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展呈H5N1亚型禽流感病毒M2e表位鞭毛蛋白的构建及其免疫原性: 以重组质粒pET-fliC和PUC57-M2e2为模板，通过重叠PCR将M2e2基因插入fliC的高变区域，构建嵌合鞭毛基因片段fliC/M2e2。将fliC/M2e2片段插入原核表达载体pET30a+，获得重组质粒pE...; 潘志明游猛方强康喜龙杨芸焦新安; 关键词：禽流感病毒鞭毛蛋白免疫应答

展呈H5N1亚型禽流感病毒M2e表位鞭毛蛋白的构建及其免疫原性: 以重组质粒pET-fliC和pUC57-M2e2为模板,通过重叠PCR将M2e2基因插入fliC的高变区域,构建嵌合鞭毛基因片段fliC/M2e2。将fliC/M2e2片段插入原核表达载体pET30a+,获得重组质粒pE...; 游猛潘志明方强耿士忠康喜龙杨芸焦新安; 关键词：鞭毛蛋白禽流感病毒免疫原性; 文献传递

嵌合鞭毛蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中的表达与组装分析（英文）: 2017年; 鞭毛蛋白根据能否组装可以表达为单体或多聚体。目前,关于它们之间的区别少有报道。文中,将重组质粒p ET-fli C/M2e2分别导入大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中来表达嵌合鞭毛蛋白mfli C/M和pfli C/M,然后分析它们的组装特性。SDS-PAGE结果表明,两重组菌成功表达了嵌合鞭毛蛋白。透射电镜观察显示,在重组大肠杆菌表面未见鞭毛,而重组沙门菌表面呈现鞭毛。将嵌合蛋白纯化后,圆二色谱(Circular dichroism,CD)分析表明,两者的CD信号明显不同,pfli C/M的CD信号与野生型鞭毛蛋白一致,而mfli C/M基本上没有CD信号出现。动态光散射分析表明,mfli C/M的聚集程度明显低于pfli C/M。将嵌合蛋白转染小鼠腹腔细胞3 h后,两者均能诱导产生IL-1β,但mfli C/M组高于pfli C/M组。以上结果对于鞭毛蛋白表达形式的选择具有重要的参考价值。; 胡茂志潘志明杨芸孟闯张磊耿士忠焦新安; 关键词：鞭毛蛋白白细胞介素1Β

密码子优化的鸡IL-17在昆虫细胞中的表达: 为了获得具有良好生物学活性且具有较高表达量的鸡IL-17，在前期研究工作基础上，将其编码基因按照真核细胞(昆虫细胞)偏爱的密码子进行优化改造，经全基因合成后插入到转座载体pFastBacnTM I中，构建重组转移载体pf...; 康喜龙潘志明杨芸赵雯焦新安; 关键词：杆状病毒编码基因真核表达昆虫细胞

表达绿色荧光蛋白的单核细胞增生李斯特菌重组菌株的构建及其生物学特性被引量：1: 2009年; 目的为了对单核细胞增生李斯特菌运送外源抗原所诱导免疫应答特性进行评价,开展了以原核方式运送模式蛋白GFP的研究。方法利用SOEing PCR的方法把LLO的启动子与GFP融合在一起,通过同源重组的方式整合到yzuLM1-2actA和plcB基因片段之后,在LLO启动子的作用下实现GFP的表达。结果PCR扩增证实目的基因gfp融合到李斯特菌基基因组中,重组菌对小鼠的LD50为4.31×108,毒力比yzuLM1-2显著降低。以重组菌株免疫小鼠后获得的血清进行Western blot显示在27kD处出现特异印迹带;ELISA测定结果显示能诱导小鼠产生较高的抗GFP的抗体水平。结论研究结果表明减毒LM所运送的GFP能诱导小鼠产生较强的免疫应答的特性,这为减毒株yzuLM1-2运送外源保护性抗原的研究奠定了基础,也为开展减毒重组菌与抗原递呈细胞之间的相互作用及其诱导的免疫应答分析提供了必要条件。; 殷月兰焦新安杨芸张晨菊周海霞潘志明黄金林; 关键词：单核细胞增生李斯特菌绿色荧光蛋白重组菌株生物学特性

密码子优化的鸡白细胞介素-17在昆虫细胞中的表达研究: 2013年; 为了获得具有良好生物学活性且具有较高表达量的鸡白细胞介素-17(ChIL-17),本研究在前期研究工作基础上,将ChIL-17的编码基因按照真核细胞(昆虫细胞)偏爱的密码子进行优化改造,经全基因合成后插入到转座载体pFastBacTMⅠ中,构建重组转移质粒pfast-mod.ChIL-17并转化DH10Bac感受态细胞。通过位点特异性转座将mod.ChIL-17基因整合到穿梭质粒Bacmid中,获得重组穿梭质粒Bacmid-mod.ChIL-17。应用脂质体将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-mod.ChIL-17。重组病毒传代扩增感染Sf9细胞,通过间接免疫荧光检测目的蛋白的表达。结果表明,经过优化的ChIL-17在杆状病毒系统中获得表达。; 康喜龙王静潘志明杨芸赵雯焦新安; 关键词：密码子优化杆状病毒真核表达

H1N1甲型流感病毒HA基因与沙门菌fljB基因的融合表达与鉴定: 本研究将A/California/05/2009 H1N1甲型流感病毒的血凝素HA基因部分片段与鼠伤寒沙门菌Ⅱ型鞭毛蛋白fljB基因融合表达，以期构建新型甲型流感疫苗。本实验成功表达出HA1-2-fljB融合蛋白，证明该...; 杨芸潘志明马全刚张磊焦新安; 关键词：沙门菌免疫反应

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杨芸