伤活性的影响被引量：2
- 2013年
- 可溶性肿瘤坏死因子相关诱导配体(sTRAIL)因对多种肿瘤细胞具有超强选择性杀伤活性而极可能成为新型抗肿瘤药物。基因工程重组表达sTRAIL过程中缺乏锌离子(Zn2+)可能是导致该蛋白对肿瘤细胞杀伤活性较低的重要原因。本文通过化学合成方法获得了sTRAIL编码基因,将其克隆到pQE30载体中获得了高表达。比较不同Zn2+浓度条件下制备的sTRAIL蛋白分子聚合状态和肿瘤细胞杀伤活性发现,无Zn2+的sTRAIL主要以单体形式存在,活性弱;有Zn2+的sTRAIL主要以同源三聚体形式存在,活性强。这表明Zn2+对维持sTRAIL肿瘤细胞杀伤活性极为重要,有必要在sTRAIL蛋白生产体系中添加适当浓度的Zn2+。
- 胡立强杨浩万琳卢晓风
- 关键词：肿瘤生物治疗生物技术药物
- 绿僵菌降解寄主表皮的蛋白酶同工酶研究被引量：6
- 1999年
- 研究了不同碳氮源对金龟子绿僵菌（ Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ） 产生与分解昆虫外壳相关的蛋白酶活性和同工酶谱带的影响． 结果表明：蝉蜕、虻虫壳、蝇蛆壳、蚕蛹壳、虾壳、胶体几丁质均可使金龟子绿僵菌产生蛋白酶，虾壳和胶体几丁质所产生的蛋白酶比活性最高，蝉蜕次之． 但蛋白酶总活性以蝉蜕最高，虻虫壳次之．样品经等电聚焦电泳后，印迹于Ｘ光片上，显示蛋白酶同工酶，蝉蜕和蚕蛹壳产生的蛋白酶同工酶谱带最丰富． 以蝉蜕为唯一碳氮源时，金龟子绿僵菌产生蛋白酶的最佳条件为２６℃、初始ｐＨ６．０ 、最终孢子浓度ｎ＝ １×１０７ｍＬ－１ ．
- 杨星勇冀志霞夏玉先王中康卢晓风裴炎
- 关键词：金龟子绿僵菌同工酶生物防治表皮
- Ca-P生物材料骨诱导性及机理研究
- Ca-P生物材料因结构和成分与骨相似而很早就被用作骨修复替换材料.理想的骨修复替换材料不仅应具有良好的生物相容性,还应具有组织诱导性.该文选择了重要的Ca-P生物材料HA/TCP双相陶瓷,体外条件下对其生物相容性进行了评...
- 卢晓风
- 关键词：生物材料骨诱导性生物相容性
- 文献传递
- 恒河猴可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的基因克隆、重组表达和功能研究
- 2015年
- 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(hTRAIL)因对肿瘤细胞有选择性杀伤作用而成为新型抗肿瘤候选药物。预测的恒河猴TRAIL(mmTRAIL)与hTRAIL高度同源,提示其有杀伤人肿瘤细胞的可能性。但目前尚无mmTRAIL蛋白功能的报道。本文首先从恒河猴外周血单个核淋巴细胞中扩增了可溶性mmTRAIL编码基因,然后构建了pQE30-mmTRAIL表达质粒并进行诱导表达。通过Ni-NTA agarose亲和层析从破菌上清液中获得mmTRAIL蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析表明,mmTRAIL在溶液中主要以三聚体形式存在。体外条件下,mmTRAIL对结肠癌细胞COLO205显示强烈的杀伤作用,而对正常细胞BEA2b无害,表明其对肿瘤细胞的杀伤有选择性。裸鼠荷瘤模型进一步证实mmTRAIL能够抑制肿瘤生长,具有抗肿瘤作用。这些结果表明,mmTRAIL能够杀伤人肿瘤细胞,可作为新型肿瘤靶向治疗药物进一步深入研究。
- 樊淼淼贾殿隆杨浩万琳卢晓风
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡肿瘤靶向治疗
- 植物蛋白酶抑制剂在植物抗虫与抗病中的作用被引量：37
- 1998年
- 综述了植物蛋白酶抑制剂抗虫与抗病作用的研究进展．蛋白酶抑制剂广泛存在于植物体内，与植物抗虫抗病密切相关．植物蛋白酶抑制剂能抑制昆虫肠道蛋白酶，使昆虫生长发育缓慢，甚至死亡．但取食蛋白酶抑制剂后，昆虫能迅速分泌对抑制剂不敏感的蛋白酶，而使蛋白酶抑制剂无效．食物蛋白的含量和质量也影响植物蛋白酶抑制剂的抗虫效果．病原菌的感染能诱导植物产生蛋白酶抑制剂，诱导产生的蛋白酶抑制剂能抑制病原菌的生长．
- 卢晓风夏玉先裴炎
- 关键词：蛋白酶抑制剂抗虫抗病植物
- 人脐动脉平滑肌细胞体外培养的生物学特性及其永生株的初步建立被引量：5
- 2003年
