朱圣庚
- 作品数：55 被引量：212H指数：7
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- ICAM-1特异结合肽的淘选与性质研究被引量：1
- 2002年
- 利用噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽库 ,根据转化率计算库容量为 1 36× 10 8。用PCR SSCP检验了库的异质性。以固相包被亲和淘选的方法 ,经过 4轮淘选和ELISA分析 ,得到了 5个可与重组人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)特异结合的噬菌体克隆 ,对所展示的十五肽进行了序列分析。其中活性较高的噬菌体展示十五肽与ICAM 1的亲和常数约为 7 87× 10 7。
- 赵乐群赵佳慧程庆砾黄仪秀朱圣庚
- 关键词：噬菌体展示细胞间粘附分子1
- 一种新型基因枪的研究被引量：4
- 2001年
- 为研制一种适应各种场合 ,尤其是在野外操作的基因枪 ,满足将目的基因导入动植物细胞 ,使之稳定表达并遗传 ,实现培育或改良新的优良品种。以压缩弹簧为动力 ,运用撞击发射原理 ,对裹着基因的微粒进行加速 ,使之获得足够的动能 ,去射击靶细胞。弹簧预压力不同 ,微弹的动能随之不同 ,可适应不同细胞的要求。利用所设计的装置 ,在常压下将GUS基因导入番茄叶片细胞 ,经检测 ,得到表达 ;将质粒psv- luc2 0转入小鼠的皮肤、腹部肌肉和肝脏内 ,也得到表达。实验表明 ,该构思是可行的 ,实验装置可以在常压下操作 。
- 余兴龙王媛索忠堃税国双李斯明朱圣庚
- 关键词：基因枪压缩弹簧基因导入基因表达
- 利用PCR技术构建体外高效转录系统被引量：2
- 1993年
- 设计并合成了一对 PCR 反应引物,其5′端引物除含有目的基因5′端序列外,还外加 T7 RNA 聚合酶启动子的17个核苷酸.3′端引物则按常规设计.以染色体 DNA为模板,通过 PCR,可扩增出带有 T7 RNA 聚合酶启动子的目的基因 DNA 片段.以此 PCR 产物为模板,在体外成功实现了高效转录.这是一种快速、简便构建体外高效转录系统的好方法.
- 黄仪秀张磊朱圣庚
- 关键词：聚合酶链反应转录
- 生物分子实验进化地谋略
- 基因工程和蛋白质工程的兴起为生物分子实验进化提供了有效的技术和手段。生物分子实验进化是模拟生物分子的自然进化，通过变异－选择－扩增的反复循环，从而改进生物分子性状，或赋予新的功能。在实验条件下实现生物分子的进化有助于揭示...
- 朱圣庚
- 关键词：分子进化基因核苷酸序列
- 文献传递
- 小鼠4.5S RNA逆转座子对Luc基因表达的影响被引量：6
- 2000年
- 利用RT PCR方法 ,从小鼠肝脏组织总RNA中扩增出 4 5SRNA的cDNA。该cDNA被克隆到pGEM3Zf ( + )质粒上 ,酶切鉴定并测序。然后将该序列插入以Luc基因作为报道基因的表达载体pSVluc2 0的PvuⅡ位点 ,构建了含 4 5SRNA逆转座子的表达载体pSVluc2 0 4 5S。脂质体转染法将表达载体导入小鼠骨髓瘤细胞NS 1、SP2 /0和人乳腺癌细胞Bca61。结果表明 ,小鼠 4 5SRNA逆转座子序列在NS 1、SP2 /0细胞中对Luc基因的表达有促进作用 ,而在Bca61细胞中对报道基因的表达则起抑制作用。
- 徐来祥朱圣庚
- 关键词：逆转座基因表达RT-PCR
