朱晋坤
- 作品数：37 被引量：153H指数：5
- 供职机构：枣庄市妇幼保健院更多>>
- 发文基金：贵州省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠腹主动脉平滑肌细胞培养及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的培养、鉴定大鼠腹主动脉平滑肌细胞。方法采用组织贴块法分离培养大鼠腹主动脉平滑肌细胞,胰蛋白酶消化传代,相差显微镜及即用型SABC免疫组化染色试剂盒进行细胞鉴定。结果平滑肌细胞呈梭形或长梭形生长,透射电镜可见细胞的胞浆内有很多与细胞纵轴平行的肌丝和与之相连的致密体。高倍镜下可见胞质内大量棕色、与细胞长轴平行的纤维细丝。核卵圆形居中,呈淡蓝色。结论大鼠腹主动脉平滑肌细胞分离、培养方法简单、可行。
- 朱晋坤毛华董文鲁玉明熊宗华杜峰文美刘廷筑张敏
- 关键词：血管平滑肌细胞细胞培养细胞鉴定
- 银杏达莫注射液对急性心肌梗死患者冠状动脉再通治疗后QT离散度的影响被引量：6
- 2012年
- 目的观察银杏达莫注射液对急性心肌梗死（AMI）患者冠状动脉再通治疗后QT离散度（QTd）的影响，进一步探讨其临床应用价值。方法将68例AMI成功接受溶栓或急诊PCI术患者完全随机分为银杏达莫干预组（34例）和常规治疗组（34例），分别在冠状动脉再通治疗前和再通治疗后1、5、10d做12导联心电图描记，计算QTd。以同期体检健康者68人为正常对照组。结果AMI患者QTd较正常对照者明显延长[（76±8）ms比（36±5）ms，P〈0．05]。2组患者冠状动脉再通治疗后各时间点QTd较再通治疗前均明显降低[常规治疗组再通治疗后1、5、10d分别为（56±6）、（58±5）、（46±6）ms比（76±8）ms；银杏达莫干预组分别为（56±7）、（47±5）、（36±4）ms比（77±9）ms，均P〈0．05]。常规治疗组再通治疗后10dQTd明显低于再通治疗后1、5d（均P〈0．05）。银杏达莫干预组再通治疗后5dQTd低于再通治疗后1d，再通治疗后10d低于再通治疗后5d（均P〈0．05）。冠状动脉再通治疗后5、10d，银杏达莫干预组QTd明显低于常规治疗组。结论银杏达莫注射液可有效降低AMI患者冠状动脉再通治疗后的QTd，有很好的临床应用价值。
- 朱晋坤董文鲁玉明周文汀杜峰杨静熊宗华
- 关键词：急性心肌梗死银杏达莫冠状动脉再通QT离散度
- 阿司匹林抑制血小板源性生长因子BB引起的主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨阿司匹林对由血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)引起的主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法 2014年8月—2015年9月,选取人主动脉血管平滑肌细胞株(T/G HA-VSMC),分为对照组(不添加任何试剂)、PDGF-BB组(添加10 ng/ml PDGF-BB)、阿司匹林组(添加5 mmol/L阿司匹林)、PDGF-BB+阿司匹林组(添加10 ng/ml PDGF-BB和5 mmol/L阿司匹林),采用CCK-8法检测4组不同培养时间(0、24、48、72 h)T/G HA-VSMC增殖吸光度(OD值),Western blotting法检测p21waf1、p27kip1相对表达量,流式细胞仪检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移率,Western blotting法检测基质金属蛋白酶1(MMP-1)相对表达量。结果培养0 h时,4组T/G HA-VSMC增殖OD值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。培养24、48、72 h时,PDGF-BB组T/G HA-VSMC增殖OD值较对照组升高,阿司匹林组T/G HA-VSMC增殖OD值较对照组降低(P<0.05);培养48、72 h时,PDGF-BB+阿司匹林组T/G HA-VSMC增殖OD值较对照组降低(P<0.05);培养24、48、72 h时,阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组T/G HA-VSMC增殖OD值较PDGF-BB组降低(P<0.05);培养24、48、72 h时,PDGF-BB+阿司匹林组T/G HA-VSMC增殖OD值较阿司匹林组升高(P<0.05)。PDGF-BB组培养24、48 h时p21^(waf1)、p27^(kip1)相对表达量较培养0 h时升高(P<0.05);培养72 h时p21waf1、p27kip1相对表达量较培养0、24、48 h时降低(P<0.05)。培养24 h时,PDGF-BB组p21^(waf1)、p27^(kip1)相对表达量较对照组、阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组降低(P<0.05)。