杨月梅
- 作品数：8 被引量：32H指数：3
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项福建省科技厅重大项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 酿酒酵母ADH3基因的敲除被引量：12
- 2006年
- 设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株。利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因。最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3。
- 宋浩雷郭晓贤杨月梅江贤章黄建忠
- 关键词：酿酒酵母乙醇脱氢酶基因敲除PCR
- 扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的克隆与鉴定被引量：3
- 2007年
- 应用衔接头PCR技术,扩增得到约2000 bp的扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的单一产物。对该产物测序并提交GenBank数据库(GenBank accession DQ677520),经序列比对分析,发现该序列具有真核启动子序列的基本结构特征,含有TATA盒、CAAT盒、GC盒等元件。将扩增得到的脂肪酶基因5’端侧翼序列,连接到含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒中,构建了一个重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞。荧光显微观察大肠杆菌阳性转化子发出荧光,侧翼序列含有启动子功能得到确认。
- 杨月梅江贤章张娟梅谢必峰杨欣伟林琳黄建忠
- 关键词：扩展青霉脂肪酶启动子GFP
- 扩展青霉PF898碱性脂肪酶基因5'端侧翼区域的克隆及调控功能的研究
- 通过LA-PCR方法，从扩展青霉PF898基因组DNA中扩增得到2000 bp的碱性脂肪酶基因5'端侧翼区域的单一产物，并进行序列测定及提交GenBank数据库。该序列分别有类似于TATA盒、CAAT盒、GC盒等元件，这...
- 杨月梅
- 关键词：扩展青霉脂肪酶启动子荧光蛋白
- 文献传递
- 扩展青霉(Penicillium expansum)PF898基因组DNA提取方法的比较被引量：17
- 2007年
- 利用CTAB法、SDS改进法和SDS快速法3种DNA提取代表性方法,对扩展青霉(Penicillium expansum)PF898基因组DNA的提取进行比较研究.CTAB法提取的DNA样品纯度最高,SDS裂解法制备的DNA得率最高;CTAB法和SDS改进法所得DNA都可直接应用于限制性酶切分析;3种方法所提取的DNA均能满足扩展青霉PF898脂肪酶基因和18S rRNA的PCR扩增.总体而言,SDS法简便、快速、得率高,是一种理想的扩展青霉基因组DNA提取方法.
- 杨月梅江贤章黄建忠
- 关键词：基因组DNACTAB法SDS法
- 扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的克隆与鉴定
- 应用衔接头PCR技术,扩增得到约2000 bp的扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的单一产物。对该产物测序并提交GenBank数据库(GenBank accession DQ677520),经序列比对分析,发现该序列具...
- 杨月梅江贤章张娟梅谢必峰杨欣伟林琳黄建忠
- 关键词：扩展青霉脂肪酶启动子GFP
- 文献传递
- 扩展青霉(Penicillium expansum)基因组DNA提取方法的比较
- 利用CTAB法、SDS改进法和SDS快速法三种代表性DNA提取方法,对扩展青毒基因组DNA 的提取进行比较研究。就DNA纯度而言,CTAB法提取的DNA纯度最高,受蛋白或酚等污染少,SDS 改进法次之,用SDS快速法提取...
- 杨月梅江贤章黄建忠
- 文献传递
- 酿酒酵母ADH3基因的敲除
- 能源是人类赖以生存和发展的关键因素,燃料乙醇作为石油能源的替代物,逐渐成为世界各国研究的热点。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是一种已知全序列的重要模式生物,具备单双倍体特性、乙醇耐受性强、高...
- 宋浩雷郭晓贤杨月梅江贤章黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除PCR
- 文献传递
- 扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的克隆与分析
- 脂肪酶是一类重要工业用酶,具有较高的催化活性和稳定性,广泛应用于洗涤剂、医药、食品、化妆品、皮革造纸等方面, 它普遍存在于动植物各种组织及许多微生物中,是最早被研究的酶类之一。在现代生物技术,尤其是重组DNA技术飞速发展...
- 杨月梅施巧琴吴松刚黄建忠
- 文献传递