- 小鼠噬菌体抗体库的构建和N-肽结合单链抗体的筛选被引量：3
- 2000年
- 成功构建一库容量为 1.7× 10 8的小鼠噬菌体抗体库 ,并从中淘选出对N 肽有结合活性的单链抗体。首先从未免疫小鼠的脾脏中提取总RNA ,分离出mRNA ,经逆转录合成其总cDNA。随后通过PCR分别扩增出抗体重链和轻链可变区VH、VL 的基因片断 ,再经重组PCR将两片断由一编码 (Gly4 Ser) 3十五肽的接头连在一起 ,并克隆到噬菌质粒 pCANTAB 5E中 ,电击转化大肠杆菌TG1。经辅助噬菌体M 13KO7超感染回收全部重组噬菌体 ,此即噬菌体抗体库。N 肽是一种新发现的神经肽 ,其N端与阿片肽高度同源 ,可与阿片肽受体相互作用。对其研究可能有助于了解成瘾机制和有临床应用价值。将生物素化的N 肽与抗体库相互作用 ,用偶联有链霉亲和素的磁珠富集与N 肽结合的重组噬菌体 ,经四轮淘选 ,得到亲和力较高的单链抗体。
- 高新胜黄仪秀郭振泉朱圣庚陈玉珍
- 关键词：噬菌体展示技术抗体库神经肽小鼠
- RNA在生命进化中的作用
- 生命是能够经历达尔文进化的一种自我维持(自复制、自组装、自调节)的化学系统。复制和进化是生命的基本特征,生物大分子获得复制能力后就开始了进化过程。生命机体在进化中,不仅改进了生存和繁殖的能力,也改进了进化的能力。基因组的...
- 朱圣庚
- 文献传递
- 从噬菌体抗体库中淘选血纤维蛋白特异的单链抗体被引量：2
- 2000年
- 为构建小鼠噬菌体抗体库 ,以获得对人血纤维蛋白特异的抗体 ,由小鼠脾脏提取 m RNA,经反转录 PCR扩增出抗体重链、轻链可变区基因片段 ,将二者和一段编码十五肽 (Gly4 Ser) 3的 DNA接头借助重组 PCR组装成为单链抗体 (single- chain antibody,Sc Ab)基因 .将单链抗体基因插入噬菌体展示载体 p CANTAB- 5E,通过电击法转化大肠杆菌 TG1细胞 ,用辅助噬菌体 M1 3K0 7超感染 ,构建了库容量在 1 0 8以上的噬菌体单链抗体库 .利用亲和选择方法 (淘选 ) ,从噬菌体抗体库中选得血纤维蛋白特异的单链抗体 .模拟抗体成熟过程 ,用 DNA改组 (DNA shuffling)技术使抗体基因重新组合 ,构建新的改组抗体库 ,并从中选择到提高了亲和力的噬菌体单链抗体 .抗体基因在大肠杆菌中表达 ,表达蛋白经 Sephadex G- 75柱层析分离 ,得到初步纯化的单链抗体蛋白 .
- 孙雷高新胜黄仪秀朱圣庚
- 关键词：噬菌体抗体库天然抗体
- 逆转座子和逆向遗传信息流被引量：1
- 1991年
- 一、引言 遗传信息可以从基因组的一个位点转移到另一个位点,转移的信息或是由DNA所携带,或是由RNA所携带。DNA介导的转位作用在原核生物和真核生物中都能发生;RNA介导的转位作用目前仅发现于真核生物。为了与DNA介导的转位作用相区别,由RNA介导的遗传信息逆向转移称之为逆转位作用(retroposition)。
- 朱圣庚
- 关键词：逆转座子
- 分子生物学发展趋势浅析被引量：1
- 1993年
- 今年是J.Watson和F.Crick提出DNA双螺旋结构学说40周年,世界范围内都在纪念这一生命科学史上划时代的成就。Watson和Crick学说的伟大功绩在于其根据DNA分子的双螺旋结构阐明了遗传物质的功能和信息传递机制,从而奠定了分子生物学的基础。40年过去了,分子生物学已成为当今自然科学中发展速度最快。
- 齐书莹朱圣庚
- 关键词：分子生物学结构生物学
