张先平
- 作品数：57 被引量：189H指数：9
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- 锰对大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响及GSH的拮抗作用
- 本文研究了氯化锰对大鼠生精细胞凋亡和增殖的影响，探讨锰诱发生精细胞凋亡的机理及GSH对染锰所致的生精细胞凋亡的作用。得出结论：1、15mg/kg和30mg/kg氯化锰可诱发大鼠生精细胞凋亡，且AI随染锰剂量的增加而增加，...
- 张先平
- 关键词：锰生精细胞GSH细胞凋亡
- 文献传递
- 长期低剂量锰染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期阻滞和凋亡的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期及细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组和锰染毒组,每组8只。锰染毒组腹腔注射2、4和8 mg/kgMnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5次/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;Western Blot检测FOXO3A、P16、P21、CDK2、CDK4、CDK6、BIM和Caspase-9的表达;TU-NEL法检测生精细胞凋亡。结果随锰染毒剂量的增加,生精小管呈现生精细胞层数减少、生精细胞排列紊乱、数量减少等变化;随锰染毒剂量的增加,睾丸组织FOXO3A的表达逐渐上升;P16、P21表达量逐渐增加;CDK2、CDK4则逐渐降低,CDK6的表达未见明显改变;BIM、Caspase-9表达及生精细胞凋亡指数均随锰染毒剂量的增加逐渐增加。结论长期低剂量锰染毒可能通过诱导FOXO3A表达,引起子代大鼠生精细胞的细胞周期阻滞和细胞凋亡。
- 王乾兴于明明张先平
- 关键词：细胞周期睾丸
- 氧化低密度脂蛋白通过氧化应激诱导小鼠造血干细胞衰老被引量：1
- 2013年
- 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)体外诱导造血干细胞(HSCs)衰老的可能机制。方法用免疫磁性分选法分离纯化小鼠HSC,与ox-LDL共培养,采用β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老HSC,流式细胞术检测HSC细胞周期分布,混合集落培养(CFU-Mix)检测HSC混合集落形成能力。流式细胞术和免疫荧光检测HSC产生活性氧(ROS)的量,酶学比色法检测HSC培养上清液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)含量。Southern blot和TRAP-PCR法检测HSC端粒长度和端粒酶活性。结果 ox-LDL诱导HSC呈现典型的衰老生物学表现:SA-β-Gal染色阳性细胞率显著增高(P<0.01);G0/G1期比例明显增加,S期显著减少(P<0.01);CFU-Mix数量显著减少(P<0.01)。衰老HSC端粒缩短(P<0.05),端粒酶活性降低(P<0.05)。衰老HSC ROS含量显著增加(P<0.01),细胞培养上清液中SOD、GSH-Px活力下降、MDA含量增加(P<0.05)。结论 ox-LDL能通过氧化应激诱导HSC衰老,其机制可能与ROS的蓄积及抗氧化酶活性受抑引起端粒功能异常有关。
- 张先平张贵海陈斌刘俊魏强王璐王亚平
- 关键词：衰老造血干细胞氧化低密度脂蛋白氧化应激
- 母鼠长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠睾丸中氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组,低、中、高剂量组,每组8只。锰染毒组分别腹腔注射2、4和8 mg/kg MnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5 d/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;q RT-PCR、免疫组织化学、Western blot分别检测叉头蛋白转录因子O 3a(Fox O3a)、与Bcl-2相互作用的细胞死亡调节子(Bim)、半胱天冬酶9(Caspase-9)m RNA和蛋白的表达;TUNEL技术检测生精细胞凋亡。结果 (1)HE染色可见各锰染毒组睾丸生精小管呈现不同程度的形态学改变。