应瑛
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析
- 为了解猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)在吉林省健康猫群中的流行情况,阐明其ORF2基因的遗传变异特性,本实验采用实时荧光定量PCR检测了采自临床健康宠物猫的口腔棉拭子。将阳性病料处理液接种F81...
- 陈小庆应瑛范胜涛赵艳丽姜雪刘秋艳高玉伟胡桂学
- 关键词：ORF2
- 猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析
- 为了解猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)在吉林省健康猫群中的流行情况,阐明其ORF2基因的遗传变异特性,本实验采用实时荧光定量PCR检测了采自临床健康宠物猫的口腔棉拭子。将阳性病料处理液接种F81...
- 陈小庆应瑛范胜涛赵艳丽姜雪刘秋艳高玉伟胡桂学
- 关键词：基因检测
- 文献传递
- 二乙烯亚胺和甲醛对猫杯状病毒灭活效果比较研究被引量：3
- 2015年
- 为比较二乙烯亚胺(BEI)和甲醛对猫杯状病毒(FCV)的灭活条件,采用终浓度分别为0.05%、0.1%、0.2%和0.3%的甲醛和终浓度分别为0.5%、1%、2%和3%的BEI在37℃对FCV灭活6、12、24、36、48 h,通过微量滴定法检测灭活病毒滴度变化,于F81细胞盲传3代验证病毒灭活效果,采用巢式PCR和ELISA法检测病毒抗原完整性。结果显示:37℃下作用48 h,1%、2%、3%的BEI和0.05%、0.1%、0.2%、0.3%甲醛均可灭活FCV。本研究结果可为FCV灭活疫苗的灭活工艺研究提供参考。
- 王一鸣应瑛陈小庆李响赵艳丽胡桂学
- 关键词：甲醛灭活
- 猫传染性鼻-结膜炎实验室诊断方法研究进展被引量：1
- 2014年
- 猫传染性鼻-结膜炎是由杯状病毒科（Caliciviridae）疱疹病毒属（Vesivirus）的猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）引起的猫及猫科动物重要呼吸道传染病,其主要症状表现为结膜炎、急性口腔溃疡、上呼吸道炎症和慢性胃炎等.自1957年Fastier首次分离鉴定FCV以来,在欧洲、美洲、亚洲均有发现,目前已呈世界性分布[1-2].猫被认为是该病毒的自然宿主.猫杯状病毒的显著生物学特征是仅有一个血清型,同时具有丰富的抗原多样性,遗传变异性也很强,这成为猫杯状病毒及时诊断和有效防制的一大难题.对病毒进行分离鉴定是确切诊断该病毒的惯用方法,对病毒抗体的检测在日常研究中也较为常见.
- 王一鸣应瑛刘秋艳陈小庆马剑钢赵艳丽胡桂学
- 关键词：结膜炎传染性实验室呼吸道传染病
- 吉林省汉坦病毒宿主动物携带病毒的遗传进化分析被引量：7
- 2014年
- 目的对吉林省汉坦病毒（Hantavirus，Hv）宿主动物携带病毒进行遗传进化分析。方法采集吉林省不同地区鼠肺样品，应用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IFA）鉴定出HV感染的阳性样本，利用Trizol试剂提取病毒RNA，RT-PCR法扩增阳性样本中M和S片段基因，并进行测序，应用DNASTAR软件对M和S片段基因的核苷酸同源性进行分析，并与汉城病毒（Seoulvirus，SEOV）参考株进行比较；利用MegAligh软件进行蛋白序列中氨基酸差异性分析；利用MEGA5.0软件进行系统发生分析。结果共捕获719只啮齿动物，其中褐家鼠（R.norvegicus）555只，黑线姬鼠（A.agrarius）74只，小家鼠（胍m12sclzllzs）90只，HV抗原阳性率为1.39％（10／719）；10份阳性样本中，7份来自褐家鼠，2份来自小家鼠，1份来自黑线姬鼠。用全长s引物扩增得到的10株病毒全长s基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在92.8％～95.1％之间，与其他SEOV核苷酸同源性在90.2％～94.7％之间；用M引物扩增得到的部分基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在96.5％～99.5％之间，而与其他SEOV核苷酸同源性在91.5％～97.7％之间；10株病毒全部属于SEOV。黑线姬鼠G蛋白365～769位点问有5个氨基酸差异位点（V494L、C546S、Y626C、M630L和V637I），小家鼠G蛋白365～769位点问主要有5个氨基酸差异位点（C378G／R、F420L、Q436P／R、E535G／A和C589G／W），但同种间在378、436、535和589位点也有差异；黑线姬鼠N蛋白1～430位点间存在P298L变异；小家鼠N蛋白变异位点较多，主要在M24K／N、A37D、1140M、M173K、D192E、L219V、P229A、D237E、H265Y、V284L、T333S、A389G和V425E变异。分离得到的10株病毒根据不同的来源地可分为两个不同的进化分支。结论研究表明吉林省宿主动物携带的HV仍以SEOV为主，其遗传进化呈现多
