吴国芳
- 作品数：21 被引量：50H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- Sirt2在小鼠肌肉发生中的作用及其机制
- 肌肉组织形成于胚胎发育早期，肌形成包括干细胞的成肌决定，分化，肌管融合，最后形成有功能的肌肉组织，该过程受到多种成肌调控因子的影响。骨骼肌损伤与肌萎缩等相关肌病的发生及恢复均离不开卫星细胞的增殖与分化，因此，研究成肌细胞...
- 吴国芳
- 关键词：增殖成肌分化
- 文献传递
- 人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响被引量：4
- 2009年
- 为了研究人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡、p53蛋白表达和Caspase-3活性的影响,试验采用MTT方法检测细胞的生长抑制率、DNA片段化试验检测细胞凋亡、流式细胞术测定细胞周期、Western-blot检测p53蛋白表达、Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性。结果表明:人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的抑制呈现时间和剂量依赖性,有73%的Hela细胞停滞在G0G1期;Western-blot检测结果显示人乳铁蛋白可以上调p53蛋白的表达;人乳铁蛋白作用48 h后Caspase-3的活性是0小时时的5.5倍,二者差异极显著(P<0.01)。结果说明人乳铁蛋白能显著抑制宫颈癌Hela细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡、调控细胞周期、上调p53表达、活化Caspase-3有关。
- 吴国芳李青旺李健韩增胜张勇宁国柱王磊
- 关键词：人乳铁蛋白细胞凋亡细胞周期P53CASPASE-3
- 干扰Sema7A抑制C2C12成肌细胞的增殖和分化被引量：1
- 2014年
- 为研究脑信号蛋白家族(Semaphorins)成员Sema7A对成肌细胞增殖和分化的影响,本文设计并合成了Sema7A基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用此siRNA转染C2C12成肌细胞.通过Hoechst核染和流式细胞术检测细胞增殖情况,免疫荧光检测肌管的形成情况,realtime qPCR和Western印迹技术检测成肌标记基因的变化.结果显示,干扰Sema7A后,C2C12成肌细胞增殖减慢,处在G2和S期的细胞所占的比例明显下降,而G1期细胞的比例升高.免疫荧光检测结果显示,干扰Sema7A后,肌管的直径及MyHC+细胞所占比例均显著降低.Real-time qPCR和Western印迹结果也显示,肌肉分化标志基因MyoD、MyoG、MyHC的mRNA及蛋白质表达均下降.进一步检测Sema7A受体下游信号通路发现,干扰Sema7A后,其下游信号分子PI3K和AKT的磷酸化水平被下调.以上结果表明,Sema7A可以调节C2C12成肌细胞的增殖和分化,可能是通过其受体作用于PI3K/AKT信号通路实现的,这为进一步研究Sema7A在骨骼肌发育中的作用提供实验基础.
- 贾龙李岳峰吴国芳路宏朝杨公社史新娥
- 关键词：C2C12成肌分化
- 干扰Sirt2促进C2C12成肌细胞分化被引量：4
- 2014年
- Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子.
- 吴国芳路宏朝贾龙宋成创史新娥杨公社孙世铎
- 关键词：成肌分化C2C12
- EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路调节猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化被引量：2
- 2012年
- 为了阐明Wnt/β-catenin信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化中的作用,利用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)处理猪骨骼肌卫星细胞,采用MTT、流式细胞术、免疫荧光和Western印迹等方法检测了细胞增殖和分化情况.结果显示,与对照组相比,EGCG以时间、浓度依赖方式抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖.流式细胞术检测细胞周期结果表明,与对照组相比,经EGCG处理后,猪骨骼肌卫星细胞的G1期细胞比例上升,而G2和S期细胞比例下降,这说明细胞被阻滞在G1期,细胞的增殖受到抑制.免疫荧光检测分化过程中MyHC的表达,与对照组相比,EGCG促进猪骨骼肌卫星细胞的分化,并降低增殖标志基因MyoD以及细胞周期蛋白D的表达量,而提高了分化标志基因MyoG和MyHC的表达量.在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化过程中,EGCG降低β-联蛋白的表达量,且核内的β-联蛋白明显减少.结果表明,EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖,促进其分化.
- 陈宗正仇杨吴国芳史新娥沈清武杨公社孙世铎
- 关键词：骨骼肌卫星细胞
- 阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化被引量：17
- 2014年
- 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。
- 史新娥吴国芳宋子仪路宏朝贾龙朱嘉宇杨公社
- 关键词：PI3KAKT通路FOXO1骨骼肌卫星细胞成肌分化FOXO1
- 八眉猪及其不同杂交组合肉质特性分析
- 本试验对八眉猪及其不同杂交组合的屠宰性能和肉质特性进行测定和对比分析:1.八眉猪及其二三元杂交育肥和屠宰性能分析54头八眉猪及其二三元杂交(每组各18头)进行育肥试验,八眉猪、二元杂交、三元杂交平均日增重分别为391.6...
- 吴国芳赵子龙宋成创相奥琪孙世铎周继平
- 关键词：八眉猪杂交组合屠宰性能肉质特性
- 文献传递
- Sirt2通过ERK1/2通路影响C2C12成肌细胞增殖
- 吴国芳宋成创路宏朝贾龙杨公社史新娥孙世铎
- 关键词：细胞增殖细胞周期ERK1/2信号通路
- FoxO1通过抑制CaN/NFAT信号通路抑制氧化型肌纤维的形成
- 史新娥吴国芳路宏朝朱嘉宇贾龙宋成创杨公社
- 关键词：FOXO1肌纤维类型
- 表皮生长因子对无透明带小鼠胚胎体外发育的影响被引量：2
- 2009年
- 为了观察不同浓度的表皮生长因子对无透明带小鼠胚胎体外发育的影响，试验将小鼠原核期胚胎用链霉蛋白酶去除透明带后，分别置于含有不同浓度的表皮生长因子无血清胚胎体外培养液中培养，观察各期胚胎的发育情况。结果表明：除0．01ng／mL表皮生长因子添加组胚胎的2细胞发育率和囊胚回收率与添加0．1ng／mL表皮生长因子处理组差异不显著外（P〉0．05），其体外胚胎各期的发育率、囊胚回收率和囊胚细胞数与其他处理组比较均差异显著（P〈0．05）。说明一定浓度的表皮生长因子可以提高无透明带小鼠胚胎体外培养各期的发育率，但是高浓度的表皮生长因子对无透明带小鼠胚胎的体外发育有一定的抑制作用。
- 宁国柱李青旺赵红卫韩增胜肖波李文烨潘巧莲吴国芳
- 关键词：表皮生长因子小鼠
