张大鹏
- 作品数：17 被引量：82H指数：5
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金高等学校特色专业建设点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 生物技术综合大实验开设的实践与探索被引量：15
- 2011年
- 对生物技术综合设计性实验的特点、实施方法、教学效果等进行了系统的总结与分析。实践表明,生物技术综合大实验提高了学生对专业文献资料获取的能力,培养了学生在科研工作中严谨的作风以及独立分析问题和解决问题的能力,激发了学生对实验知识及实验技能的学习兴趣和参与实践的积极性,是培养学生综合素质和创新能力的有效途径。
- 陈鹏武永军张大鹏刘林丽
- 关键词：生物技术教学改革
- 兔出血症病毒衣壳蛋白VP60的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4
- 2012年
- 【目的】构建兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因的原核表达载体,进行原核表达并制备其蛋白抗体。【方法】以保存的VP60基因的质粒(pTeasy-VP60)为模版,用PCR方法获得VP60基因,并将其克隆到pET28a(+)载体上,构建重组表达载体pET28a(+)-VP60,酶切鉴定和测序验证后转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,优化诱导表达时间和IPTG浓度;利用镍离子螯合层析纯化重组蛋白,并制备了高效价的抗VP60多克隆抗体。【结果】成功构建了兔出血症病毒衣壳蛋白VP60的原核表达质粒pET28a(+)-VP60,其在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,重组蛋白分子质量为60ku,制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性。【结论】成功实现了VP60基因的原核表达,制备了重组蛋白VP60的多克隆抗体,为进一步的VP60转基因研究奠定了基础。
- 张大鹏吕宁符容婕郭蔼光
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 小麦Glu-D3和Glu-B3位点LMW-GS基因特异引物设计与PCR扩增被引量：28
- 2004年
- 用CTAB法提取小麦基因组DNA ,根据GenBank中公布的已知LMW GS基因序列 ,设计并合成染色体位点特异PCR引物 1～ 7;利用特殊小麦材料———六倍体普通小麦阿勃二体、1A、1B和 1D缺体 ,四倍体小麦及二倍体的一粒小麦和节节麦的基因组DNA为模板 ,在优化的PCR体系下进行特异性扩增和引物验证。结果表明 :引物 3和引物 4为小麦谷蛋白Glu D3位点LMW GS基因特异PCR引物 ,用其进行扩增时 ,循环反应条件为 :94℃变性 1min ,6 2℃退火 1min ,72℃延伸 2min。扩增产物大小约 1.6 0kb ,包括了启动子和完整编码区。引物 5和 7为小麦谷蛋白Glu B3位点LMW GS基因特异PCR引物 ,用其进行扩增时 ,循环条件为 :94℃变性 1min ,6 4℃退火 1min ,72℃延伸 2min。扩增产物大小约 1.4 5kb左右 ,包括了启动子和完整编码区。此外 ,用引物 3和 4通过PCR技术克隆到小偃 6号小麦Glu D3位点LMW GS基因(登录号为AY2 6 336 9) ;该基因编码的LMW GS含 9个Cys残基。这是首次发现含 9个Cys残基的LMW GS基因。它可能是小偃 6号加工品质优良的主要原因之一。
- 赵惠贤郭蔼光胡胜武范三红张大鹏任思霖王瑞娟
- 关键词：小麦引物设计PCR扩增
- 人骨形成蛋白-3成熟肽基因转化油菜的研究
- 人骨形成蛋白3(hBMP-3)属于TGF-β超家族的一员,可以诱导间充质细胞分化为软骨和骨,在胚胎时期骨骼发育和骨再生修复中起着重要的作用,而且对胚胎发育过程中中胚层的诱导和分化、造血组织的发育以及神经系统的发育和修复等...