PDGF-BB组G0/G1期细胞所占比例较对照组、阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组降低,S期细胞所占比例较对照组、阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组升高(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,培养24 h时,PDGF-BB组细胞迁移率较对照组、阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组降低(P<0.05)。PDGF-BB组MMP-1相对表达量较对照组、阿司匹林组和PDGF-BB+阿司匹林组升高(P<0.05);阿司匹林组和PDGF-BB+
- 朱晋坤毛华尹扬光董文杜峰黎姗姗邓梦扬
- 关键词：阿司匹林血小板源性生长因子主动脉细胞运动
- Moesin抗体与动脉粥样硬化相关疾病的关系被引量：5
- 2013年
- 目的通过重组表达的方法获得纯化的膜突蛋白(moesin),利用纯化的重组moesin作为抗原建立间接酶联免疫吸附实验(ELISA),检测并探讨抗膜突蛋白抗体与动脉粥样硬化相关疾病的关系。方法设计针对moesin的引物,通过PCR扩增,得到moesin的编码DNA,构建出能够表达moesin的重组质粒,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)在适当温度和条件下诱导表达,通过SDS-PAGE电泳鉴定所表达的蛋白,并对重组蛋白进行纯化。利用纯化的重组moesin作建立间接ELISA,采用酶联免疫吸附试验检测120例动脉粥样硬化相关疾病(20例急性冠状动脉综合征、30例原发性高血压、20例颈动脉硬化、20例糖尿病及30例血脂异常症)患者血清抗膜突蛋白抗体,观察抗膜突蛋白抗体的阳性率。结果表达产物经SDS-PAGE电泳分析,确定所得表达产物为moesin;抗原的最佳包被浓度为4 mg/L,抗体的最佳稀释倍数为1∶100,酶标二抗的最佳稀释倍数是1∶20 000。在120例动脉粥样硬化相关疾病中,抗膜突蛋白抗体的阳性检出率较高,达25%～70%,显著高于正常对照组的5%(P<0.01);急性冠状动脉综合征组阳性检出率高达70%,高于其它疾病组(P<0.05),其它各亚型疾病组之间差异无显著性。结论成功地表达了重组人moesin;建立了最佳的重组moesin作为抗原检测抗膜突蛋白抗体的间接ELISA反应条件;抗膜突蛋白抗体在动脉粥样硬化相关疾病患者中有较高的检出率。
- 毛华杜峰胥勇朱晋坤文美刘廷筑
- 关键词：膜突蛋白重组表达载体动脉粥样硬化
- 贵阳市区健康男性胫骨超声速率的研究被引量：4
- 2006年
- 目的采用横断面调查的方法探讨贵阳市区健康男性人群胫骨超声速率(SOS)随年龄变化的趋势,建立本地区定量超声(QUS)诊断男性骨质疏松(OP)的参考数据库。方法以社区693例健康男性志愿者为研究对象,用以色列Myriad公司生产的sunlightomnisense7000TM型超声骨密度仪测量其右侧胫骨中点的SOS。结果按每10岁为一年龄段,男性胫骨SOS的峰值出现在45～54岁年龄组为(3938.40±89.16)ms,在峰值出现之前SOS随增龄而增加,之后SOS随增龄而降低。男性SOS随年龄变化曲线的三次方程为[SOS=0.0022(年龄)3-0.4223(年龄)2+24.518(年龄)+3491.9,(R2=0.1035,P<0.05)]。结论贵阳市区不同年龄健康男性胫骨SOS随年龄变化而变化,胫骨SOS的测定能为男性OP的诊断提供一定的依据。
- 李树法张韬威向菲彭俊朱晋坤董文张敏
- 关键词：骨质疏松胫骨超声速率骨峰值
- 膜突蛋白抗体与GRACE评分在急性冠脉综合征中的初步研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究膜突蛋白(moesin)抗体在急性冠脉综合征(ACS)中的作用,并对病人进行全球急性冠脉综合征注册(GRACE)评分,探讨moesin抗体、GRACE评分与ACS之间的相关性。方法选择126例ACS病人,经冠脉造影按其病变程度分为单支病变、双支病变、三支病变及左主干病变3组。计算相应的冠脉病变积分并对其进行GRACE评分,同期选取冠脉造影排除冠心病者41例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测入选者血清moesin抗体,观察单支病变组、双支病变组、三支病变及左主干病变组的moesin抗体阳性检出率及OD检测值;并对moesin抗体的OD检测值与GRACE评分进行相关性分析。结果 ACS病人moesin抗体阳性检出率及OD检测值显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);并随着冠脉病变程度的加重,moesin抗体阳性检出率及OD检测值也逐渐升高,其中三支病变及左主干病变组与单支病变组比较差异有统计学意义(P<0.05);随着冠状动脉病变程度的加重,GRACE评分逐渐升高;相关性分析显示,moesin抗体的OD检测值与GRACE评分呈显著性正相关(r=0.452,P<0.05)。结论 moesin抗体可能是判断ACS病人冠状动脉血管病变程度的一种新的评估指标;GRACE危险评分对冠状动脉血管病变程度有一定的预测价值;moesin抗体与GRACE评分在ACS中呈正相关,推测moesin抗体可能是评估ACS风险程度的指标之一。
