李影
- 作品数：113 被引量：180H指数：7
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- VBNC细菌荧光观察技术问题分析及对策
- 2010年
- 以SYTO-9和PI两种荧光染料对细菌进行核染,以市售的黑色钢笔墨水替代伊拉克黑,利用手动压片方式对标本进行固定,自建一种"活的非可培养状态"(VBNC)细菌荧光显微镜观察技术。通过总结分析该项技术方法在应用过程中所出现的问题,如存在背景荧光、菌体聚集、荧光图像模糊、滤膜吸附能力差、菌体形态不鲜明、菌体荧光减淡等,并提出相应的解决策略,旨在给予相关研究者以帮助和启迪。
- 李影段锐钱爱东
- 关键词：荧光显微镜
- 布鲁菌L7/L12蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：4
- 2018年
- 为制备布鲁菌(Brucella)L7/L12蛋白及其小鼠源多克隆抗体,根据猪布鲁菌(Brucella suis)S2株L7/L12基因序列,设计合成特异性引物,PCR扩增L7/L12基因并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a-L7/L12,经鉴定正确后转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明,重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为17ku的重组蛋白。将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体,并测定其抗体效价。Western blot结果表明,原核表达后纯化的L7/L12蛋白能够与制得的小鼠抗L7/L12蛋白多克隆抗体特异性结合。成功获得了纯化的L7/L12重组蛋白和小鼠抗L7/L12多克隆抗体,为进一步研究L7/L12蛋白对布鲁菌感染的诊断方法和基因工程疫苗的研发奠定了基础。
- 成璐张冬星吴娟李影
- 关键词：布鲁菌原核表达多克隆抗体
- 水中致病性革兰氏阳性菌检测方法的研究进展
- 水中存在大量的致病性微生物，严重威胁人类和动物的健康。在寡营养等不良环境下，这些致病菌能够进入“活的非可培养状态”(VBNC)，如用传统培养方法可能无法检测出。因此本文着重介绍几种进入VBNC状态的致病性革兰氏阳性菌，并...
- 袁翔李影王立新李莹姜建萍王甲慧李文博
- 关键词：食品安全革兰氏阳性菌病原菌检测
- 文献传递
- “活的非可培养状态”细菌荧光观察方法被引量：5
- 2010年
- 目的:建立一套稳定、简便、快捷,可靠的细菌活的非可培养状态(VBNC)荧光显微镜观察方法。利用市售的黑色钢笔墨水着染微孔滤膜,然后采用手动压片方式,将经LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability Kit(13152)染色的细菌样本固定在滤膜上,用落射荧光显微镜直接观察。结果:该法所得的荧光图像背景无光亮且黑暗,菌体荧光、形态、排列等均清晰可见,而且呈现绿色荧光的活菌与呈现红色荧光的死菌较易分辨。与现行技术相比,还能缩短染色时间近12～16h。结论:建立的VBNC细菌荧光观察方法能有效地克服现有技术存在的适用范围狭窄、取材困难、观察结果不准确、操作时间长等缺点,可为细菌VBNC研究提供值得借鉴的方法。
- 李影段锐钱爱东王伟利
- 关键词：荧光显微镜
- 《动物微生物学》教学中科学精神的培养被引量：1
- 2010年
- 作为素质教育中的关键项目,科学精神的培养越来越受到重视。教学中适时引用微生物学发展历程中的经典事例将有利于培养大学生的科学精神,如果再结合实践教学中的一些做法,将会在高素质动物医学及相关专业人才的培养中起重要作用。对《动物微生物学》教学中科学精神的培养进行了阐述。
- 徐凤宇钱爱东胡桂学王春凤李影
- 关键词：动物微生物学教学
- 乳酸杆菌VBNC状态的诱导和检测被引量：2
- 2007年
- 钱爱东魏忠彬李影
- 关键词：乳酸杆菌细胞伸长革兰氏阴性细菌
- “活的非可培养状态”细菌荧光显微镜检测技术被引量：2
- 2010年
- 以细菌活的非可培养状态(VBNC)领域中常用的SYTO-9和PI替代吖啶橙和萘啶酮酸,以市售的黑色钢笔墨水替代伊拉克黑,自行建立了一套VBNC细菌荧光显微镜检测方法,以期简化现行技术的操作流程,克服现有技术的适用范围狭窄、取材困难、观察结果不准确等缺点,旨在解决细菌VBNC研究领域中的技术难题,提高同业者的实践操作水平。
- 李影段锐钱爱东
- 关键词：荧光显微镜
- 细菌通气培养与取样装置的改进
- 2010年
- 针对细菌在通气培养与取样过程中存在的不方便、不灵活、易污染等问题,提出了改进办法,并自主设计了一套既可用于单独培养或取样,也可同时用于培养与取样的实验装置,并对此装置的特征以及优点进行了阐述。实践表明,该装置的研制不仅能使学生从微生物学常规的经典实验中建立创新意识,而且还能使学生树立自主知识产权的保护意识,极大地推动了创新性实验与基础性实验的有机结合。
- 李影魏忠彬孙晓媛侯凤钱爱东
- 关键词：细菌通气培养
- 抑制性消减杂交技术在细菌活的非可培养状态研究中的应用
- 2014年
- 在基因分离与克隆中,构建各种cDNA文库是近些年发现新基因及研究基因功能常用的基础工具之一。其中,抑制性消减杂交技术(SSH)是一种高效分离差异表达基因的方法,在分离筛选细菌活的非可培养状态(VBNC)与正常菌株差异基因中,应用这种研究方法是研究细菌VBNC状态菌株毒力、致病性和耐药性及菌株遗传分化关系的重要途径。文章旨在介绍SSH构建消减cDNA文库在原核生物中的应用及对其在细菌VBNC状态新基因筛选中的应用前景,并提出了展望。
- 李文博谭平平李影袁翔王甲慧
- 关键词：CDNA文库基因筛选
- 锦鲤维氏气单胞菌JLL-1株的部分生物学特性研究
- 2015年
- 为了研究JLL-1菌株的部分生物学特性,试验采用平板计数法测定其生长曲线,划线培养法观察该菌在不同培养基中的培养特性,生化反应管及相关培养基检测其理化特性,纸片扩散法测定其耐药性以及通过控制不同的培养条件检测不同培养温度、pH值及渗透压对其生长的影响。结果表明：菌株JLL-1在LB培养基中存在二次生长现象;可在麦康凯培养基、BS培养基、RS培养基、SS培养基、TSA培养基、HE培养基及营养肉汤中生长良好;该菌对青霉素、多黏菌素B、氨苄西林及克林霉素完全耐药,占测定药物的16.67%,但敏感药物可达到66.67%;该菌耐受性较强,可在25~42℃、pH值为6~10、NaCl含量为0~4%的环境中生长。说明该菌可在不同培养基上生长,并且有较强的环境适应性,可根据药物敏感试验结果指导临床用药。
- 莫金龙周宇陈亨利康元环陈龙毕建飞钱爱东李影单晓枫
- 关键词：锦鲤维氏气单胞菌生物学特性药敏试验理化特性
