唐连飞
- 作品数：45 被引量：134H指数：7
- 供职机构：惠州出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目World Health Organization湖南省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：12
- 2010年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列,设计了一对特异性引物和探针,使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性。
- 黄萍肖家勇欧阳振宇陈盼白雪朱中武孟芳吴愈柏唐连飞
- 关键词：非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR质粒
- 猪博卡病毒的研究进展被引量：7
- 2014年
- 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。在欧洲、美洲、中国、韩国、日本均检测到了猪博卡病毒的存在,流行病学调查研究发现,该病毒与猪群腹泻和呼吸困难有一定的相关性。本文结合已发表的文献,对猪博卡病毒的流行病学、分类、基因组结构与致病性等方面进行了阐述,为科研人员对猪博卡病毒的研究提供理论依据。
- 周宇唐连飞朱事康
- 关键词：流行病学
- 日本血吸虫CAI基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
- 2003年
- 目的 克隆和表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)CAI基因 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定 ,评价其作为血吸虫疫苗候选分子的潜能。 方法 将SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体 ,转化入感受态大肠杆菌ER2 56 6 ,在异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导下进行表达 ,用表达产物免疫小鼠 ,并设分别注射等体积的弗氏完全佐剂和PBS的两组对照组 ,观察免疫保护效果。 结果 在IPTG诱导下 ,表达载体中的SjGST基因与重组的SjCAI基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达 ,将其免疫小鼠 ,诱导产生了 2 9.87%的减虫率和 6 3.71 %的减卵率。 结论 SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 。
- 罗秀菊袁仕善易新元曾宪芳张顺科唐连飞蔡春章洁Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫免疫保护基因表达亚克隆
- 日本血吸虫Sj31核酸疫苗联合IFN-γ重组质粒诱导小鼠保护性免疫的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨干扰素 γ重组质粒对日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗在小鼠抗血吸虫作用的影响。 方法 将小鼠干扰素 γ基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pCDNA3 1以构建重组真核表达质粒pCDNA3 1 IFN γ ,并与日本血吸虫组织蛋白酶B真核表达质粒VR10 12 Sj3 1一同免疫小鼠。小鼠分为 4组 ,其中实验组每鼠同时肌注VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ各 10 0 μg ,3个对照组分别为VR10 12 Sj3 1肌注 10 0 μg ,pCDNA3 1 IFN γ肌注 10 0 μg和载体VR10 12及pCHAN3 1肌注各 10 0 μg。共免疫 3次 ,每次间隔 2周。于末次免疫后两周免疫组化检测表达质粒在小鼠肌细胞的表达 ,于末次免疫后 3周经小鼠皮肤攻击感染 40± 1条日本血吸虫尾蚴。 45d后杀小鼠计算减虫率。 结果 VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ均在小鼠肌细胞表达 ,日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗联合IFN γ重组质粒免疫可诱导小鼠产生 2 7 3 7%的减虫率 ,与日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗单独免疫组比较减虫率显著 (P <0 0 5 )。 结论 IFN
- 陈欲晓易新元曾宪芳唐连飞王林纤蔡春袁仕善
- 关键词：日本血吸虫IFN-Γ重组质粒小鼠保护性免疫
- 一起大闸蟹重金属镉污染的溯源分析研究被引量：3
- 2017年
- 在常德市进行出口食用性水生动物例行安全风险监控时发现,辖区一批大阐蟹存在重金属镉(Cd)含量超标现象,抽检的4批样品中有3批超过0.5 mg/kg(国家标准:大闸蟹Cd限量为0.5 mg/kg)。为此,对大闸蟹养殖基地的养殖水质、底质以及投喂饵料中的重金属Cd展开调查分析和研究。抽采大闸蟹养殖水质、底泥、饵料(螺狮、小杂鱼)等25份样品进行Cd含量检测分析。结果显示:底泥Cd含量高于0.5 mg/kg,螺蛳Cd含量高于0.5mg/kg,水中Cd含量符合渔业水质标准,小杂鱼Cd含量较低。结果表明该养殖基地底泥已受到一定程度的重金属Cd污染,大阐蟹Cd超标是由该养殖基地底泥Cd含量超标和投喂饵料螺蛳中Cd含量较高引起,所投螺蛳体内Cd含量较高也是由该水域底泥Cd含量较高所致。
- 侯义宏唐连飞熊波刘利荣
- 关键词：大闸蟹镉污染
- 日本血吸虫组织蛋白酶B DNA疫苗不同免疫途径免疫保护效果研究被引量：4
- 2004年
