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李雪松: 作品数：65 被引量：170H指数：8; 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>

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鸭坦布苏病毒弱毒株及其应用: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒弱毒株，该弱毒株是由鸭坦布苏病毒强毒株FX2010经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代培养后突变获得。本发明还公开了预防或治疗鸭坦布苏病毒病的疫苗，该疫苗是以上述鸭坦布苏病毒弱毒株为种毒的鸭...; 李泽君李国新肖亚莉李雪松滕巧泱; 文献传递

猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR方法的建立被引量：4: 2011年; 为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物。建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法。试验结果表明,本方法最低可检测到的Shimen病毒cDNA含量为100拷贝/μL,敏感度至少是普通PCR的100倍;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、牛流行腹泻病毒Ⅰ型(BVDV-1)和猪瘟病毒C株均无特异性扩增,证明本方法具有很强的特异性;通过批内和批间重复试验,其变异系数<0.7%,结果显示本方法具有很好的重复性。本研究建立了猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法,为猪瘟的预防与控制提供了有效的技术手段,并为猪瘟强毒试剂盒的研发奠定了基础。; 王伟邹月红李雪松陈欣郎越坤田华斌符芳李曦李集临; 关键词：猪瘟病毒

蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒的重组特性研究被引量：1: 2022年; 人类历史上数次流感大流行,都与不同流感病毒之间的基因重组有关,为了研究新发现的蝙蝠流感病毒与禽流感病毒的重组可能性,本研究利用反向遗传操作技术对嵌合蝙蝠流感病毒(Bat09:mH9mN2)与禽流感病毒(A2093/H9N2)进行替换重组,研究发现仅H9病毒的M基因可单向替换Bat病毒的M基因获得重组嵌合蝙蝠流感病毒,命名为Bat09:mH9mN2-A2093(M),其他基因均不能互换拯救。该重组病毒可以在鸡胚上、MDCK细胞上复制良好,但在禽源LMH细胞上几乎不复制。本研究发现蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒之间的基因兼容性并不强,仅有禽源病毒M基因可以单向替换重组,这与之前的研究报道一致,关于M基因的重组兼容性及重组病毒生物学特性还有待进一步研究。; 张培黄敏滕巧泱刘芹防李雪松张志飞崔宏锐李泽君周雨霞杨健美; 关键词：H9N2亚型禽流感病毒 M基因

抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用: 本发明公开了一种抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体，其结合H9亚型禽流感病毒的HA蛋白，并具有血凝抑制活性。本发明还公开了检测H9亚型禽流感病毒抗体的试剂盒及上述单克隆抗体在制备诊断禽流感的产品中的应用。本发明检测H9亚型...; 李泽君杨健美滕巧泱李雪松戴晓光; 文献传递

鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达被引量：9: 2012年; 本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。; 姬希文李雪松边延峰李国新颜丕熙张七斤李泽君; 关键词：E基因克隆

两株H1N1亚型猪流感病毒NS1蛋白抑制Ⅰ型IFN功能比较被引量：2: 2021年; 本研究分离得到两株猪源H1N1流感病毒,通过进化树分析发现分别是欧亚类禽H1N1猪流感病毒和类鸭源H1N1猪流感病毒,为了研究两株毒株的NS1蛋白对Ⅰ型IFN产生的抑制能力,分别构建了2个毒株的NS1基因的真核表达载体,将NS1真核表达质粒、Ⅰ型IFN报告质粒与干扰素刺激质粒RIG-I共转染293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测Ⅰ型IFN激活水平。结果显示:欧亚类禽H1N1猪流感病毒NS1蛋白对人源细胞干扰素的拮抗作用明显强于类鸭源H1N1猪流感病毒;2种NS1蛋白对RIG-I与TBK-1激活的IFN-I抑制能力存在显著的差别,但是对IRF-3激活的IFN-I抑制能力没有显著差别。本研究结果初步揭示了欧亚类禽与类鸭源H1N1猪流感病毒抑制IFN-I能力的差异,及H1N1禽流感适应猪群的潜在分子机制。; 张婷陆晨阳任超超包旦奇陈鸿军李雪松杨健美滕巧泱李泽君刘芹防; 关键词：猪流感病毒 NS1蛋白

H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作平台的建立被引量：1: 2020年; H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在自然界中广泛存在和传播,给养禽业造成了巨大损失。为了进一步揭示该病毒的致病机制,本研究采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/1/2006(简称SH1)的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS 8个基因片段,并分别克隆至PLLB双向表达载体上。采用8质粒系统共转染293T细胞,转染48 h后加入TPCK胰酶作用2 h,将上清液和细胞一同接种9~11日龄SPF鸡胚,并检测其血凝效价。经序列比对,拯救获得的病毒rSH1的8个基因片段序列均与亲本病毒SH1的序列相同。实验结果表明,本研究成功建立了H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统,为该病毒的致病机理和传播机制研究等奠定了技术平台。; 陈新武石晓娜潘学李雪松杨健美刘芹防陈鸿军滕巧泱李泽君; 关键词：禽流感病毒 H9N2 致病

鸭坦布苏病毒弱毒株及其应用: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒弱毒株，该弱毒株是由鸭坦布苏病毒强毒株FX2010经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代培养后突变获得。本发明还公开了预防或治疗鸭坦布苏病毒病的疫苗，该疫苗是以上述鸭坦布苏病毒弱毒株为种毒的鸭...; 李泽君李国新肖亚莉李雪松滕巧泱; 文献传递

H9N2亚型禽流感病毒样颗粒疫苗的制备研究被引量：4: 2019年; 目前,我国现有的商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的免疫效果及其安全性优于灭活苗,成为近年研究的热点。本研究旨在建立一种H9N2亚型流感病毒VLP疫苗制备的方法。将优化的H9N2亚型禽流感病毒的HA、NA基因和未优化的HA、NA基因分别插入到pFastBack^(TM)Dual载体中,得到相应的重组供体。然后将这些重组供体转化至含Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,获得含有目的基因的重组杆粒。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,红细胞凝集试验、SDS-PAGE和Western blot结果显示,优化的HA、NA基因编码的蛋白在Sf9昆虫细胞中获得了成功表达。通过透射电子显微镜观察细胞上清的浓缩液,能检测到VLP。结果表明,本研究在Sf9昆虫表达系统中成功表达了H9N2亚型禽流感病毒的HA和NA蛋白,并形成了VLP,为进一步研究该病毒VLP疫苗奠定了基础。; 潘学陈新武季雅宁李雪松刘芹防陈鸿军杨健美滕巧泱李泽君; 关键词：流感病毒 HA NA 病毒样颗粒

火鸡疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用: 2019年; 本研究针对火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)FC-126毒株sorf1基因序列,设计特异性的扩增引物和探针,建立了检测HVT的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的荧光定量PCR方法灵敏度高,最低可检测到1×10~2 copies/μL,比普通PCR灵敏10倍;对鸭瘟病毒、传染性喉气管炎病毒、鹅细小病毒、4型禽腺病毒和8型禽腺病毒均无特异性扩增,具有较好的特异性;组间和组内变异系数均小于1%,表明该方法重复性好。用建立的荧光定量PCR方法对82份HVT样品进行检测,结果43份为阳性,普通PCR只检测出30份阳性样品。结果表明本研究建立的HVT TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性好,灵敏度高,重要性好,为监测HVT的病毒含量提供了一种有效的手段。; 白银荣张志飞李雪松刘芹防陈鸿军杨健美李泽君滕巧泱张七斤; 关键词：火鸡疱疹病毒荧光定量PCR

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