李恒 作品数:36 被引量:184 H指数:8 供职机构: 江南大学药学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 生物学 医药卫生 更多>>
原生质体诱变提高亚麻刺盘孢ST对底物DHEA的耐受性和转化率 被引量:1 2014年 采用原生质体诱变技术选育出一株耐高浓度底物去氢表雄酮(DHEA)的高产亚麻刺盘孢菌株(Colletotrichum lini)ST-0317,并研究了其转化特性。以C.lini ST为出发菌株,考察了其原生质体制备与再生的最适条件,随后对其原生质体进行等离子诱变,最终选育得到优势突变株ST-0317。该菌株在底物耐受性提高的同时也具有良好的遗传稳定性,在DHEA投料浓度高达10g/L的条件下,产物7α,15α-diOH-DHEA摩尔得率可达36.9%,比出发菌株提高了50%。 李恒 吴燕 魏利莎 李会 张晓梅 史劲松 许正宏关键词:原生质体 去氢表雄酮 固定化Gibberella intermedia转化3-氰基吡啶制备烟酸 被引量:3 2014年 研究不同复合包埋材料对含腈水解酶的Gibberella intermedia CA3-1进行固定化,选择出最为适合的壳聚糖-聚乙烯醇作为复合包埋材料,其优化后的浓度分别为1.6%和2%。实验结果表明该固定化细胞的最适转化条件为:3-氰基吡啶初始浓度300mmol/L,转化温度30℃,pH值7.0,转化时间60min。固定化细胞可以稳定进行26个批次转化,每克干细胞可转化产生283.5g烟酸,为游离细胞的3倍。此外,固定化细胞对高浓度3-氰基吡啶的耐受性大幅提高,温度稳定性有一定增强。连续补料19次,固定化细胞酶活保留约30%,经折算产率为每克干细胞转化生成191.3g烟酸。 杨涛 李恒 龚劲松 熊雷 朱小燕 许正宏 史劲松关键词:烟酸 固定化 生物催化 Gibberella intermedia CA3-1羟基化去氢表雄酮的工艺 被引量:3 2015年 利用Gibberella intermedia CA3-1对甾体化合物去氢表雄酮(DHEA)进行C7α-羟基化反应研究。用单因素实验的方法考察接种量、装液量、转速、有机溶剂助溶、投料浓度以及底物投加时间对产物7α-羟基去氢表雄酮(7α-OH-DHEA)生成的影响。最终确定最适工艺条件:接种量6%,装液量30 m L(250 m L三角瓶),转速220 r/min,体积分数6%丙二醇助溶,接种时即添加底物,底物DHEA质量浓度1 g/L,转化时间36 h。采用优化后的转化条件,7α-OH-DHEA摩尔得率为72.34%。 付珍珍 李恒 李会 许正宏关键词:生物转化 去氢表雄酮 甾体 GIBBERELLA INTERMEDIA 高效转化黄姜皂苷为薯蓣皂苷元菌株的筛选及转化条件优化 被引量:11 2013年 薯蓣皂苷元是甾体激素类药物重要的生产原料,在制药工业中有广泛应用。传统的生产方法是黄姜酸解法,污染严重。为寻找更清洁高效的生产方式,从本实验室保藏的菌株中筛选出一株赤霉菌Gibberellaintermedia WX12(层出镰孢菌Fusarium proliferatum的有性阶段),能将黄姜中的皂苷转化为薯蓣皂苷元。采用统计学实验设计方法对其转化培养基进行研究,优化的转化培养基配方为(g/L):葡萄糖20.6;酵母膏5.0;氯化钠1;磷酸二氢钾3;硫酸锌1.5;黄姜酶解物3。采用以上优化参数,薯蓣皂苷元的得率提高到(31±0.3)mg/g干黄姜,较优化前提高了3倍。这是目前关于赤霉菌转化黄姜中皂苷的首次报道。 张佳佳 李会 李恒 陆震鸣 史劲松 许正宏关键词:薯蓣皂苷元 菌种筛选 响应面法 白酒窖池中不同部位窖泥挥发性化合物的差异性分析 被引量:21 2013年 采用顶空固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法,对泸州老窖50年窖龄窖池中窖壁与窖底窖泥中的挥发性物质进行检测和分析。结果表明,窖泥中共检测到以酯类、醇类、酸类、醛酮类及酚类化合物为主的65种挥发性化合物。窖壁窖泥与窖底窖泥中的醇类、醛酮类以及酚类化合物差异不大,而酸类与酯类化合物无论在种类还是数量上均存在显著差异,其中己酸、己酸丁酯、己酸己酯是窖壁窖泥中的主要特征成分,而窖底窖泥中则含有丰富的己酸甲酯。 李恒 孙夏冰 陆震鸣 王松涛 沈才洪 许正宏 史劲松关键词:顶空固相微萃取法 气相色谱-质谱联用 窖泥 挥发性化合物 精酮合剂对小鼠肝酒精性氧化损伤的保护作用 被引量:1 2016年 酒精性肝病(ALD)是长期过量饮酒导致的多种肝脏疾病,其主要包括轻症ALD、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化等5种类型。