随着锰染毒剂量的增加,生精细胞层数逐渐减少,各级生精细胞排列紊乱、数量减少或缺如,管腔内成熟的精子数目减少;(2)中、高剂量组精子密度、精子活动率降低,而精子畸形率上升(P<0.05);(3)各锰染毒组大鼠睾丸组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性随锰染毒剂量的增加而降低(P<0.05);而睾丸组织内丙二醛(MDA)含量和活性氧(ROS)水平随锰染毒剂量的增加逐渐升高(P<0.05);(4)在m RNA和蛋白水平,Fox O3a的表达随锰染毒剂量的增加逐渐上升(P<0.05);低剂量组Bim m RNA表达量未见变化,但在中、高剂量组则降低,而细胞死亡调节因子表达量则随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(5)Caspase-9 m RNA和蛋白表达量在各锰染毒组均升高,且随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(6)各锰染毒组大鼠均可见生精细胞凋亡,其凋亡指数高于对照组,且随锰染毒剂量的增加而上升(P<0.05)。结论长期低剂量锰染毒可抑制子代大鼠睾丸内抗氧化酶活性或(和)增加MDA含量,提高睾丸组织ROS水平,促进Fox O3a和Bim表达,启�
- 王乾兴于明明张先平
- 早期自然流产胎盘绒毛基质金属蛋白酶-2表达增强被引量：3
- 2006年
- 王乾兴谭兵兵谭晓珊杨高巧张先平
- 关键词：基质金属蛋白酶-2早期自然流产胎盘绒毛病理性妊娠胎盘形成子宫蜕膜
- 谷胱甘肽拮抗锰致雄性大鼠生殖损伤的研究被引量：5
- 2011年
- 目的:研究谷胱甘肽(GSH)对锰致雄性大鼠睾丸氧化损伤的拮抗作用。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为3组进行急性和亚急性染毒。染锰组腹腔注射30mg/kgMnCl2.4H2O染毒1周(急性染毒)和4周(亚急性染毒),GSH拮抗组染毒后再给予2周1mmol/kgGSH,对照组染毒后给予生理盐水。TUNEL法检测生精细胞凋亡;化学比色法检测睾丸丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果:急性锰染毒时,染锰组生精细胞凋亡指数和睾丸丙二醛含量高于对照组和GSH拮抗组(P<0.01);各组间谷胱甘肽过氧化物酶活性无差异。亚急性锰染毒时,染锰组生精细胞凋亡指数和睾丸丙二醛含量高于对照组和GSH拮抗组(P<0.01),GSH拮抗组高于对照组(P<0.01);染锰组睾丸谷胱甘肽过氧化物酶活性低于对照组和GSH拮抗组(P<0.01)。结论:及时补充谷胱甘肽可通过抑制脂质过氧化作用而拮抗锰引起的雄性大鼠生精细胞凋亡。
- 王乾兴金华张先平
- 关键词：谷胱甘肽锰生精细胞拮抗作用
- 长期氯化锰腹腔注射母鼠的子代雄鼠生精细胞凋亡变化及其机制探讨被引量：1
- 2018年
- 目的探讨母代大鼠长期氯化锰腹腔注射对子代雄性大鼠睾丸组织生精细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法取健康雌性SD大鼠32只随机分为观察1、2、3组和对照组,各8只,分别腹腔注射2、4、8 mg/kg的MnCl_2·4H_2O和等容生理盐水,1次/d,连续注射5 d后休息2 d,共8周。各组雌鼠与正常雄鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒,剂量不变,共染毒14周。从各组雌鼠的12周龄子代雄性大鼠中随机选取8只断头处死后取睾丸组织HE染色观察睾丸生精小管结构,TUNEL法测算生精细胞凋亡指数(AI),化学荧光法检测睾丸组织活性氧簇(ROS)水平,Western blotting法检测睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12和Caspase3蛋白。结果观察1、2、3组和对照组AI分别为9.05%±1.02%、15.87%±1.31%、19.59%±1.12%、5.72%±0.53%,各组AI相比,P均<0.05。观察1、2、3组和对照组雄性子鼠睾丸组织ROS水平(以荧光强度表示)分别为335.67±41.12、452.75±37.55、547.25±41.11、210.32±37.58,各组睾丸组织ROS水平相比,P均<0.05。观察1、2、3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05),观察2、3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于低剂量组(P均<0.05),观察3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于观察2组(P均<0.05)。结论长期氯化锰腹腔注射母鼠的子代雄鼠生精细胞凋亡水平较高。其机制可能是母鼠长期氯化锰染毒可以导致子代雄鼠睾丸组织ROS水平升高,激活内质网特异的CHOP/Caspase12信号通路,最终激活Caspase3。
- 王乾兴于明明李姣路健汤贤春张先平