- 杜峰毛华张琦鲁玉明熊宗华李羚唐艳朱晋坤刘廷筑文美
- 关键词：急性冠脉综合征膜突蛋白
- 不同剂量酒精对大鼠心肌组织的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察不同剂量酒精对大鼠心肌组织的影响。方法 140只健康SD大鼠随机分成7组:正常对照组及不同剂量酒精模型组0.8 mL/(kg.d)(A组),1.6 mL/(kg.d)(B组),2.4 mL/(kg.d)(C组),3.2 mL/(kg.d)(D组),4.0 mL/(kg.d)(E组),4.8 mL/(kg.d)(F组),每组20只,雌雄各半。正常组给予10 mL/(kg.d)生理盐水灌胃,其余分别给予53度赖茅酒灌胃,每周灌胃6次,连续灌胃4个月,16周后每组大鼠禁食12 h,取颈总静脉血检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)。处死大鼠取心肌组织进行组织病理学检查。结果模型A、B组与正常对照组比较,CK-MB、cTnT水平无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);模型C、D、E、F组与正常对照组及模型A、B组比较CK-MB、cTnT水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。模型A、B组与正常对照组相比hs-CRP水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型D、E、F组与正常对照组相比hs-CRP水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组、模型C、D、E、F组与A、B组比较hs-CRP水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型D、E、F组可见心肌间质水肿,心肌细胞变性、坏死;模型A、B、C组心肌组病理改变与对照组比较差异无统计学意义。结论适量饮酒可降低hs-CRP,保护心肌细胞,过量饮酒[>2.4 mL/(kg.d)]可导致心肌损伤标志物水平升高及心肌细胞组织病理学改变。
- 毛华杜峰乔更生朱晋坤刘廷筑文美李羚
- 关键词：酒精心肌细胞心肌酶超敏C反应蛋白SD大鼠
- 应用蛋白芯片联合检测急性冠状动脉综合征患者循环血中蛋白标志物被引量：1
- 2006年
- 目的:同步联检急性冠状动脉(冠脉)综合征患者循环血中10种蛋白标志物浓度并探讨其临床意义。方法:运用蛋白芯片技术联检经冠脉造影及临床表现证实为急性冠脉综合征患者104例(分为急性心肌梗死组54例、不稳定性心绞痛组50例)及正常对照组50例血清或血浆中10种蛋白标志物水平,选择其中3种蛋白标志物与经典的酶联免疫双抗体夹心吸附实验(ELISA法)对照。结果:急性心肌梗死组和不稳定性心绞痛组血清中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、可溶性CD40L(sCD40L)、肌钙蛋白I(cTnI)、C反应蛋白(CRP)、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、白细胞介素-6(IL-6)及血浆中内皮素-1(ET-1)浓度,与正常对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);急性心肌梗死组血清中H-FABP、cTnI含量明显高于不稳定性心绞痛组,差异有显著性(P＜0.01)。CRP与IL-6和sCD40L与可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、MMP-9之间的直线相关分析结果发现,CRP与IL-6显著正相关(r=0.961,P＜0.01);sCD40L与sVCAM-1显著正相关(r=0.644,P＜0.01), sCD40L与MMP-9无相关性(r=0.158,P＞0.05)。采用蛋白芯片法与ELISA法检测急性冠状动脉综合征患者血中的3种蛋白标志物,结果显示H-FABP、sCD401的含量,差异无显著性(P＞0.05),而MMP-9差异有显著性(P＜0.01)。结论:心血管蛋白芯片技术不失为一种综合评估急性冠脉综合征蛋白标志物的有力工具。急性冠脉综合征患者循环中10种蛋白标志物水平异常,可作为急性冠脉综合征发生、发展过程中分子水平的标志物群。
- 毛华文美朱晋坤陈晶晶李羚刘庭筑
- 关键词：蛋白质芯片蛋白标志物
- 血小板源性生长因子和血小板源性内皮细胞生长因子在内皮细胞和血管平滑肌细胞中的作用研究被引量：16