在我国,随着饮食结构和生活方式的改变,ALD患病率呈逐年上升趋势。L-精氨酸是一种人体半必需氨基酸,其游离态质量不稳定,因此通常将其制成复盐的形式保存。 蒋敏 李琪倩 李恒 陆震鸣 史劲松 许正宏关键词:酒精性肝损伤 抗氧化 小鼠 精酮合剂对小鼠的抗疲劳作用 2017年 通过观察小鼠负重力竭游泳时间探讨精氨酸-酮戊二酸盐(精酮合剂,AAKG)对小鼠的抗疲劳作用,分别测定小鼠游泳前后血清尿素含量、肝糖原含量、全血乳酸含量等指标以探讨AAKG抗疲劳机制。结果表明,经AAKG处理过的小鼠负重游泳时间(4.71±1.36min)比对照组小鼠(3.01±0.46min)明显延长(P<0.05),AAKG组小鼠血清尿素氮含量(177.94±17.7mg/L)明显低于对照组(202.38±8.95mg/L)(P<0.05),AAKG组小鼠乳酸曲线下面积(85.88±9.74mmol/L)也显著低于对照组(112.82±17.10mmol/L)(P<0.05),而AAKG组小鼠肝糖原含量(11.95±0.35mg/g)显著性高于对照组小鼠(8.42±0.97mg/g)(P<0.05)。本实验结果表明AAKG具有较好的抗疲劳作用,推测与其能够提高小鼠代谢能力和增强应激能力有关。 蒋敏 李琪倩 李恒 许正宏 史劲松关键词:抗疲劳 小鼠 固定化Colletotrichum lini ST-1转化去氢表雄酮为三羟基雄甾烯酮 被引量:1 2014年 面向三羟基雄甾烯酮的生物转化,选择合适的方法和材料对亚麻刺盘孢霉Colletotrichum lini ST-1进行固定,随后考察了固定化条件、转化条件和重复利用批次对固定化细胞的影响。结果表明,以海藻酸钠(SA)包埋的方法较为合适。优化的固定化条件为:SA 30 g/L,CaCl250 g/L;转化去氢表雄酮(DHEA)的最佳条件为:温度27℃,转速180 r/min,缓冲液浓度20 mmol/L,12 g固定化小球/20 mL缓冲液,添加11 mmol/L FeSO4、90 g/L甘油和20 g/L PEG。在该条件下进行生物转化,产物摩尔得率为68.7%,较游离细胞(51.2%)提高34.1%幅度。批次转化结果显示,底物最佳添加量为10 g/L。此时,固定化细胞可重复使用4批次,产能为1.09(g产物/g细胞),为游离细胞的3倍。 刘梅珍 李恒 杨春霞 吴保承 李会 龚劲松 史劲松 许正宏关键词:固定化 海藻酸钠 产芳香腈水解酶的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida CGMCC3830的筛选、鉴定及发酵优化(英文) 被引量:4 2014年 近年来微生物腈水解酶水解腈类化合物制备有机酸已逐步受到关注。本研究分离到一株表现出较高腈水解酶活力的细菌菌株,通过形态学、生理生化实验以及16S rRNA基因序列分析将其鉴定为恶臭假单胞菌Pseudomonas putida CGMCC3830。结合单因素及响应面法对该菌株产腈水解酶的发酵条件进行了优化,获得最适培养条件为:甘油13.54 g/L,胰蛋白胨11.59 g/L,酵母粉5.21 g/L,KH2PO4 1 g/L,NaCl 1 g/L,脲1 g/L,初始pH 6.0及培养温度30℃。通过优化,酶活由2.02 U/mL提升至36.12 U/mL。对该菌株底物特异性的考察结果表明,恶臭假单胞菌腈水解酶对芳香族腈类化合物具有较高的水解活力。将其应用于烟酸的生物合成中,2 mg/mL游离细胞能90 min内将20.8 g/L 3-氰基吡啶彻底转化,制备得到相应烟酸。这些结果表明恶臭假单胞菌P.putida CGMCC3830在烟酸的规模化生产中具有一定的应用潜力。 朱小燕 龚劲松 李恒 陆震鸣 周哲敏 史劲松 许正宏关键词:腈水解酶 恶臭假单胞菌 3-氰基吡啶 烟酸 发酵优化 固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸 被引量:2 2014年 采用固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸。选择海藻酸钠作为包埋材料进行固定化,考察固定化细胞的制备条件、转化条件以及批次稳定性。结果表明,优化的固定化条件为:海藻酸钠2 g/dL,氯化钙0.4 g/dL,固化时间6 h;最适转化条件为:温度35℃,pH 7.0,底物浓度100 mmol/L。批次转化实验结果显示,当底物浓度为100 mmol/L时,固定化细胞重复使用10次,酶活仍保留59.1%,产物烟酸的得率为91.8 g/g细胞干重,而游离细胞的使用3次后,酶活下降至45.6%。 李恒 赵欣 杨涛 龚劲松 朱小燕 熊雷 陆震鸣 许正宏 史劲松关键词:PUTIDA 固定化 烟酸 3-氰基吡啶 腈水解酶