彭慧娟 作品数:5 被引量:11 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市教育委员会科学技术研究项目 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Crk衔接蛋白介导之DOCK180/Rac1、SOS1/Ras信号通路对浆液性卵巢癌恶性程度的影响 目的:研究Crk衔接蛋白下游信号DOCK180/Rac1、SOS1/Ras对人浆液性卵巢癌生长和侵袭行为中的作用。 方法:1.用GST-pull down检测不同卵巢组织中Rac1-GTP、Ras-GTP的表达;并用W... 彭慧娟关键词:浆液性卵巢癌 恶性程度 细胞凋亡 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究 2013年 目的探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用。方法 Western blot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个Rapl shRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western blot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化。结果与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P<0.05)。经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P<0.05)。结论 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖。 肖正华 高一萌 彭慧娟 张瑜 罗淑娟 令狐华关键词:浆液性卵巢癌 肿瘤增殖 C3G在卵巢癌组织中的表达及其在SKOV3细胞增殖中的作用 被引量:3 2013年 目的探讨鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine nucleotide-releasing factor)在卵巢癌组织中的表达及在卵巢癌SKOV3细胞增殖中的作用。方法采用Western blot检测比较40例卵巢癌、8例卵巢良性肿瘤及4例正常卵巢组织中C3G的表达水平。应用特异性siRNA下调SKOV3细胞中C3G的表达,通过MTT法和平板克隆实验检测细胞增殖,建立裸鼠皮下种植瘤模型观察移植瘤生长情况。结果卵巢癌组织中C3G的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,其在卵巢癌、卵巢良性肿瘤分别是正常卵巢组织中的(1.832±0.200)(P<0.05)、(0.893±0.147)倍。siRNA干扰可使SKOV3细胞中内源性C3G的表达下调79.2%;与野生型细胞组、阴性对照组及空载体对照组相比,C3G干扰组细胞增殖变慢(P<0.05),克隆形成率下降(P<0.05),移植瘤的平均体积和质量显著下降(P<0.05)。结论鸟苷酸交换因子C3G在大多数上皮性卵巢癌中过表达,并促进卵巢癌细胞增殖。 罗淑娟 车亚玲 彭慧娟 张瑜 高一萌 刘斌 令狐华关键词:卵巢癌 增殖 鸟嘌呤核苷交换因子Dock180与Elmo1在卵巢癌细胞中的共表达 被引量:4 2012年 目的寻找卵巢癌细胞中鸟嘌呤核苷交换因子Dock180与Elmo1呈相互协同作用的依据。方法采用Western blot检测人卵巢癌组织、良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的Dock180与Elmo1的表达水平;免疫组化检测卵巢癌组织中Dock180与Elmo1的分布;免疫荧光检测Dock180与Elmo1在卵巢癌细胞SKOV3中的定位分布;检测Dock180表达缺失的SKOV3细胞中内源性Elmo1的表达水平。结果 Dock180与Elmo1在人卵巢癌组织中的表达水平呈明显正相关(r=0.829,P<0.05),在卵巢癌组织中二者的表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组织组和卵巢正常组织组(P<0.05)[Dock180:(1.054±0.114)、(0.518±0.126)、(0.425±0.072);Elmo1:(0.864±0.114)、(0.374±0.076)、(0.300±0.105)]。免疫组化及细胞化学染色均显示二者在人卵巢癌组织和细胞内的分布具有一致性。而且在Dock180表达缺失细胞中,Elmo1的表达水平也同时降低。结论 Dock180与Elmo1在促进卵巢癌的癌变过程中可能具有相互协同作用。 张瑜 高一萌 李文燕 彭慧娟 刘斌 王辉 令狐华关键词:卵巢癌 Rac1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3增殖及迁移的作用 被引量:3 2013年 目的研究Rac1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3恶性增殖和迁移的影响。方法 Western blot检测人卵巢浆液性腺癌组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤组织及卵巢正常组织中Rac1蛋白的表达水平;构建Rac1表达缺失的细胞株SKOV3-Rac1i;分别用细胞划痕实验、MTT及平板克隆实验检测SKOV3-Rac1i细胞迁移能力、细胞增殖及克隆形成能力。结果卵巢浆液性腺癌组织中Rac1蛋白表达水平显著高于卵巢良性浆液性囊腺瘤组织[(0.89±0.17)vs(0.69±0.24),P<0.05]和卵巢正常组织[(0.89±0.17)vs(0.72±0.12),P<0.05];与亲代细胞相比,SKOV3-Rac1i细胞表现出迁移能力减弱(P<0.05)和增殖能力明显受限(P<0.05)。结论 Rac1在人卵巢浆液性腺癌组织中呈高表达,其可能是通过影响细胞迁移能力及细胞的增殖而促进卵巢癌细胞的恶性生物行为。 彭慧娟 张瑜 高一萌 罗淑娟 刘斌 令狐华关键词:SKOV3 RAC1