- 2015年
- 目的通过体外转染血小板源性生长因子(PDGF)和血小板源性内皮细胞生长因子(PD-ECGF)质粒,观察两种生长因子对人脐静脉内皮细胞EAHY926和主动脉血管平滑肌细胞T/G HA-VSMC的影响,评估两种生长因子对血管损伤治疗的可行性。方法构建人pc DNA 3.1(+)空载(空载组)、pc DNA 3.1(+)-PDGF-透明质酸(HA)(PPH组)和pc DNA 3.1(+)-PD-ECGF-HA(PPEH组)质粒,分别转染入EAHY926和T/G HA-VSMC中,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测内源性PD-ECGF和外源性PD-ECGF对EAHY926和T/G HA-VSMC细胞增殖的影响;细胞伤痕实验观察内源性PD-ECGF和外源性PD-ECGF对EAHY926和T/G HA-VSMC细胞迁移速度的影响。结果 MTT法检测3组EAHY926吸光度值比较,差异有统计学意义(F=235.18,P<0.001),其中PPH组高于空载组和PPEH组(P<0.05);空载组与PPEH组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MTT法检测3组T/G HA-VSMC吸光度值比较,差异有统计学意义(F=82.89,P<0.001),其中PPH组高于空载组(P<0.05);PPEH组低于空载组(P<0.05)。MTT法检测转染PPEH质粒的培养基(L-PPEH)对PPH诱导的EAHY926和T/G HA-VSMC增殖的影响,空载组、PPH组、PPH+L-PPEH组EAHY926吸光度值比较,差异无统计学意义(F=512.89,P=0.183)。空载组、PPH组、PPH+L-PPEH组T/G HA-VSMC吸光度值比较,差异有统计学意义(F=317.40,P<0.001);其中PPH组高于空载组和PPH+L-PPEH组(P<0.05)。细胞伤痕实验证实,转染PPEH质粒的EAHY926、T/G HA-VSMC细胞迁移能力增强;PPEH组EAHY926平均细胞迁移距离百分比(56.1%±2.2%)较空载组(27.8%±3.4%)升高(t=-15.08,P<0.001);PPEH组T/G HA-VSMC平均细胞迁移距离百分比(69.1%±2.3%)较空载组(43.6%±5.8%)升高(t=-33.64,P<0.001)。用转染PPEH质粒的培养基培养EAHY926、T/G HA-VSMC发现,外源性PD-ECGF处理的EAHY926、T/G HA-VSMC细胞迁移能力亦明显增强。结论通过转染PDGF质粒,模拟血管损伤后内皮细胞和平滑肌细胞受到PDGF和/或PD-ECGF刺激,发现PDGF能明显上调内皮细胞�
- 朱晋坤毛华尹扬光董文杜峰鲁玉明熊宗华邓梦扬
- 关键词：血小板源性生长因子内皮细胞
- 重组血管紧张素(1-7)基因转染对大鼠急性心肌梗死后细胞外基质重构的影响
- 2014年
- 目的观察重组血管紧张素(1-7)[angiotensin 1-7,Ang(1-7)]对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后细胞外基质重构的影响,并探讨其可能的分子机制。方法 40只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组(SHAM)、心肌梗死组(MI)、报告基因组(MI+EGFP)和Ang(1-7)组[MI+Ang(1-7)],每组10只。采用冠状动脉结扎法建立大鼠AMI模型,MI+EGFP与MI+Ang(1-7)两组于心肌梗死周边区各选取5个点心肌内注射EGFP和Ang(1-7),SHAM组和MI组不予注射。术后4周测量心室质量/体质量、血流动力学;组织学方法评价心肌组织结构变化与胶原沉积;免疫组化检测Ang(1-7),Ⅰ、Ⅲ型胶原水平变化及蛋白印迹法检测MMP-2及TⅠMP-2的变化。结果①MI+Ang(1-7)组Ang(1-7)高效稳定表达,显著高于其余各组。②与SHAM组相比,MI与MI+EGFP两组心室质量/体质量,左室舒张末压,梗死周边区Ang(1-7),MMP-2,TIMP-2,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量及Ⅰ/Ⅲ型胶原比例均增加,而左室内压最大上升速率(dp/dtmax)和下降速率(dp/dtmin)显著下降(P<0.05)。③与MI及MI+EGFP组相比,MI+Ang(1-7)组Ang(1-7)、TIMP-2表达量及dp/dtmax、dp/dtmin明显增加,MMP-2,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量及Ⅰ/Ⅲ型胶原比例显著降低(P<0.05)。结论 Ang(1-7)显著改善大鼠急性心肌梗死后细胞外基质重构,其机制可能与通过上调TIMP-2,下调MMP-2蛋白表达相关。
- 朱晋坤毛华尹扬光董文邓梦扬鲁玉明熊宗华杜峰文美刘廷筑
- 关键词：心肌梗死心室重构血管紧张素1-7基质金属蛋白酶
