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猪IFN-γ mRNA竞争性RT-PCR定量检测方法的建立被引量：1: 2006年; 无菌分离的猪外周血单个核细胞(PBMC),经ConA体外刺激培养15 h后提取细胞总RNA。以此总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到了435 bp的IFN-γ基因。把扩增到的IFN-γ基因与pMD18-T载体连接,构建了pMD-IFN435重组质粒。用另一对引物对重组质粒pMD-IFN435内部进行PCR扩增,得到了257 bp(含PstⅠ酶切位点)的基因片段,将此基因片段连接到pMD18-T载体上构建了pMD-IFN257重组质粒。将pMD-IFN257双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段与pMD-IFN435双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段连接,得到了含有367bp目的片段的重组质粒pMD-IFN367,即内标准DNA模板。以定量后的pMD-IFN367与2倍梯度稀释的pMD-IFN435进行竞争PCR扩增,建立了能够准确、方便定量检测猪IFN-γmRNA的标准竞争曲线的线性回归方程(y=0.414x-1.864)。; 谢印乾高云英沈志强朱和鸣管宇王茹张锋钢; 关键词：IFN-Γ基因 RT-PCR

肉牛采食柴胡秸秆中毒病例的诊治报告: 2017年; 1发病情况及症状宝鸡南部山区某肉牛养殖场，共饲养秦川牛117头，在两个圈舍喂养，其中1号舍存栏青年牛54头，2号舍存栏母牛、犊牛和青年牛63头，平时以玉米秸秆和青贮饲料为主，每日补饲少量精料，分槽饮用自来水，场内无专职兽医。2015年10月7日下午，该场从附近药田收获部分带籽柴胡秸秆，并给1号舍的牛群投喂，10月8日早上，饲养员发现1头牛死在舍内，随后有23头牛陆续出现精神沉郁、; 张锋钢; 关键词：肉牛诊治报告中毒病例柴胡采食发病情况

猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展被引量：27: 2006年; 猪繁殖与呼吸综合征病毒是能够引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸症状的严重危害养猪业的一种重要病原。其特异的免疫学特征给疫苗的设计与研制带来一定的困难。近年来,对其免疫学研究取得了重要的进展,特别是在病原的基本免疫学特征、体液免疫与细胞免疫特征、免疫抑制与免疫调节等方面做了深入研究与分析。同时,也对参与该病免疫应答的细胞及细胞因子和所引起的免疫病理学方面做了详细的研究。这些都为猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究提供了新的思路和方法。; 谢印乾沈志强王桂花张锋钢高云英; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫病理学呼吸症状

关中西部地区部分规模蛋鸡场三种主要疫病防控现状调查: 2016年; 随着规模化集约化养殖模式的推广和活禽交易运输的日益频繁，蛋鸡场疫病的种类不断增多，疫情形势愈加复杂。有资料表明，高致病性禽流感、新城疫、鸡白痢、鸡传染性支气管炎是对蛋鸡养殖业造成严重危害的几种传染病，它们与H9亚型禽流感病毒、鸡毒支原体、大肠杆菌等致病微生物混合感染或激发感染，给鸡场疫病的诊断与防治带来困难。; 杜世敏张锋钢李燕丽孟姣; 关键词：规模蛋鸡场高致病性禽流感新城疫鸡白痢

猪肺炎支原体的分离及分子生物学鉴定: 从山东某猪场送检的疑似猪支原体肺炎的病猪中用Friss培养基进行了猪肺炎支原体的分离,并对分离菌株进行了PCR鉴定和P46基因的克隆和序列分析,同时对培养物倍比稀释后进行了PCR扩增.结果成功分离到一株猪肺炎支原体,其P...; 张锋钢沈志强高云英王金良谢印乾管宇刘吉山; 关键词：猪肺炎支原体 PCR鉴定 P46基因分子生物学; 文献传递

猪肺炎支原体的分离及蜂胶佐剂灭活苗研究: 本文对猪肺炎支原体的分离及蜂胶佐剂灭活苗进行了研究。结果表明，蜂胶佐剂苗接种后对受试猪只的精神、饮食无不良影响;注射部位无肿胀和组织坏死;具有轻微地促生长作用，但是差异不显著;蜂胶佐剂苗能够快速、高效地启动体液免疫应答，...; 张锋钢; 关键词：猪肺炎支原体蜂胶佐剂体液免疫应答促生长作用组织坏死油苗; 文献传递

奶牛接种布鲁氏菌A 19疫苗后血清循环抗体检测报告被引量：1: 2017年; 为了掌握奶牛接种布病A19疫苗之后抗体的消长规律,笔者采用布病平板凝集初筛+试管凝集复核定性联合试验、布鲁氏菌c ELISA抗体试验这2种方法,分别对50头奶牛进行了布病A19疫苗免疫抗体测定。结果显示,在免疫6个月之后,2种方法检测均表明,牛群中24%(12/50)的牛只布病抗体为阳性;免疫8个月之后,布病平板凝集初筛+试管凝集复核定性联合试验结果表明,牛群中10%(5/50)的牛只抗体为阳性,而c ELISA抗体检测试验结果则为0;免疫之后10个月,2种方法的检测结果均显示牛群布病阳性率均为0。本试验初步证明,布鲁氏菌c ELISA抗体检测试剂盒在奶牛群免疫布病A19疫苗8个月后才具有区分布病感染抗体和免疫抗体的特性。; 张锋钢; 关键词：奶牛布病

猪肺炎支原体的分离及PCR鉴定被引量：12: 2007年; 张锋钢沈志强高云英李浩波王金良谢印乾管宇刘吉山; 关键词：猪肺炎支原体 PCR鉴定分离株 PNEUMONIAE 多杀性巴氏杆菌圆环病毒2型

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张锋钢