- 张大鹏
- 关键词：人骨形成蛋白基因转化真核表达系统遗传转化系统造血组织油菜
- 文献传递
- 小麦TaDRLea3-2基因的克隆及胁迫诱导表达分析被引量：3
- 2016年
- 胚胎发育后期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA蛋白)是植物体中广泛存在的一类与渗透调节相关的家族蛋白,植物受非生物胁迫会大量表达。该研究采用同源克隆技术,从干旱诱导的小麦品种‘郑引1号’(Triticum aestivum L.)中获得1个新的LEA3家族基因(TaDRLea3-2),该基因全长668bp,编码区为570bp,编码189个氨基酸。生物信息学分析表明该蛋白为亲水性蛋白,二级结构以α-螺旋为主,含有9个由11个氨基酸组成的保守结构域,为典型的LEA3蛋白,存在3个磷酸化位点,无信号肽结构域及跨膜结构域,可能定位于细胞质中;实时定量PCR结果表明,TaDRLea3-2基因受干旱、高盐、低温诱导表达,同时也受外源ABA诱导,推测TaDRLea3-2为ABA依赖型LEA3基因,以不同机制参与小麦对非生物胁迫的应答过程,为深入分析小麦LEA3家族蛋白的抗逆机制奠定了基础。
- 梁雅珺于正阳强智全杜娅朱维宁张大鹏张林生
- 关键词：小麦同源克隆实时定量PCR
- 提高实践能力,培养科学精神——生物化学综合大实验课程教学的实践与探索被引量：9
- 2018年
- 以酵母蔗糖酶为研究对象,从实验设计的目的、具体内容和技术路线、实施的前期准备、实施的过程、时间安排和考核方式等方面,对生物化学综合大实验课程教学进行了实践与探索。该课程使学生实验操作的技能、团结合作的精神、严谨的科学态度、分析问题和解决问题的能力,都得到了很好的训练和提高,是提高学生综合素质和创新能力的有效途径。
- 李科友徐全乐张大鹏张新梅白娟
- 关键词：生物化学酵母蔗糖酶综合大实验
- 根癌农杆菌介导的人骨形成蛋白-3成熟肽基因向油菜转化的研究被引量：6
- 2004年
- 用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4～5d苗龄的下胚轴;根癌农杆菌为LBA4404,其Ti质粒pCAMBIA-hBMP3m含hBMP-3m基因。切取2mm左右的下胚轴侵染根癌农杆菌后在分化培养基(MS+5.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA)上共培养2d,然后转到附加25mg/L潮霉素和500mg/L羧苄青霉素的分化培养基上。切下分化出的茎芽,插入附加25mg/L潮霉素的生根培养基(MS+0.4mg/LIBA)中,形成完整的植株。经PCR检测和Southernblot分析,证实hBMP-3m基因已插入到油菜细胞基因组中。
- 张大鹏郭蔼光
- 关键词：根癌农杆菌介导油菜下胚轴转基因
- 基因工程课程教学改革探索与实践被引量：3
- 2014年
- 基因工程是生物技术专业的必修课程,为了满足创新型人才培养的需要,我们应对基因工程教学内容体系、教学方法、教学手段和考核方式等方面进行改革,从而提高了基因工程课程的教学质量,全面提升学生的综合素质和创新能力。
- 刘香利王保莉张大鹏刘华伟
- 关键词：基因工程教学改革
- 基于“云班课”平台“三羧酸循环”教学的实践与探索被引量：2
- 2020年
- 基于信息化移动教学平台"云班课",以生物化学糖代谢中的"三羧酸循环"为例,按照"课前自主预习,课内激发兴趣,课后知识延伸"三部曲,利用故事、联想、归纳、口诀、动画、漫画、情景剧等多种形式启发式教学,提高学生学习兴趣,培养学生自学能力和科学素养。把祖国的母亲河——黄河与"三羧酸循环"相联系,使枯燥知识活起来,动起来,化抽象为具体、化深奥为浅显,寓教于乐,激发学生爱国情怀和创新意识。强化教师主导作用,突出学生主体地位。
- 李科友张新梅张劲罗鑫娟王倩张大鹏陈鹏徐全乐肖亮
- 关键词：生物化学三羧酸循环黄河
- 石羊河流域河流生态系统服务功能及农业节水的生态价值评估
- 随着人类对河流生态系统的干扰和影响的增强,出现了河道断流、水环境污染等生态系统功能退化现象,评估河流生态系统服务功能的价值研究成为国际上生态经济学研究的热点。科学地评估河流生态系统服务功能的价值有助于全面认识水资源的价值...
- 张大鹏
- 关键词：石羊河流域条件价值法支付意愿
- 文献传递
