周朗
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学化学工程学院更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 基于丙酮酸/还原型辅酶Ⅰ/乳酸脱氢酶/氧化型辅酶Ⅰ/乳酸正逆反应同时测定丙酮酸/乳酸的酶荧光毛细管分析被引量：4
- 2011年
- 利用丙酮酸(PA)/还原型辅酶I(NADH)/乳酸脱氢酶(LDH)/氧化型辅酶I(NAD+)/乳酸(LA)荧光反应体系的正逆反应,建立了一种可直接用于临床检验、能同时测定血清中微量PA/LA的酶荧光毛细管分析法。本方法可在常规荧光光度计上,用普通玻璃毛细管同时实现了PA/LA的高灵敏分析,每次分析试剂和样品的用量仅9μL,而且方法重现性好,血清样品预处理操作简单。得到的最佳条件:60μmol/L NADH,100 U/L LDH,3 mmol/L NAD+,测定乳酸的pH值为9.0、丙酮酸的pH值为7.5,反应时间10 min;LA的线性范围是0.05～1.0 mmol/L;检出限为0.023 mmol/L;RSD<1.6%;PA的线性范围是4～80μmol/L;检出限为0.73μmol/L;RSD<1.3%;血清中PA和LA的添加回收率在94%～105%之间;测定结果与常规紫外分光光度法一致。
- 李永生杨微李乔婧周朗高秀峰
- 关键词：丙酮酸乳酸乳酸脱氢酶血清
- 酶荧光毛细管分析法测定微量血清中乳酸脱氢酶活性被引量：1
- 2012年
- 基于丙酮酸/还原型辅酶I/乳酸脱氢酶(LDH)/乳酸/氧化型辅酶I荧光猝灭体系和荧光毛细管分析技术,建立了可用于微量样品中LDH酶活性测定的方法。优化的测定条件为:激发及发射波长分别为350和460nm;测定温度为25℃;酸度为pH 6.5;NADH浓度为300μmol/L;丙酮酸浓度为1.2mmol/L。本方法的测定范围为50～1500IU/L,检出限为30IU/L,相对标准偏差2.1%～2.2%(n=10),回收率在96.4%～105%范围内。本方法操作简单,每次测定仅需样品2.0μL、试剂18.0μL,分析速度约为30样/h,利用本方法测定了微量血清中LDH的活性。
- 李乔婧李永生周朗杨微高秀峰
- 关键词：酶活性乳酸脱氢酶血清
- 裂解加热-荧光毛细管法快速测定血液红细胞内丙酮酸被引量：2
- 2012年
- 在常规红细胞处理方法中,用生理盐水对红/白细胞清洗分离会导致细胞内丙酮酸外渗,造成丙酮酸测定值不能反映细胞内丙酮酸的真实浓度。本研究设计了"氯化铵裂解液特异性裂解红细胞-离心分离白细胞/血小板-加热去除蛋白-丙酮酸酶荧光毛细管分析"方法。最优化的血样预处理条件是:以16000 r/min离心血液1 min,获得红细胞;裂解液裂解红细胞后在100℃下加热5 min。对比实验发现,本方法优于其它红细胞处理法。本研究中丙酮酸测定方法的线性范围为10～120 mmol/L;检出限为0.98 mmol/L;灵敏度为5.64 F L/mmol,高于文献方法60倍以上;测定红细胞内丙酮酸值的相对标准偏差小于2.8%(n=11),回收率在98.3%～104.1%之间。
- 周朗李乔婧李永生高秀峰
- 关键词：丙酮酸红细胞
- 酶荧光毛细分析法测定血清中微量丙酮酸
- 2011年
- 提出了一种用于血清微量丙酮酸(PA)测定的酶荧光毛细分析法(P-LE-FCA)。优选的测定条件为:乳酸脱氢酶和还原型辅酶Ⅰ的浓度分别为100U/L和60μmol/L,反应时间5min。测定PA的线性范围4—80μmol/L,检出限0.73μmol/L,RSD<1.3%。血清共存物质对PA测定无明显干扰。使用该方法对血清PA进行测定,其回收率在93.0%—106.5%之间;结果与常规紫外分光光度法一致。本方法的样品预处理过程简单、省时,省试剂,灵敏度高,重现性好。
- 杨微李乔婧周朗李永生
- 关键词：丙酮酸乳酸脱氢酶血清
