张亚兰
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 基于自体全血凝集的三特异分子基因表达载体构建
- 自体红细胞凝集试验是一种针对血液中被检物的快速筛查方法。取待检者1滴血,置于凹孔板中,并向血中滴加检测试剂,5min内即可肉眼判定结果,血液凝集者为阳性样本。基于自体红细胞凝集试验原理制备的检测试剂,其主要成分是一种双/...
- 邵长利张亚兰吕茂民李卉章金刚
- 文献传递
- 禽流感病毒HA基因在S2细胞中的表达与鉴定被引量:2
- 2010年
- 根据GenBank中发表的禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)序列设计了1对引物并分别引入NotⅠ和NcoⅠ酶切位点,用PCR方法扩增AIV HA基因片段。回收目的基因片段,并用NotⅠ/NcoⅠ限制性内切酶消化,经纯化后,将其定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5中,构建重组表达载体pMT-HA。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin(杀稻瘟素)进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-HA。提取S2-HA细胞的基因组DNA,PCR检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用终浓度500μmol/L的硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western Blotting检测。结果表明,成功构建了重组表达载体pMT-HA,转染细胞经10 mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达HA的果蝇S2细胞株。
- 史利军张亚兰尹惠琼章金刚李刚
- 关键词:禽流感病毒HA基因
- 抗人红细胞H抗原非凝集型单抗可变区基因的克隆与分析
- 目的:克隆抗人红细胞H抗原非凝集型杂交瘤细胞株2E8中的单克隆抗体重链、轻链可变区基因.
方法:从单克隆抗体细胞株2E8中提取总RNA,采用RT-PCR与5'RACE两种不同的方法克隆抗体的可变区基因,并对其...
- 邵长利张亚兰李卉李伟静吕茂民章金刚
- 关键词:H抗原RT-PCR氨基酸残基可变区基因
- 文献传递
- 基于自体全血凝集的三特异分子基因表达载体构建
- 2006年
- 自体红细胞凝集试验是一种针对血液中被检物的快速筛查方法.取待检者1滴血,置于凹孔板中,并向血中滴加检测试剂,5min内即可肉眼判定结果,血液凝集者为阳性样本.基于自体红细胞凝集试验原理制备的检测试剂,其主要成分是一种双/多功能分子,它既能与红细胞结合,又能与血中的被检物结合,通过双/多功能分子的桥联作用,使红细胞产生凝集.该技术具有操作简单、反应时间短、结果可目测等优点.……
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- 禽减蛋综合征腺病毒载体表达禽流感病毒血凝素基因的研究
- 腺病毒是研究得最为清楚的动物病毒之一,其研究成果极大的丰富了现代分子生物学内容,如腺病毒5型已经成为现代分子生物学和基因工程研究的良好模型和工具;腺病毒载体已经广泛应用于基因工程疫苗和基因治疗载体的构建。与哺乳动物腺病毒...
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- 文献传递