周露
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：清华大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人工microRNA干扰DREB亚族A-5组转录抑制子基因增强了拟南芥对低温和高盐胁迫的耐受性被引量：1
- 2011年
- 转录抑制子是一类与DNA的特异位点结合并抑制其附近基因转录的蛋白质,主要通过与转录激活子或基本转录复合物发生作用以及引起染色质重排等3种方式来抑制目标基因的转录。DREB类转录因子的A-5组中共有6个转录抑制子,其功能和作用机制还有待进一步研究。通过设计人工microRNA-A5(amiRNA-A5)使其较特异地作用这些抑制子的mRNA,并将构建成功的pCAMBIA-pre-amiRNA-A5表达载体转化到拟南芥中,最终得到了9株T2代转基因纯合子。Real-time PCR检测表明,与野生型对照相比,转基因植株中靶基因的表达量有明显降低。抗性分析的结果显示与野生型植株相比转基因植株在低温和高盐胁迫条件下其相对离子渗漏率(REL)和丙二醛(MDA)含量增加都比较少,表明转基因植株对低温和高盐胁迫的耐受性增强,这为进一步研究DREB亚族A-5组转录抑制子在胁迫条件下的功能和作用的分子机制奠定了基础。
- 周露董春娟刘进元
- 关键词：转录抑制子基因沉默
- 不同提取液提取水稻幼苗质外体蛋白效果的比较被引量：4
- 2011年
- 提取植物组织质外体蛋白质的主要困难是提取效率低且易被细胞质蛋白污染。为解决上述问题,以12天93-11水稻幼苗为试验材料,使用3种含不同浓度钾和钙离子的缓冲液作为提取液进行提取效果比较。3种提取液的相同成分都是0.1mol/L Tris-HCl pH7.6,1mmol/L PMSF,区别点在于:Buffer A含0.2mol/L KCl;Buffer B含0.2mol/L CaCl2;Buffer C含0.1mol/L KCl和0.1mol/L CaCl2。结果表明,Buffer A的蛋白产率达到了(0.49±0.07)mg/g FW(叶片)和(0.83±0.06)mg/g FW(根部),比Buffer B和Buffer C分别提高了122.7%和53.1%(叶片)以及102.4%和59.6%(根部)。六磷酸葡萄糖脱氢酶活性检测的结果表明在这些蛋白质提取物中细胞质蛋白的污染率很低,可以控制在1%以下。这些实验结果说明通过优化提取液,建立了有效提取水稻幼苗质外体蛋白质的方法,可应用于植物质外体蛋白质组学研究。
- 周露刘进元
- 关键词：水稻幼苗
- 水稻金属硫蛋白基因家族成员对铅胁迫的应答及其在铅敏感酵母中的功能互补被引量：3
- 2007年
- 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸(Cys)、具有金属结合能力的蛋白质.采用Northern杂交分析了水稻幼苗中重金属铅离子对10个水稻MT基因表达的影响.结果显示,在根中,除了OsMT-Ⅰ-3b不表达外,其他9个基因的表达均不同程度地受到Pb2+的影响,其中OsMT-Ⅰ-1a,OsMT-Ⅰ-1b,OsMT-Ⅰ-2c,OsMT-Ⅰ-4a,OsMT-Ⅰ-4b和OsMT-Ⅰ-4c的表达大幅度增加,OsMT-Ⅰ-2a和OsMT-Ⅰ-3a的表达有所增加,而OsMT-Ⅰ-2b的表达则受到了抑制.相比之下,地上部分Pb2+只对其中的6个基因的表达有一定的诱导效应,对OsMT-Ⅰ-1a,OsMT-Ⅰ-1b,OsMT-Ⅰ-4a及OsMT-Ⅰ-4b的表达没有明显作用.分别把这10个基因在Pb2+敏感的酵母突变体中异源表达,结果表明,表达OsMT-Ⅰ基因的酵母细胞都在一定程度上提高了对Pb2+的耐受性.上述结果揭示了Pb2+影响OsMT基因家族各成员在水稻幼苗中表达的特征,以及OsMT-Ⅰs可以增强酵母突变体铅耐受性的描述,同时也为进一步研究水稻MT基因家族应答Pb2+的分子机制奠定了基础.
- 徐玉凤周功克周露李一勤刘进元
- 关键词：水稻PB^2+
