李飚
- 作品数：17 被引量：83H指数：5
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 我国人细小病毒B19VP1和VP2部分基因序列测定及变异分析被引量：15
- 2002年
- 目的 探讨 B1 9病毒中国株的基因变异 .方法 采用长片段聚合酶链反应技术 ,从中国再障患儿血清中扩增HPVB1 9- XA2株的 VP1独特区基因和 VP1 /VP2基因片段 ,进行核苷酸序列分析 .结果 B1 9- XA2株的 VP1独特区和VP1 /VP2连接区基因大部分区域核苷酸序列被测定 ,其与国外 Au株基因核苷酸序列比较 ,有 4个核苷酸突变 ,并引起编码的 2个氨基酸改变 .结论 我国 B1 9病毒 VP1基因独特区和 VP1 /VP2连接区基因序列与
- 张国成孙新许东亮采华李飚陈星琪
- 关键词：细小病毒B19基因变异
- 小儿肾母细胞瘤、髓母细胞瘤多药耐药蛋白的表达及意义被引量：5
- 1999年
- 目的：探讨小儿肾母细胞瘤、髓母细胞瘤中ｐ－糖蛋白的表达和意义．方法：应用ＳＡＢＣ免疫组化方法检测４６例肾母细胞瘤，２５例髓母细胞瘤组织中Ｐｇｐ蛋白的表达．结果：７例（１５．２％）肾母细胞瘤呈阳性反应，１１例（４４．０％）髓母细胞瘤呈阳性反应．在与临床病理指标的相关分析中发现，肾母细胞瘤Ｐｇｐ异常表达与化疗，ＮＷＴＳ－Ⅱ病理分型呈显著性相关（Ｐ＜０．０５），与ＮＷＴＳ－Ⅲ临床病理分期无显著性相关（Ｐ＞０．０５）．髓母细胞瘤Ｐｇｐ异常表达与病理分型无显著性相关（Ｐ＞０．０５）．结论：肾母细胞瘤中Ｐｇｐ表达可通过化疗而诱导，Ｐｇｐ与肾母细胞瘤的病理分型相关，肾母细胞瘤恶变过程中，Ｐｇｐ的表达得到加强，Ｐｇｐ可作为肾母细胞瘤的恶性和预后指标．Ｐｇｐ表达与髓母细胞瘤的病理分型无关．
- 蒙育林张国成许东亮郑跃杰郑跃杰何晋叶江枫李飚
- 关键词：肾母细胞瘤髓母细胞瘤P-糖蛋白多药耐药
- 人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。 方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 30 ,构建VP1 pQE 30原核表达载体 ,并转化至感受态大肠杆菌M1 5中 ,给予不同浓度诱导剂异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)及在不同温度下进行诱导表达。 结果 :成功构建了融合蛋白VP1 pQE 30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 5 %SDS PAGE电泳证实其相对分子质量为 2 2 0 0 0。IPTG浓度为 1mmol/L ,诱导表达 5h ,37℃下无表达 ,2 5℃下有表达 ;采用不同的IPTG浓度诱导表达 5h ,0 .0 5mmol/L至 1mmol/L均有表达 ,表达率相近 ,为 (1 6± 1 ) %。 结论 :获得人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物 。
- 陈彩平张国成许东亮汪萍李茹英黄莹盛凯李飚
- 关键词：人细小病毒B19
- 人细小病毒B19 NS1片段全长的克隆及表达被引量：5
- 2003年
- 目的 :克隆人细小病毒B1 9非结构蛋白 1 (NS1 )全长基因 ,构建重组表达载体并诱导表达。 方法 :利用聚合酶链反应 (PCR)和分子克隆技术 ,从我科保存的B1 9阳性标本XA2 0中扩增NS1片段全长 ,构建NS1 pGEM T easy克隆载体并测序分析 ,测序证实序列正确后亚克隆于pQE30表达载体中 ,并转化至M1 5感受态菌中 ,经IPTG诱导可表达 770 0 0的融合蛋白。 结果 :成功克隆了人细小病毒B1 9NS1全长基因 ,构建了融合蛋白NS1 pQE30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 2 %SDS PAGE电泳证实为 770 0 0。 结论 :获得人细小病毒B1 9NS1全长基因及原核表达产物 ,对进一步研究NS1的生物学活性及其单克隆抗体的制备有重要意义。