- 关键词：氯化锰生精细胞
- 当归多糖联合阿糖胞苷诱导人白血病KG1α细胞株衰老的实验研究被引量：7
- 2014年
- 作者实验室最新研究发现,当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对延缓造血干细胞衰老有明确的调控作用。白血病是一种造血干细胞水平的恶性血液肿瘤,ASP对白血病细胞有无调控衰老的作用却未见相关报道。该研究以对数生长期人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株KG1α为研究对象,将其分为当归多糖组(ASP组),阿糖胞苷组(Ara-C组),当归多糖与阿糖胞苷联合组(ASP+Ara-C组)和对照组,分别加入不同浓度的ASP,Ara-C和ASP+Ara-C,作用不同时间,旨在研究当归多糖联合阿糖胞苷诱导人白血病细胞株KG1α衰老的作用及其相关机制。结果显示,ASP,AraC,ASP+Ara-C在体外能明显抑制KG1α细胞增殖,使细胞阻滞于G0/G1期;细胞呈现衰老形态学特点;衰老染色阳性细胞率显著增高;并能显著上调衰老相关蛋白P16与RB的表达,ASP+Ara-C组的上述指标更加显著。综上所述,ASP与Ara-C诱导KG1α细胞衰老的机制可能与调控衰老相关蛋白的表达有关,提示ASP与抗肿瘤药物联合用药在白血病治疗中可起到更好作用。
- 徐春燕耿珊刘俊朱家红张先平姜蓉王亚平
- 关键词：当归多糖白血病衰老
- 生理性孕酮撤退过程中小鼠子宫角组织蛋白激酶B、糖原合成激酶3β的表达观察被引量：1
- 2017年
- 目的观察生理性孕酮撤退小鼠子宫角组织中蛋白激酶B(Akt)及糖原合成激酶3β(GSK3β)的表达变化。方法 90只未交配健康成年雌性C57BL/6J小鼠,制作生理性孕酮撤退模型,分别在孕酮撤退0、8、12、16、20、24、32、40、48 h(48 h为小鼠生理性孕酮撤退周期)时处死10只小鼠,收集子宫角组织。采用real-time PCR法检测孕酮撤退各时点小鼠子宫角组织Akt、GSK3β mRNA,采用Western blotting法检测孕酮撤退各时点小鼠子宫角组织总蛋白激酶B(t-Akt)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)及3βp-Akt及磷酸化糖原合成激酶(p-GSK3β)。结果随孕酮撤退时间延长,Akt mRNA及蛋白相对表达量逐渐降低,孕酮撤退20 h时达到最低值,后随孕酮撤退时间逐渐延长,Akt mRNA及蛋白相对表达量逐渐升高。孕酮撤退8 h时GSK mRNA及蛋白相对表达量高于孕酮撤退0 h时(P<0.05);随孕酮撤退时间延长,GSK mRNA及蛋白相对表达量逐渐降低,孕酮撤退24 h时达到最低值,后随孕酮撤退时间逐渐延长,GSK mRNA及蛋白相对表达量逐渐增加。孕酮撤退20 h小鼠子宫角组织Akt、GSK3β mRNA表达量低于孕酮撤退后0、48 h(P均<0.05)。与孕酮撤退0 h比较,孕酮撤退20 h时小鼠子宫角组织p-Akt、p-GSK3β的相对表达量均降低(P均<0.05)。与孕酮撤退8 h比较,孕酮撤退20 h时小鼠子宫角组织p-GSK3β的相对表达量降低(P<0.05)。与孕酮撤退20 h比较,孕酮撤退48 h时小鼠子宫角组织p-Akt、p-GSK3β的相对表达量均升高(P均<0.05)。结论生理性孕酮撤退小鼠子宫角组织中存在Akt表达随时间下降后上调,GSK3β表达随时间上调后下降后再次上调。Akt/GSK-3β信号通路可能在鼠孕酮撤退过程中起重要作用。
- 时灿灿于明明张先平陈丽刚王乾兴
- 关键词：月经蛋白激酶B动物实验
- 黄芪多糖对衰老小鼠造血干细胞凋亡的影响被引量：3
- 2021年
- 目的:研究黄芪多糖(APS)对衰老小鼠造血干细胞(HSCs)凋亡的的影响,探讨APS对D-半乳糖致小鼠HSCs损伤的保护机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、APS组。模型组用D-半乳糖皮下注射建立小鼠HSCs衰老模型;APS组在模型组基础上给予APS灌胃;空白组与模型组均给予等剂量生理盐水(NS)灌胃。免疫磁珠法分选HSCs,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测衰老细胞、免疫印迹法检测p53蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组HSC SA-β-gal染色阳性率、G1期比例、细胞凋亡率及p53蛋白表达均明显增加;S期比例下降。与模型组比较,APS组HSC SA-β-gal染色阳性率、G1期比例、细胞凋亡率、p53蛋白表达均降低;S期比例增加。结论:APS可能通过降低p53表达,抑制细胞凋亡而延缓小鼠HSCs衰老,对D-半乳糖致小鼠HSCs损伤起保护作用。
- 唐石欢张先平彭露龙婷张慧刘玲汤鲜陈浩
- 关键词：黄芪多糖造血干细胞抗衰老细胞凋亡
