敬保迁
- 作品数：74 被引量：122H指数：6
- 供职机构：川北医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 反义ATM多核苷酸对喉鳞状细胞癌ATM mRNA、蛋白影响的体外研究被引量：2
- 2012年
- 目的:设计反义ATM多核苷酸作用于喉鳞状细胞癌以探讨其对ATM mRNA、蛋白表达的影响。方法:用Westernblot和real-time quantitative PCR对AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、lipo与hep-2组的ATM蛋白和ATM mRNA进行分析。结果:AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、lipo与hep-2组(对照组)的ATM蛋白及ATM mRNA相对表达量以AS-lipo组最低,分别为(48.14±5.53)%和(11.03±2.51)%,AS组与Sen、Mis、lipo、hep-2组比较有差异(P<0.05)。结论:反义ATM多核苷酸降低了喉鳞状细胞癌细胞中ATM mRNA、蛋白的表达,其可能使喉鳞状细胞癌细胞对放射治疗的敏感性增强。
- 李丽冯俊王朝莉敬保迁
- 关键词：ATM喉鳞状细胞癌
- 重组人促红细胞生成素在COS-7细胞内表达的研究
- 1998年
- 目的：研究不同真核载体对人促红细胞生成素ｃＤＮＡ的表达效率。方法：人促红细胞生成素ｃＤＮＡ分别用真核表达载体ｐｃＤＮＡ３、ｐｃＤＩ、ｐＡｄＣＩ进行重组，脂质体法转化ＣＯＳ７细胞，以ＴＦ１细胞检测ＥＰＯ的表达活性。结果：感染ｐｃＤＮＡ３ＥＰＯ，ｐｃＤＩＥＰＯ，和ｐＡｄＣＩＥＰＯ的ＣＯＳ７细胞培养上清中人促红细胞生成素活性分别为０５×１０２，１５×１０３和２２×１０２。结论：已构建成可表达具生物活性的重组人促红细胞生成素的真核表达克隆。
- 敬保迁刘洪涛
- 关键词：红细胞生成素COS-7细胞内表达
- 杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达被引量：1
- 2002年
- 目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果 1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论 得到了高效表达的LACK纯化蛋白 。
- 卜玲毅胡孝素敬保迁王雅静马莹
- 关键词：利什曼原虫聚合酶链反应克隆免疫印迹
- S1P5对食管癌细胞Eca109黏附能力的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究S1P5对食管鳞癌Eca109细胞黏附能力的影响。方法从人正常食管黏膜上皮克隆S1P5基因,构建表达载体S1P5-EGFP,转染Eca109细胞,经G418筛选,获得S1P5-EGFP/Eca109稳定细胞株。以对照载体Control-EGFP转染的Eca109细胞作为对照,荧光显微镜下观察细胞的形态,用黏附试验评价其黏附能力。结果成功构建S1P5-EGFP和Control-EGFP载体并转染Eca109细胞获得稳定细胞株。S1P5表达于细胞膜并使细胞略呈梭形改变。S1P5过表达致Eca109细胞黏附能力明显低于对照(P<0.05),并且不受其配体1-磷酸鞘氨醇(S1P)的影响。结论 S1P5组成性抑制Eca109细胞的黏附能力,食管癌细胞可能通过下调S1P5的表达增强其黏附。
- 胡为民李丽唐恩洁敬保迁冯莉王朝莉任碧轩
- 关键词：食管癌ECA109细胞
- S1P1受体细胞模型的构建及其功能特性的初步研究被引量：1
- 2008年
- 目的构建1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)的细胞模型,初步探讨其介导的功能特性。方法用PolyFect,将包含全长人S1P1编码区与EGFP融合基因的载体HA-S1P1-Myc-EGFP-N1转入CHO细胞,经G418筛选,获得S1P1-EGFP-CHO稳定细胞株。以空载体pEGFP-N1转染的CHO稳定细胞株作为阴性对照,镜下观察细胞的形态。100nM FTY720处理S1P1-EGFP-CHO细胞5、24小时后用荧光显微镜观察S1P1在细胞上的表达。结果成功构建S1P1-EGFP-CHO细胞模型,表达S1P1的细胞变圆,FTY720导致该细胞模型的S1P1长时间内化。结论S1P1-EGFP-CHO细胞可作为S1P1功能特性研究的细胞模型,S1P1能使细胞变圆,FTY720能导致S1P1长时间内化。
- 胡为民唐恩洁杨健敬保迁任碧轩
- 关键词：FTY720内化CHO细胞
- 杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的比较蛋白质组学分析被引量：8
- 2009年
- 目的应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况。方法分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶图像以PDQuest1.0软件分析,并对主要差异表达蛋白点用电喷雾质谱法进行鉴定。结果等量的前鞭毛体与纯培养的无鞭毛体总蛋白经双向电泳分离后均可获近700个蛋白点,其中超过90%的蛋白点的分布和相对强度基本一致。与前鞭毛体比较,6个蛋白点在无鞭毛体蛋白中明显高表达,3个蛋白点低表达。6个明显高表达的蛋白点中有5个为已知功能蛋白,分别为Reiske铁硫蛋白前体、α微管蛋白、过氧化物酶1、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶前体和甘露糖-1-磷酸瓜氨酸转移酶;3个低表达的蛋白点中有2个为已知功能蛋白,分别为热休克蛋白70和β微管蛋白。这些差异调节表达蛋白与碳水化合物/能量代谢,应激反应,细胞膜和细胞骨架形成相关。结论前鞭毛体与无鞭毛体蛋白质的表达存在差异。
- 敬保迁邓世山张仁刚张洁
- 关键词：杜氏利什曼原虫前鞭毛体无鞭毛体比较蛋白质组学
- 杜氏利什曼原虫39kDa抗原基因的克隆表达抗原诊断
- 敬保迁胡孝素覃智唐恩杰马肖菊
- 该研究运用分子克隆技术、DNA杂交技术、分子免疫技术、计算机技术及信处技术对黑热病病原体-杜氏利什曼原虫抗原编码基因进行深入系统地研究，获得39KDA抗原的表达克隆，表达蛋白可用作黑热病的血清学诊断抗原，编码基因为单拷贝...