- 目的 :观察本室所构建日本血吸虫大陆株 31kDa组织蛋白BDNA疫苗在BALB/c小鼠体内的不同免疫途径的免疫保护效果。方法 :用纯化的空白质粒载体VR1 0 1 2、重组质粒VR1 0 1 2 Sj31免疫BALB/c鼠 ,将 36只 6～ 8周龄BALB/c鼠随机分为 3组 ,每组 1 2只 ,对照组 (A组 )肌肉注射空白质粒载体VR1 0 1 2 ,实验组 (B组 )皮下注射重组质粒VR1 0 1 2 Sj31 ,C组肌肉注射重组质粒VR1 0 1 2 Sj31。质粒剂量均为 1 0 0 μg ,每隔 2w免疫 1次 ,共免疫 3次 ,第 3次免疫后第 2 1d ,每只鼠经腹部感染 1 0条尾蚴 ,4 2d后剖杀计数各小鼠成虫数和每克肝卵数 ,观察诱导产生的减虫和减卵效果 ,并用ELISA分析小鼠血清中的抗体。结果 :ELISA分析表明 ,第 3次免疫后小鼠出现特异性IgG抗体。与空白质粒对照组比较 ,2个实验组的减虫率分别为 1 5 .0 % (P >0 .0 5 )和 2 5 .0 % (P <0 .0 5 ) ,减卵率分别为 38.2 2 %和 5 4.90 % (P <0 .0 0 1 )。与皮下免疫组相比 ,VR1 0 1 2 /Sj31肌肉免疫组的减卵率分别为 2 6 .99% (P <0 .0 0 1 )。结论 :DNA疫苗VR1 0 1 2 Sj31能诱导小鼠产生一定水平的抗日本血吸虫感染保护作用 ,肌肉注射的保护效果大于皮下注射。
- 张冉易新元曾宪芳张顺科唐连飞黄跃龙Larry Mc Reynolds
- 关键词：日本血吸虫组织蛋白酶免疫保护
- 日本血吸虫雌虫抗原模拟表位的筛选及免疫保护性被引量：9
- 2004年
- 目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4个阳性克隆进行测序。分别在 0、2、4周用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,第 6周每鼠经腹部感染 40条日本血吸虫尾蚴 ,42d后剖杀冲虫 ,计数虫数和每克肝卵数。 结果 经 3轮筛选 ,特异性噬菌体富集了 2 0 0多倍 ,随机挑取的 18个克隆经Dot ELISA鉴定有 17个能与雌虫抗原免疫兔血清呈阳性反应。DNA自动测序的 4个序列与GenBank的已知序列均无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 2 6.5 7% ,减卵率为 65 .3 4%。 结论 采用噬菌体随机肽库技术可获得模拟日本血吸虫雌虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫。
- 王林纤蔡春易新元曾宪芳唐连飞罗永慧
- 关键词：噬菌体随机肽库免疫筛选
- 重组白细胞介素-4增强日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗诱导小鼠的保护力被引量：6
- 2005年
- 目的探讨重组白细胞介素-4(IL-4)真核表达质粒增强日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗对小鼠的免疫保护效果。方法将小鼠IL-4基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1以构建小鼠重组IL-4表达质粒,并联合日本血吸虫组织蛋白酶B的表达质粒DNA(VR1012-Sj31)肌注免疫小鼠,设重组IL-4表达质粒、组织蛋白酶B表达质粒和2种空载体质粒对照组。免疫组化检测IL-4和组织蛋白酶B在小鼠肌细胞内的表达,末次免疫3周后攻击感染,用减虫率及减卵率表示保护力。结果重组IL-4和组织蛋白酶BDNA均在小鼠肌细胞表达,重组IL-4和组织蛋白酶BDNA联合免疫小鼠,产生43.2%的减虫率和76.6%的减卵率,与组织蛋白酶BDNA单独免疫相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论重组IL-4能提高日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗的抗血吸虫保护力作用,具有佐剂的免疫效应。
- 陈欲晓王林纤唐连飞张顺科章洁曾宪芳易新元
- 关键词：组织蛋白酶B日本血吸虫保护力真核表达载体PCDNA3.1疫苗诱导
- 日本血吸虫病表位疫苗研究
- 摘要本文着重于旧本血吸虫(S.japonicum)表位疫苗的研究,包括以下两个部分:一日本血吸虫有效抗原表位的筛选.结果表明,获得了3种SjFer抗原表位,它们都具有部分的免疫保护性.分离鉴定日本血吸虫85kDa金属蛋白...
- 唐连飞
- 关键词：日本血吸虫疫苗噬菌体肽库表位肽
- 文献传递
- 日本血吸虫Sj-Ts1基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定被引量：1
- 2004年
- 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)Sj -Ts1融合蛋白并测定其免疫保护效果。将Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX - 5X - 3原核载体 ,转化入大肠杆菌ER2 5 6 6 ,并用IPTG对该重组菌进行诱导表达中。将此表达产物进行WesternBlot分析后免疫小鼠 ,免疫剂量为 10 0 μg/次 /鼠。并设蛋白佐剂对照和PBS对照。免疫三次后进行攻击感染 ,计数虫负荷及肝卵负荷。在IPTG诱导下 ,亚克隆至 pGEX - 5X - 3的Sj-Ts1基因在大肠杆菌内高效表达融合蛋白SjGST -Ts1,用此融合蛋白免疫小鼠 ,能诱导产生 2 4 16 %的减虫率和 4 8 74 %的减卵率。Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX -5X - 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物可诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力。
- 王林纤陈欲晓周东明蔡春陈利玉唐连飞罗永慧张顺科曾宪芳易新元
- 关键词：日本血吸虫亚克隆免疫保护效果
