孙飞
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：解放军第97医院更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同抗凝剂对外周单个核细胞增殖影响比较、γδ T细胞鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的探讨3种抗凝剂保存的外周血对培养γδT细胞的增殖和杀伤功能的影响研究。方法选择获得知情同意的6例健康志愿者,其中男性3例,女性3例;年龄25~45岁。常规无菌抽取新鲜外周血15 mL。将其外周血标本分别置于肝素钠、细胞保存液(枸橼酸钠)和乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂中(即肝素钠组、细胞保存液组、EDTA组),并立即处理培养细胞,用CCK-8法检测3组细胞的增殖情况。在第10天,行流式细胞术检测3组γδT细胞的穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达。结果在外周血细胞培养过程中,EDTA组细胞增殖不明显;肝素钠组和细胞保存液组细胞增殖明显,在第14天细胞增殖倍数最大分别为137.00%±1.44%和99.00%±1.45%,且肝素钠组优于细胞保存液组(t=2.72,P<0.01)。流式细胞仪检测发现肝素钠组γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=3.871,P=0.003;t=2.744,P=0.021;t=2.261,P=0.047)。结论肝素钠和细胞保存液均可用于γδT细胞培养的血液抗凝,但肝素钠保护γδT细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液。
- 孙飞陶正中周忠海吕小婷陈玲姚仁南
- 关键词：抗凝剂ΓΔT细胞杀伤功能肝素钠乙二胺四乙酸
- 徐州地区1216例门诊妇女HPV时实荧光定量PCR检测分析被引量：2
- 2017年
- 目的分析徐州地区妇女高危型HPV感染的阳性率和年龄段的关系及亚型的分布情况。方法采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测2015年12月至2016年11月在该院妇科门诊就诊的妇女1 216例,将筛查人群分为6个年龄段,分析阳性结果与年龄段的关系以及不同分型感染的情况。结果在1 216例标本中共检出HPV阳性标本207例,检出率为17.02%,其中30~39岁年龄段就检人数最多且阳性百分比最高30.43%。高危型HPV感染主要为单一型感染70.01%,多重感染中以双重感染为主。检测的亚型主要以HPV-16型多见,依次为HPV-52型、HPV-66型和HPV-58型。结论统计结果发现高危型HPV感染具有明显地域差异。对高危型HPV的检测有利于本地区妇女的筛查和治疗。
- 黄艳红陈玲孙飞陈娜云田礼军
- 关键词：HPVPCR年龄
- ACD保养液中树突状细胞的变化被引量：1
- 2009年
- 目的检测人树突状细胞(DC)在ACD保养液中不同时间的增殖和吞噬能力,为减少非溶血性输血反应提供实验依据。方法抽取8例健康自愿献血者外周静脉血200 ml,ACD-B抗凝,4℃保存,在第1、2、3、4天分别取血20 ml,分离单个核细胞(PBMC),孵育2 h洗涤后,贴壁细胞加入细胞因子联合诱导培养DC。灭活的酵母菌与DC以100∶1比例加入后37℃孵育1 h,取细胞悬液涂片,瑞-姬染色。光镜下计数吞噬酵母菌的DC,计算出DC的吞噬率和吞噬指数。结果正常人外周静脉血第1天培养诱导的DC增殖生长良好,第2天仅有少量DC生长,第3、4天则无DC生长。第1天培养诱导的DC对酵母菌的吞噬率为78%～85%,平均值81%,吞噬指数为254。结论在ACD保养液中的健康人的DC仅在离体后1～2天内能诱导增殖,诱导增殖后的DC具有较强的吞噬功能。DC活性可能与某些非溶血性输血反应有关。
- 姚仁南陈复兴李玺王振德刘军权张赞赵勤孙飞
- 关键词：树突状细胞
- HCV胶体金试纸条在献血者体检中的应用被引量：3
- 2009年
- 姚仁南陈复兴李玺王振德张赞赵勤孙飞
- 关键词：献血者
- 云芝多糖增强人NK细胞杀伤功能的体外研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨云芝多糖(PSK)对体外培养的人自然杀伤(NK)细胞杀伤功能的影响。方法采集健康成年人外周血,分离单个核细胞(PBMC),加入含白细胞介素(IL)-2的NK细胞培养液。培养第10天时加入不同质量浓度(100、75、50、25、10、5μg/m L)的PSK诱导NK细胞48 h,收集细胞检测。用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测诱导前后NK细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a及NKG2D受体表达(PSK诱导为实验组,同时设不加药物及无细胞的空白对照孔为对照组)。通过CCK-8法检测对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性:取质量浓度25μg/m L PSK诱导48 h后NK细胞,调整细胞浓度至1×10~9/L作为效应细胞;调整红白血病肿瘤细胞株K562细胞浓度至5×10~7/L,按效靶比为5∶1、10∶1、20∶1、40∶1、80∶1的比例混合培养于96孔板内,同时设单独效应细胞孔、单独靶细胞孔(实验组)和空白孔(对照组)。结果培养10 d后NK细胞纯度达到78.70%左右。经PSK诱导48 h后,NK细胞的增殖及功能具有一定浓度依赖性,PSK质量浓度在25μg/m L对NK细胞的增殖率(51.62%±3.20%)最为明显(P<0.01),之后逐渐下降。在质量浓度0~100μg/m L可以促进NK细胞的生长和增加NK细胞表面穿孔素、颗粒酶B、CD107a和NKG2D受体表达,以及增强对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性;尤其是当PSK质量浓度为25μg/m L时,颗粒酶B、穿孔素、NKG2D和CD107a表达为55.42%±2.34%、70.49%±1.87%、83.45%±1.77%和85.00%±2.02%,显著高于对照组(25.83%±1.31%、40.79%±1.59%、70.66%±2.39%和72.79%±2.31%)(P<0.01)。在效靶比80∶1时,实验组杀伤活性为57.63%±3.42%,高于对照组(24.78%±2.47%)(P<0.01)。结论 PSK在一定质量浓度下能促进NK细胞的生长,且增强NK细胞的杀伤功能。
- 孙飞陶正中周忠海吕小婷陈娜云陈玲姚仁南
- 关键词：云芝多糖NK细胞细胞增殖杀伤功能