- 关键词：
- 关键词：杜氏利什曼原虫抗原基因血清学诊断基因表达
- 幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501蛋白的原核表达与纯化
- 2011年
- 目的原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637株Hp1501蛋白。方法 PCR扩增H.pylori NCTC11637株Hp1501基因编码功能区序列Hp1501a,定向克隆至pQE30载体,构建重组原核表达质粒pQE30-Hp1501a,转化E.coli XL1-blue,IPTG诱导表达,并分析重组蛋白的表达形式。用Ni-NTA His柱对重组蛋白进行纯化。结果重组表达质粒pQE30-Hp1501a经双酶切鉴定构建正确,测序分析表明插入基因序列完全正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为37 000,表达量约占菌体总蛋白的21%,主要以包涵体形式存在,可与兔抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度达91%。结论成功原核表达并纯化了H.pylori NCTC11637株Hp1501蛋白,为H.pylori外膜蛋白的生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。
- 杨继文杨致邦敬保迁于拽拽熊玉霞王朝丽冯莉
- 关键词：幽门螺杆菌生物信息学原核细胞基因表达纯化
- 重组人生存素单体分子与双体分子的原核表达研究
- 2008年
- 目的重组并高效表达人生存素单体分子和双体分子。方法PCR扩增人生存素基因,将其单一读码框和双读码框重组到原核表达质粒载体pKpL5的表达框内,限制性内切酶分析后,于42℃诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达结果。结果经限制性核酸内切酶分析,表达重组人生存素单体分子质粒pKpL5-sSURVIVIN和表达人生存素同源双体分子质粒pKpL5-dSURVIVIN均正确构建,可高效表达分子量约18.5KDa的人生存素单体分子与分子量约35KDa的同源双体分子,所表达的目的蛋白可被抗人生存素的多克隆抗体特异性识别。结论该研究成功高效表达人生存素单体分子与同源双体分子,为进一步研究其生物活性与免疫原性奠定了物质基础。
- 杨健张仁刚敬保迁
- 关键词：生存素原核表达
- 不同种株利什曼原虫前鞭毛体体外向无鞭毛体转化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的观察不同种株利什曼原虫前鞭毛体在不同体外培养条件下向无鞭毛体的转化。方法将6个对数生长期的不同种株利什曼原虫前鞭毛体接种于含M199和RPMI1640复合培养液的24孔板内,在不同温度、pH值、血清、CO2下培养,第3天和第6天分类计数不同形态的原虫。结果当培养温度为26℃,而其他培养条件发生变化时,利什曼原虫的增殖速度发生变化,大多数原虫保持前鞭毛体典型性形态,运动活跃。当培养温度上升至37℃,不论其他培养条件如何变化,原虫均沉积于培养孔底,停止增殖,运动减缓,显著地向中间体和无鞭毛体转化,酸性pH值和5%CO2可促进前鞭毛体转化为无鞭毛体,新生小牛血清可延长无鞭毛体的成活。但相同的培养条件下,杜氏利什曼原虫转化效率低于其他种株利什曼原虫。结论温度是影响利什曼原虫前鞭毛体转化为无鞭毛体的基本因素,酸性pH值与CO2可协同温度促进转化,不同种株利什曼原虫的遗传异质性可影响转化效率。
- 张仁刚敬保迁张洁杨健
- 关键词：利什曼原虫无鞭毛体体外培养
