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基于单克隆抗体G250修饰的肿瘤细胞靶向基因载体研究被引量：5: 2008年; 用宫颈癌细胞Hela表面高表达G250抗原的单克隆抗体G250修饰非病毒基因载体,获得肿瘤靶向基因载体.通过注射G250杂交瘤细胞于小鼠腹腔,制备富含G250mAb的腹水,用正辛酸-硫酸铵沉淀法和Protein A Agarose分离纯化,获得高纯度的G250mAb.通过二硫键将PEI与G250mAb偶联,得到修饰的基因载体G250mAb-PEI,研究其转基因靶向性.结果表明,G250mAb-PEI对Hela细胞的基因转染具有显著的靶向性,对Hela细胞的转基因效率是肝癌细胞HepG2(G250阴性)的2倍;而对正常血管平滑肌细胞(SMC)的基因转染效率比Hela低近20倍,G250mAb修饰与否对SMC没有靶向性;对3T3细胞的毒性显著低于未修饰的PEI,表明G250mAb-PEI是一种高效、低毒和具有靶向性的基因载体.; 韩素芳段亚君王燕铭郑骏年武艺蔡荣欧来良孔德领俞耀庭; 关键词：聚乙烯亚胺肿瘤靶向 HELA细胞基因治疗

肾癌肿瘤相关抗原G250及G250蛋白多糖(PG)区基因的克隆、表达及鉴定: 目的肾癌肿瘤相关抗原G250及G250蛋白多糖(PG)区基因的克隆,蛋白表达及鉴定。方法从人肾癌786-0细胞中提取mRNA,采用RT-PCR方法扩增出G250及G250PG区cDNA,并将其克隆到pET28a(+)表达...; 郑骏年武艺吴阳李望刘俊杰温儒民朱海涛孙晓青; 文献传递

肾癌G250抗原蛋白多糖(PG)区蛋白cDNA的克隆和序列测定: 2006年; 目的克隆肾癌G250抗原蛋白多糖(PG)区cDNA,为制备G250杂交瘤及抗G250的单克隆抗体奠定基础。方法从肾癌细胞786-0中提取总RNA,以RT-PCR方法扩增出全长360 bp的G250抗原PG区cDNA,将其与表达载体pCA13连接,转化大肠杆菌JM109,构建G250抗原PG区cDNA克隆。结果酶切及序列分析表明,与GenBank报道的G250抗原PG区cDNA序列完全一致。结论G250抗原PG区cDNA已成功地得到克隆。; 郑典宝郑骏年郝林武艺刘俊杰裴东生胡书群陈家存孙晓青; 关键词：CDNA克隆

抗人肾癌G250单克隆抗体的制备及其功能鉴定: 目的大量制备、纯化抗人G250单克隆抗体(G250-McAb),并鉴定其与G250合成多肽及细胞天然抗原的结合特异性。方法取4～6周BALB/c雌性小鼠,腹腔注射弗氏不完全佐剂。两周后取对数生长期杂交瘤细胞注入小鼠腹腔。...; 郑骏年武艺吴阳李望刘俊杰温儒民朱海涛孙晓青; 文献传递

细胞因子对肾癌特异抗原G250表达的影响被引量：4: 2007年; 目的研究细胞因子对肾癌细胞特异性抗原G250表达的影响。方法单独或联合应用不同浓度的白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-α、IFN-γ刺激肾癌786-0细胞系,刺激24、48、96 h后,运用免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测G250抗原在肾癌786-0细胞上的表达。结果IL-2、IFN-α、IFN-γ均能上调786-0细胞G250抗原表达,以IFN-γ作用最强,上调作用具有浓度及时间依赖性。细胞因子联用能明显增强G250抗原表达的上调作用。结论IL-2、IFN-α、IFN-γ能上调肾癌786-0细胞G250抗原表达,联合应用效果更大。提示细胞因子联合以G250抗原为靶点的免疫治疗有望成为晚期肾癌新的治疗途径。; 温儒民郑骏年武艺刘俊杰毛立军薛松李望王军起孔德领; 关键词：肾癌抗原细胞因子

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武艺