- 汤雪晴张国成许东亮陈彩萍李飚
- 关键词：人细小病毒B19基因克隆
- 国人细小病毒B19感染相关疾病谱被引量：21
- 1999年
- 目的：探讨我国人细小病毒Ｂ１９感染引起的相关疾病谱．方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及原位杂交技术对６６例先天性心脏病（ＣＨＤ）心肌组织标本及１０８例血小板减少性紫癜（ＴＰ）、４７例急性再生障碍性贫血（ＡＡＡ）、５例传染性红斑（ＥＩ）及４０例缺铁性贫血（ＩＤＡ）患儿的外周血、骨髓标本进行了Ｂ１９－ＤＮＡ检测，并随机对其中２３例Ｂ１９－ＤＮＡ阳性标本作巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）及弓形体（ＴＯＸ）－ＤＮＡ的检测．结果：①上述疾病中Ｂ１９－ＤＮＡ的总阳性检出率为２６．３％（７０／２６６），其中ＥＩ，ＡＡＡ，ＩＴＰ和ＣＨＤ病例中Ｂ１９－ＤＮＡ的阳性率分别为１００％（５／５），２５．５％（１２／４７）及３８．０％（４１／１０８）和１８．２％（１２／６６）；②２３例Ｂ１９－ＤＮＡ阳性病例中，ＡＡＡ，ＴＰ及ＣＨＤ的标本ＣＭＶ－ＤＮＡ的检出率分别为１０．０％（１／１０），２０．０％（１／５）及４０．０％（２／５）．结论：我国ＨＰＶＢ１９病毒感染可引起ＥＩ，ＡＡＡ和急性血小板减少性紫癜，并可能为ＣＨＤ的重要致病因子之一．
- 张国成许东亮王晓明张笑飞钱新宏郑跃杰李飚
- 关键词：细小病毒感染细小病毒B19疾病谱聚合酶链反应
- 人细小病毒B19-VP2-IgM的检测及其应用价值的研究被引量：4
- 2000年
- 目的 评估 EL ISA法检测抗人细小病毒 B19主要衣壳蛋白 Ig M(B19- VP2 - Ig M)诊断 B19病毒感染的价值 ;并初步了解 B19病毒感染临床表现多样性 .方法 对 5 5例小儿常见疾病包括急性再生障碍性贫血 (AA) 10例 .特发性血小板减少性紫癜 (ITP) 10例、急性淋巴细胞白血病 (AL L ) 15例、幼年类风湿关节炎 (JRA) 12例、过敏性紫癜 (SHP) 8例患者血清进行 B19- VP2 - Ig M检测 ;并对上述标本用巢式 PCR检测 B19- DNA作为对照研究 .结果 1EL ISA法检测 B19-VP2 - Ig M特异性高 ,稳定性好 . 2 B19- VP2 - Ig M总阳性率为10 / 5 5 (18.2 % ) ,其中 AA,ITP,AL L,JRA,SHP阳性率分别为 :2 / 10 (2 0 .0 % ) ,3/ 10 (30 .0 % ) ,2 / 15 (13.3% ) ,2 / 12(16 .7% ) ,1/ 8(12 .5 % ) . 3B19- DNA总阳性率为 17/ 5 5(30 .9% ) ,其中 AA,ITP,AL L ,JRA,SHP阳性率分别为 :3/ 10 (30 . 0 % ) ,4/ 10 (40 . 0 % ) ,4/ 15 (2 6 . 7% ) ,4/ 12(33.3% ) ,2 / 8(2 5 .0 % ) . 4B19- VP2 - Ig M阳性率略小于B19- DNA阳性率 ,但统计学检验无显著差异 (P >0 .0 5 ) .结论 1EL ISA法检测 B19- VP2 - Ig M简便快速 ,特异性高 ,适用于 B19病毒感染早期诊断 . 2 B19病毒感染临床表现多种多样 ,与小儿 AA,ITP,AL L,JRA,SHP关系密?
