张云雁
- 作品数:5 被引量:16H指数:3
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 麦芽糖诱导耐碱性木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达被引量:2
- 2011年
- 文章目的是考察麦芽糖诱导木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌WB700中的表达。以麦芽糖为诱导剂,对诱导浓度、诱导时机、诱导温度和麦芽糖的添加方式等主要因素进行了分析比较。当菌体生长至发酵液吸光值OD600达到1.3时加入终浓度为4.5%麦芽糖,37℃,持续诱导10h,木聚糖酶活力达到最高,为56.32U/mL,通过SDS-PAGE检测对比显示:经麦芽糖诱导表达的木聚糖酶比不加麦芽糖诱导的木聚糖酶表达量高,表达效果更明显。结果表明麦芽糖在最佳的诱导条件下,对木聚糖酶的酶活有明显的提高作用。
- 张云雁杨明明段玉兰周煌凯段春燕龚月生
- 关键词:麦芽糖SDS-PAGE
- 耐碱性木聚糖酶基因(xynA)的克隆和表达及利用麦芽糖的诱导表达
- 本试验是通过对NCBI基因库中已经提交的短小芽孢杆菌的基因进行BLAST,通过PCR得到编码木聚糖酶的基因,并实现了该基因在枯草芽孢杆菌中的表达。使用麦芽糖对麦芽糖启动子pglv进行诱导,实现木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中...
- 张云雁
- 关键词:木聚糖木聚糖酶麦芽糖
- 文献传递
- 耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及发酵条件优化被引量:3
- 2010年
- 研究耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草芽孢杆菌中异源表达。从耐碱性木聚糖酶高产短小芽孢杆菌BYG5—20中克隆得到带有自身启动子的木聚糖酶基因xynA,将其构建在大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGJ148中得到重组质粒pGJ148-xynA。采用电转化法将重组质粒pGJ148-xynA转入枯草芽孢杆菌1A747中,得到重组菌电.GJ148-xynA,然后进行诱导表达以及培养基的优化。重组菌GJ148~xynA发酵上清液中木聚糖酶酶活可达93.32IU/ml。耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶基因xynA可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达,为枯草芽孢杆菌木聚糖酶分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。
- 周煌凯龚月生杨明明张云雁宋秀平
- 关键词:木聚糖酶枯草芽孢杆菌发酵条件
- 枯草芽孢杆菌信号肽筛选载体的构建及木聚糖酶基因的表达被引量:3
- 2011年
- 构建枯草芽孢杆菌信号肽筛选载体并用菌体自身信号肽引导表达外源木聚糖酶基因,为枯草芽孢杆菌木聚糖酶高效分泌表达系统的建立奠定基础。利用基因工程的原理和方法,将壮观霉素抗性基因(spec)与短小芽孢杆菌的木聚糖酶基因(xynA)克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体GJ148上,构建枯草芽孢杆菌信号肽筛选载体pYG,将枯草芽孢杆菌信号肽Epr克隆到已构建载体上,以枯草芽孢杆菌WB700为表达宿主,引导木聚糖酶基因进行表达。最终成功构建枯草芽孢杆菌信号肽筛选载体pYG,将枯草芽孢杆菌信号肽Epr克隆到pYG上,在WB700中引导并表达木聚糖酶基因。试验证明信号肽筛选载体可以成功构建,在克隆入信号肽后可成功表达木聚糖酶基因,为信号肽的系统性筛选和木聚糖酶高效表达提供依据。
- 段春燕龚月生范鑫杨明明张云雁周煌凯王新国
- 关键词:木聚糖酶基因信号肽枯草芽孢杆菌
- 麦芽糖诱导耐碱性木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达被引量:8
- 2011年
- 考察麦芽糖诱导木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌WB700中的表达。以麦芽糖为诱导剂,对诱导质量分数、诱导时机、诱导温度和麦芽糖的添加方式等主要因素进行了分析比较。结果表明,当菌体生长至发酵液吸光值OD600达到1.3时加入终质量分数为4.5%麦芽糖,37℃,持续诱导10 h,木聚糖酶活力达到最高,为56.32 U。通过SDS-PAGE检测对比显示:经麦芽糖诱导表达的木聚糖酶比不加麦芽糖诱导的木聚糖酶表达量高,表达效果更明显。
- 张云雁杨明明周煌凯段春燕龚月生
- 关键词:麦芽糖SDS-PAGE