庞小娟
- 作品数：14 被引量：21H指数：3
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：南京军区医药卫生科研基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Id3基因靶向microRNA表达载体的构建及筛选
- 目的采用RNA干扰(RNAi)技术,在体外将含靶向人Id3基因的microRNA(miRNA)真核表达载体导人人肺腺癌细胞株(A549),观察miRNA对A549细胞中Id3表达的下调作用,为进一步探讨Id3基因在A54...
- 陈芳芳赵晓琴庞小娟贾丽罗冰虞伟李晓军
- 文献传递
- 人分化抑制因子3重组腺病毒的制备及鉴定
- 目的 构建入细胞分化抑制因子3(Id3)重组腺病毒载体,制备并鉴定人Id3重组腺病毒,为研究Id3基因在细胞中的表达及其对细胞功能的影响奠定基础。方法 以pUC57-Id3为模板扩增人Id3基因,将其克隆到质粒pUC18...
- 庞小娟赵晓琴陈芳芳秦浚川李晓军
- 双向电泳和质谱技术分析类风湿关节炎滑膜细胞差异蛋白
- @@类风湿关节炎(rheumatoid arthrltis，RA)是一种受抗原驱动及T细胞介导的全身性自身免疫性疾病，但其发病机制仍未完全明确，因而尚无满意的诊断方法和治疗药物。人们希望能研究出一些检验方法，找到一些诊断...
- 赵晓琴李晓军赵建宁庞小娟陈芳芳虞伟罗冰
- 关键词：类风湿关节炎发病机制双向电泳质谱技术
- 文献传递
- 分化抑制因子3重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 目的构建人细胞分化抑制因子3(Id3)重组腺病毒(Ad-Id3),为研究Id3基因在细胞中的表达及其对细胞的影响奠定基础。方法以pUC57-Id3为模板扩增人Id3基因.将其克隆到质粒pUCl8中,pUCl8-Id3经E...
- 庞小娟赵晓琴彭薇臧宇辉陈芳芳罗冰虞伟秦浚川李晓军
- 文献传递
- 人Id3重组腺病毒的制备及对裸鼠致瘤作用影响的研究
- 分化抑制因子(inhibitorofdifferentiation,Id),又称DNA结合抑制因子(inhibitorofDNAbinding),属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录因子家族...
- 庞小娟
- 关键词：A549细胞腺病毒转基因
- 文献传递
- 腺病毒载体纯化及在肿瘤基因治疗中的应用被引量：9
- 2009年
- 腺病毒是一种线性无包膜的双链DNA病毒,用于载体构建的主要是人类2型和5型腺病毒。现在通过对腺病毒的改造,已经成功构建出第一代、第二代、第三代和条件复制型腺病毒载体。随着腺病毒载体在蛋白质表达中的广泛使用,对高产量、高纯度腺病毒载体的需求量逐渐增大,因此近年来在传统纯化腺病毒载体的基础上发展出各种纯化新方法。同时,由于腺病毒载体自身的一些优点,使其在疫苗和肿瘤基因治疗中也得到了较为广泛的应用。
- 庞小娟李晓军秦浚川
- 关键词：腺病毒载体纯化基因治疗疫苗
- 双向电泳和质谱技术在类风湿关节炎滑膜细胞差异蛋白分析中的应用及意义被引量：5
- 2010年
- 目的 采用2-DE和质谱技术分析RA患者和创伤件关节炎患者关节滑膜组织中FLS蛋白质组学的变化,寻找RA关节滑膜特异性自身抗原.方法 采用2-DE分离6例创伤性关节炎患者及3例RA患者关节滑膜组织中FLS总蛋白质,凝胶经银染显色和图像数据分析识别差异蛋白质点,并用MALDI-TOF-MS对筛选出的差异蛋白质点进行鉴定.结果 RA患者与创伤性关节炎患者中的FLS蛋白质通过2-DE检测,分别检出1 633、1 603个蛋白质点;对2组相互匹配的蛋白质点进行差异分析后,其中蛋白质差异量大于3倍的差异点共有92个,从中选取在RA患者FLS中表达上调的33个差异蛋白质点进行MALDI-TOF-MS 鉴定分析,并与IPI和Swiss-Prot数据库进行比对,共鉴定出包括肿瘤型丙酮酸激酶、α-烯醇化酶、二硫键异构酶A3 前体、谷胱甘肽转移酶、泛素结合酶E2K、血小板活化因子乙酰水解酶、二氢嘧啶酶样2、腺苷酸酶、转醛醇酶、乙酰基辅酶A异构酶、26S蛋白调节亚单位S6a、膜联蛋白A11、过氧化物还原酶1、人色氨酰tRNA合成酶、核纤层蛋白、肌间蛋白、核基质蛋白、肌动蛋白、T-复合物多肽1、葡萄糖调节蛋白75、αB-晶体蛋白、葡萄糖调节蛋白78、未知蛋白：如PSMFA和SELENBP1等30个与RA发病有关的蛋白.结论 RA患者与创伤性关节炎患者FLS间存在差异表达的蛋白质,这些差异蛋白有可能是构成RA关节滑膜的相关自身抗原,并可能在诱导RA自身免疫反应中发挥一定作用.