- 目的 建立人脐动脉血管平滑肌细胞 (HU ASMC)原代、传代培养的最佳方法 ,并初步建立其永生株。方法 采用人脐动脉血管中膜组织块贴壁法原代培养 ,比较不同培养基对原代及传代细胞增殖的影响 ;选择标记为新霉素 (G4 18)的带有端粒酶催化亚基 (h TERT)基因的重组质粒导入人脐动脉血管平滑肌细胞。结果 经 α-肌动蛋白鉴定 ,组织块贴壁法可获得高纯度的 HUASMC。原代培养的 HU ASMC1～ 4代细胞增殖能力强、生长旺盛 ,此后细胞的增殖能力逐渐降低 ,到第 10代几乎丧失增殖力。原代培养以 MCDB131为最佳培养基。 h TERT转染细胞克隆由长梭形变为短梭形 ,接触抑制消失 ,生长速度快 ,目前已传至 2 0代 ,增殖能力与第 1代无差别。转染前后平滑肌特异的α-肌动蛋白表达阳性。结论 h TERT转染的 HU ASMC保留了 HU ASMC的基本生物学特征 。
- 李胜富田佳刘瑾万琳卢晓风冯莉孙明菡樊瑜波步宏李幼平
- 关键词：人脐动脉平滑肌细胞端粒酶催化亚基
- 人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用表达上调基因的鉴定
- 2003年
- 目的 探讨人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用后基因表达的变化。方法 人外周血单个核细胞 (PBMC)与猪内皮细胞系 PIEC共培养 18h,对照组为未共培养的 PBMC和 PIEC。合成两组细胞的 c DNA进行抑制消减杂交 (SSH)。共培养中上调的 c DNA用 p GEM- T Easy载体进行 T/ A克隆 ,然后测序。用 BL AST程序进行同源性分析。结果 经过 SSH和克隆 ,获得一包含 30 0克隆的消减文库。从文库中随机挑取 2 4个克隆进行测序 ,并在 Gen Bank中进行同源性比较。其中 4个为已知的人的基因片段 ,8个为猪的表达序列标记 (EST) ,9个片段与人的基因有高度的同源性 ,3个片段未检索到相匹配的同源性序列。
- 胡为民程惊秋李胜富卢晓风万琳李幼平
- 关键词：外周血单个核细胞内皮细胞抑制消减杂交异种移植
- 生物材料有效性和安全性评价的现状与趋势被引量：67
- 2002年
- 对生物材料进行有效性和安全性评价是生物材料进入临床前的关键环节。从细胞和组织的水平 ,利用形态学的检测方法观察材料与机体短期和长期的互作关系是以往评价生物材料的主要内容和手段。新型生物材料近年来迅猛发展 ,材料的组成、形态、植入部位及用途日趋复杂 ,对材料的评价相应提出了更高的要求。发展快速、特异、系统的评价体系至关重要。体外实验因操作可控性强 ,影响因素单一 ,重复性好而得到大力的发展 ,通过体内 -体外实验的相关分析有望部分代替体内实验。近交大动物的开发为生物材料的体内评价更接近人体的真实反应提供了新的契机。近几年来 ,大量分子生物学的先进检测手段的应用使生物材料的评价向细胞和分子水平迈进。 RT-PCR、核酸 /蛋白质杂交技术可以从分子的层面寻找材料和机体互作的重要的分子标记 ,而显微探测技术 (如 CON-FU CAL)等的应用通过对图像的三维重建而达到对材料 -细胞、材料 -组织、细胞 -组织相互作用清晰而透彻的观察。总之。三“R”原则 (replace refine reduce)即发展体外实验 ;采用灵敏、特异、先进的检测手段 ;优化并减少实验动物数量 ,建立材料对分子、细胞、机体互作的系统性评价是生物材料评价的发展趋势和最终目的。
- 张真卢晓风李幼平步宏
- 关键词：生物材料有效性安全性
- 杭州虻纤溶酶的纯化及其生物活性分析被引量：11
- 2000年
- 经过 75 %硫酸铵沉淀、SephadexG 75凝胶过滤层析、DEAESephadexA 2 5离子交换层析、Benzamide Sepharose 4B亲和层析 ,从杭州虻 (Tabanushongchowensis )腹部匀浆液中分离纯化出分子量约为 36 5kD的纤溶酶THFE。经纤维蛋白平板测定表明 ,THFE既具有纤溶酶作用 ,又具有激活纤溶酶原的作用。THFE能分解纤溶酶原激活剂的生色底物———ChromozymUK及S 2 2 88,对纤溶酶的生色底物ChromozymP的活性较高 ,合成生色底物测定结果与纤维蛋白平板测定结果一致。THFE具有类胰蛋白酶活性 ,专一水解精氨酸形成的酰胺键 (或肽键 ) ,几乎不具有胰凝乳蛋白酶活性。
- 杨星勇卢晓风程惊秋裴炎阎光凡张玉方
- 关键词：纤溶酶纯化生物活性昆虫药