- 曹玉红许东亮张国成孙新李飚
- 关键词：ELISA聚合酶链反应人细小病毒B19免疫球蛋白
- 人微小病毒B19致胎肝造血细胞凋亡及其基因表达的意义
- 1999年
- 目的：研究人微小病毒 Ｂ１９（ Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９）引致胎肝造血细胞凋亡及凋亡相关基因表达的变化，初步探讨 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ 引起死胎的机理． 方法：采用原位末端标记法对２５ 例石蜡包埋死胎肝脏组织（其中 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阳性者 １０ 例， Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阴性者１５ 例）进行细胞凋亡检测，并用免疫组化方法检测ｂｃ１２，ｂａｘ 表达情况． 结果：１０ 例 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阳性死胎肝脏组织中 ８ 例明显可见造血细胞的凋亡，６ 例 ｂａｘ 表达阳性． １５ 例 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阴性死胎肝脏组织中仅 ２ 例有造血细胞的凋亡，２ 例ｂａｘ 表达阳性，２５ 例均未检出ｂｃ１２ 的表达．结论： Ｂ１９ 感染可能诱导胎肝造血细胞的凋亡，这为可能是该病毒引起胎儿死亡的重要机制．
- 孙新张国成韩美玉许东亮李飚
- 关键词：微小病毒B19细胞凋亡基因表达胎儿
- 先天性心脏病患儿弓形体感染的初步研究被引量：2
- 2000年
- 为探讨先心病(CHD)与弓形体(TOX)感染的关系,采用ELISA、PCR技术分别检测CHD患儿血清、心肌中TOX抗体及DNA。结果:TOX-IgG阳性率在CHD组和对照组之间差异有显著性(x^2=5.2847,P<0.05);而TOX-IgM阳性率在两组之间差异无显著性(x^2=0.0596,P>0.05);在TOX-IgG阳性者心肌组织中TOX-DNA阳性率高达35％。提示CHD与TOX感染密切有关,先天性TOX感染可能是CHD的致畸因子。
- 侯晗张国成王晓明许东亮侯臣勋郑跃杰李飚
- 关键词：先天性心脏病弓形体感染儿童
- 国人B19病毒感染的首次证实及检测方法的研究
- 1996年
- 本项目广泛用于国内、军内各医院及科研机构对人细小病毒B19感染的临床诊断、流行病学监测及防治等方面的研究。它基立于ELISA抗Υ捕捉法检测特异抗体病毒技术及PCR检测B19-DNA等分子生物学技术,在国内首次证实了我国存在此病毒感染,并和小儿再障危象、传染性红斑孕妇流产。
- 张国成许东亮王绮云李佐华李佐华李飚王瑞华
- 关键词：病毒感染流行病学监测分子生物学技术特异抗体人细小病毒传染性红斑
- 人细小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段序列变异分析被引量：6
- 2002年
- 目的 研究 B1 9病毒中国株独特区 VP1的基因变异 .方法 采用聚合酶链反应技术 (PCR)从两例中国再生障碍性贫血患儿血清中扩增 VP1独特区基因片段 ,将其与PUC1 9连接 ,酶切鉴定筛选阳性克隆后测序分析 .结果 从一个患儿的血清中扩增出约 480 bp目的片段 ,并成功构建PUC1 9- VP1质粒 ,测序结果显示 ,与国外已发表的 Wi株VP1独特区序列相比 ,有 2处核苷酸发生改变 ,并可致所编码的氨基酸变化 .结论 中国 B1 9病毒
- 采华张国成许东亮李飚
- 关键词：细小病毒B19分子克隆
