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HIV-P24核酸适配体的筛选被引量：5: 2012年; 目的利用SELEX技术筛选HIV-P24的核酸适配体,为艾滋病的诊断和治疗奠定基础。方法以重组P24为筛选靶,用SELEX技术从随机寡核苷酸库中筛选与HIV-P24结合的寡核苷酸,利用凝胶阻滞实验鉴定第12轮筛选到的寡核苷酸与HIV-P24的结合,再用Dot-blot法筛选出与HIV-P24结合的核酸适配体,并检测核酸适配体识别HIV-P24的特异性。结果 Dot-blot筛选到5条与HIV-P24有较强结合能力的核酸适配体,且均为不同的序列。特异性检测显示,18和26号配体只与HIV-P24特异性结合,而与人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脱脂奶粉均无明显结合。结论成功筛选到2条特异结合HIV-P24的核酸适配体,为其应用于艾滋病诊断和治疗提供了实验基础。; 张宁毛爱红马瑾廖世奇张丽琼王晓清马君; 关键词：SELEX技术核酸适配体

Aptamer介导的小干扰RNA靶向提送体系的应用基础研究: 毛爱红廖世奇葛廷陈桦张宁马瑾王宇仙; “Aptamer介导的小干扰RNA靶向递送体系应用基础研究”属基础医学研究领域中的生物医学工程学和药物学研究领域中的生物药物学及临床研究领域中的肿瘤学。项目的主要技术内容为利用SELEX技术筛选到可与前列腺癌细胞表面抗...; 关键词：; 关键词：前列腺癌化疗药物生物医学工程

同时检测HIV抗原(P24)和基因降低窗口期的应用技术研究: 廖世奇袁红霞田彩平马瑾毛爱红王黎何贵山王怡云王晓清张宁陈桦庞鑫张洁渝张丽琼唐文茹魏政丽; 该课题采用核酸信标配基p24抗原检测技术和基因扩增技术对HIV- p24抗原和基因同时进行实时定量-PCR检测。首次研制艾滋病抗原p24和基因同时检测技术，该技术可提高对艾滋病病毒检测的灵敏度和特异性，达到缩小窗口期的目...; 关键词：; 关键词：艾滋病病毒检测基因组学

大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建被引量：2: 2011年; 为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催化连接后,CaCl2法转化重组质粒pPICZα-A-sbp至大肠杆菌DH5α中,成功构建出sbp随机突变文库,库容量约为1.77×106 cfu。; 曾家豫郑群廖世奇王黎袁红霞杨海棠张丽琼张宁; 关键词：大豆过氧化物酶易错PCR 基因文库随机突变酶定向进化

靶标替换消减SELEX技术筛选小鼠IgG Fc片段的DNA配基及其活性鉴定被引量：4: 2011年; 建立高特异性和亲和力的小鼠IgGFc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配基进行活性鉴定.经过16轮筛选,得到了与小鼠IgG不同亚类相同Fc片段特异性结合的寡核苷酸配基(IgG的Fc配基).特异性分析显示,此配基只与小鼠IgG特异性结合,与胰蛋白酶、小牛血清白蛋白、人血清均无明显结合.高压液相色谱和凝胶阻滞结果均说明了配基和靶蛋白具有特异结合.通过使用靶标替换消减SELEX技术可以有效得到小鼠IgG不同亚型相同部分Fc片段的特异性结合配基,为不同分子相同部位的分子作用机制,以及应用于小鼠抗体亲和层析的研究奠定基础.; 陈桦葛廷王小琦廖世奇马瑾王黎庞鑫张宁张丽琼张洁瑜王晓清; 关键词：SELEX 特异性

Aptamer介导的小干扰RNA靶向递送体系的应用基础研究: 毛爱红廖世奇葛廷陈桦张宁马瑾王宇仙; RNAi在阐明基因功能、鉴定药物靶点、开发靶向治疗药物等方面具有广泛应用。自2004年第一个siRNA类治疗药物进入临床试验以来，现已证明与基因相关的疾病都可能成为siRNA潜在的靶点，如恶性肿瘤、病毒感染、遗传疾病、代...; 关键词：; 关键词：靶向治疗药物适配体

抗菌肽DCD-1L在毕赤酵母中的表达及其条件优化被引量：1: 2011年; 本文将抗菌肽DCD-1L在毕赤酵母SMD1168中表达并优化其表达条件。利用重叠延伸PCR法获得DCD-1L基因并将其重组到质粒pPICZα-A中；将重组质粒pPICZ-A—DCD-1L转化毕赤酵母蛋白酶缺陷株SMD1168并诱导表达；通过抑菌圈试验确定其最适表达时间、温度、pH值和甲醇诱导量。结果表明：最适表达时间为48h，温度为28℃，pH值为6，甲醇诱导量为终浓度0.5％。; 张丽琼廖世奇王鸣刚曾家豫王黎袁红霞郑群张宁; 关键词：基因表达

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张宁