- 范胜涛高晓龙李元果应瑛国娇张钊伟刘红吴静杨松涛赵永坤秦川高玉伟夏咸柱
- 关键词：汉坦病毒进化
- 猫杯状病毒不同分离株免疫原性的比较被引量：2
- 2015年
- 为确定猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）分离株JL-1、JL-2、JL-3、JL-4、SH免疫原性强弱,将各株灭活后分别制备油乳剂疫苗。将6-12周龄健康非免疫家猫随机分为免疫组和对照组。免疫组皮下接种相应毒株制成的灭活苗,对照组接种等量F81细胞培养液。于接种后不同时间点采集猫血清,应用ELISA方法检测免疫猫Ig G抗体、IL-2、IL-4和IFN-γ含量,评价各株诱导的体液免疫水平;采用MTT法测定淋巴细胞增殖,评价各株诱导的细胞免疫水平。结果表明：各株均能诱导试验猫产生免疫应答,其诱导体液免疫顺序依次为JL-2〉JL-1〉JL-4〉JL-3〉SH,诱导细胞免疫顺序依次为JL-4〉JL-2〉JL-1〉SH〉JL-3,初步确定各分离株免疫原性顺序为JL-2〉JL-4〉JL-1〉JL-3〉SH。
- 王一鸣赵艳丽赵立峰应瑛王开胡桂学杨松涛
- 关键词：分离株免疫原性疫苗
- 5株猫杯状病毒中国分离株的细胞适应性及遗传进化分析被引量：2
- 2016年
- 将CH-JL1、CH-JL2、CH-JL3、CH-JL4、CH-SH 5株猫杯状病毒中国分离株分别在F81细胞上连续传至15代。细胞传代前,测定病毒的细胞半数感染量(TCID_(50)),再以0.1 MOI的感染复数接种细胞。采用RTPCR方法扩增FCV各代次的ORF2基因片段并测序,用DNASTAR和MEGA软件分析其氨基酸变异和遗传进化特点。试验结果显示,细胞适应传代后,FCV各代次毒株滴度逐渐稳定,均位于10^(-9)TCID_(50)/mL^10^(-10)。TCID_(50)/mL之间。ORF2基因测序表明,FCV传代后氨基酸变异位点包括CH—JL1的P57S和G494R、CH-JL3的S440L和N519D、CH—JL4的V614I、CH—SH的K448R。遗传进化分析表明CH—JL2和CH-JL3处于同一进化分支上,同源性为95.9%;CH-JL1和国内FB-NJ-13株、CH-SH和国内GD株分别在一个进化分支,CH-JL4和国外F65株遗传关系较近。5株猫杯状病毒在F81细胞传代后滴度较高,稳定性良好,为将来FCV疫苗株的研发奠定了基础。
- 应瑛王一鸣马剑钢曹东梅李响高玉伟杨松涛胡桂学
- 猫杯状病毒不同分离株致病性的比较被引量：3
- 2015年
- 为确定猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）SH、JL-1、JL-2分离株毒力强弱,将其分别人工接种6-11周龄健康非免疫家猫,分成接种组和对照组。接种前后分别测定各组猫体温、体质量,观察发病情况及临床症状,按照欧洲药典对症状进行计分。于感染后14d麻醉处死,制备病料组织切片,观察组织器官的病理变化。结果显示,家猫感染FCV后总发病率为100%,死亡率为66.7%;SH、JL-1、JL-2组临床症状平均得分分别为8、4、9,对照组得分为1。病理解剖观察发现,猫感染FCV后,以鼻、眼分泌物增加,口腔溃疡为特征,消化道病变较轻微,肺部出现不同程度的变性、出血,呈明显病理性“肉样变”;病理组织学观察发现,肺脏有数量不等的肺泡上皮细胞和巨噬细胞脱落,伴随少量纤维蛋白渗出和弥漫性肺泡损伤。结果表明,FCV SH、JL-1、JL-2分离株均有一定的致病性,其中以JL-2株的毒力最强。
- 王一鸣应瑛刘秋艳陈小庆马剑钢赵艳丽胡桂学
- 关键词：分离株
- 临床健康宠物猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2序列分析被引量：1
- 2015年
- 为了解猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）在健康猫群中的流行情况,分析病毒衣壳蛋白基因的遗传变异特性,本试验采用荧光定量PCR方法检测了8份采集自吉林省临床健康宠物猫的口腔棉拭子,利用F81细胞对检测呈阳性的样品进行病毒分离培养,通过电镜观察、PCR方法对所分离的病毒进行鉴定.结果分离到l株病毒,鉴定为猫杯状病毒,测定其ORF2基因序列全长为2 007 nt,与国内外参考毒株的核苷酸同源性为68.8％～78.4％.遗传进化分析表明,来自中国的3个分离株处于同一分支,亲缘关系较近.
- 陈小庆范胜涛姜雪赵艳丽刘秋艳应瑛高玉伟胡桂学
- 关键词：ORF2
- 猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析
- 为了解猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)在吉林省健康猫群中的流行情况,阐明其ORF2基因的遗传变异特性,本实验采用实时荧光定量PCR检测了采自临床健康宠物猫的口腔棉拭子。将阳性病料处理液接种F81...
- 陈小庆应瑛范胜涛赵艳丽姜雪刘秋艳高玉伟胡桂学
- 关键词：ORF2
- 文献传递