- 赵晓琴李晓军赵建宁庞小娟陈芳芳虞伟罗冰
- 关键词：类风湿关节炎滑膜成纤维细胞双向凝胶电泳
- 分化抑制因子3重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 庞小娟赵晓琴彭薇臧宇辉陈芳芳罗冰虞伟秦浚川李晓军
- 双向电泳和质谱技术分析类风湿关节炎滑膜细胞差异蛋白
- 目的：用双向电泳和质谱技术分析类风湿关节炎(RA)患者与正常人关节滑膜成纤维细胞(FLS)蛋白质组学的变化，寻找RA关节滑膜特异性自身抗原。方法：采用双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者FLS总蛋白质，凝胶经银染...
- 赵晓琴李晓军赵建宁庞小娟陈芳芳虞伟罗冰
- 关键词：双向电泳类风湿关节炎滑膜细胞质谱技术
- 文献传递
- microRNA干扰Id3基因表达对A549细胞增殖和凋亡功能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究微小RNA(miRNA)干扰细胞分化抑制因子3(Id3)基因表达对人肺腺癌细胞株A549细胞体外增殖和凋亡作用的影响。方法:构建含靶向Id3 mRNA的miRNA所对应寡核苷酸的重组干扰载体pcDNATM6.2-GW/EmGF-PmiRId3(pcDNA/miRId3),通过脂质体转染技术将miRNA干扰质粒pcDNA/miRId3和含Id3基因的重组表达载体pEGFP/Id3共转染A549细胞。荧光显微镜观察EGFP表达情况;流式细胞术(FCM)分析转染24 h后A549细胞的EGFP表达效率;半定量RT-PCR和Western blot技术检测转染后A549细胞内Id3 mRNA及蛋白的表达;MTT法和Annexin V-FITC/7-AAD双染法结合FCM检测靶向Id3基因的miRNA转染A549细胞后对增殖和凋亡的影响。结果:RT-PCR和Western blot结果表明,将pEGFP/Id3和pcDNA/miRId3共转染A549细胞24 h后,A549细胞中外源性Id3 mRNA和Id3蛋白质的表达量均明显受到抑制。MTT和Annexin V/7-AAD双染法结果表明,pEGFP/Id3转染A549细胞24 h后,对A549细胞增殖功能有明显抑制作用,细胞早期凋亡率明显增加,与pEGFP对照组相比均呈统计学差异(P<0.01),但pEGFP/Id3与pcD-NA/miRId3共转染A549细胞后,细胞增殖率和凋亡率均未发生明显变化。结论:外源性Id3基因在A549细胞中的表达能够抑制细胞增殖并诱导凋亡,同时导入靶向Id3 mRNA的miRNA干扰质粒pcDNA/miRId3,可逆转外源性Id3表达对细胞增殖的抑制和致凋亡作用,重组MiRNA表达载体的构建及应用为研究Id3致A549细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用机制奠定了实验基础。
- 陈芳芳李晓军庞小娟赵晓琴王凯罗冰虞伟
- 关键词：RNA干扰MICRORNAID3共转染凋亡
