汪之沫
- 作品数：25 被引量：35H指数：4
- 供职机构：深圳市南山区人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰被引量：1
- 2006年
- 目的探讨纤维介素蛋白(fg12)的双链RNA(dsRNA)在体外对fg12凝血酶原酶基因表达的干扰作用及其规律。方法构建能产生鼠垃12(mfg12)的发夹状双链RNA(shRNA)的载体p-mfg12shRNA,将其与mfg12- EGFP融合基因表达质粒pEGFP-mfg12共转染(用量比为1:5)到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)作为实验组,另仅转染pEGFP-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pEGFP-mfg12(用量比为1:5)作为对照组。转染24、48、 72 h后,观察mfg12-EGFP融合蛋白在CHO细胞中的表达情况,并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。分别将p- mfg12shRNA和mfg12cDNA表达质粒pcDNA3．1-mfg12共转染(用量比为1:5)到CHO细胞和人宫颈癌细胞(Hela 细胞),作为试验组,另转染pcDNA3．1-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3．1-mfg12(用量比为1:5) 或不转染任何质粒作为对照组。通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测mfg12在CHO和Hela这两种细胞株中表达的情况。结果实验组较对照组的绿色荧光强度明显减弱,荧光细胞数明显减少。在CHO和Hela两种细胞株,均显示mfg12shRNA显著抑制mfg12 mRNA和蛋白质的表达。结论本研究所构建的mfg12shRNA表达质粒p-mfg12shRNA 可在体外高效特异地抑制mfg12的表达,为进一步的体内实验奠定了基础。
- 汪之沫严伟明习东朱传龙罗小平宁琴
- 关键词：凝血酶原酶RNA干扰
- 绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达被引量：4
- 2005年
- 目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体,在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法:用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段,插入到GFP表达载体pEGFP N2中GFP基因序列的上游,构建成GFP mfgl2融合基因表达载体pEGFP mfgl2,将该载体转染到CHO细胞后24～48h,通过荧光显微镜观察并摄片。结果:扩增出长约1.3kb的基因片段,经双酶切鉴定和测序鉴定无误;重组载体转染CHO细胞后,在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论:成功构建了pEGFP mfgl2融合基因表达载体;重组载体可在CHO细胞中表达出GFP mfgl2融合蛋白,为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。
- 汪之沫宁琴
- 关键词：绿色荧光蛋白融合蛋白
- 大鼠肠神经系统神经元的原代培养及鉴定
- 2016年
- 目的探讨大鼠ENS神经元原代分离培养及鉴定的方法。方法解剖分离大鼠小肠,显微剥离小肠肌层,消化后,种植于培养板,用无血清培养基换液培养,观察神经元生长情况并进行免疫荧光鉴定。结果成功分离ENS神经元,神经元在无血清培养基中生长良好,呈典型神经元形态,经免疫荧光鉴定证实绝大部分细胞是神经元。结论成功建立了大鼠ENS神经元原代培养和鉴定的方法,为深入研究ENS神经元奠定了基础。
- 汪之沫康文全钱伟
- 关键词：肠神经系统肌间神经丛神经元原代培养
- 幽门螺杆菌感染与高血糖对结直肠腺瘤行内镜下切除术患者腺瘤复发的影响被引量：4
- 2018年
- 目的探讨Hp感染和高血糖在结直肠腺瘤复发中的作用。方法回顾性分析242例2004年6月~2016年6月在蛇口人民医院及南山人民医院首次结肠镜检查中切除结直肠腺瘤的患者,然后进行结肠镜检查直至结直肠腺瘤复发或随访的最后期限。结果 Hp阳性的患者其结直肠腺瘤复发率为74/99(74.7%),Hp阴性的患者其结直肠腺瘤的复发率为38/143(24.6%),有明显差异(P<0.01)。多因素Cox回归分析显示,Hp感染[OR(95%CI)4.18(2.44~7.15)]、Hb A1c≥6.5%[OR(95%CI)1.92(1.04~3.55)]、BMI≥25 kg/m2[OR(95%CI)7.63(3.14~18.53)]、饮酒[OR(95%CI)3.73(2.17~6.42)]是结直肠腺瘤复发的独立危险因素。随着Hb A1c水平的升高,Hp感染患者结直肠腺瘤复发的危险性进行性增加。结论 Hp感染与高血糖在结直肠腺瘤复发中起协同作用。
- 张江国汪之沫
- 关键词：幽门螺杆菌感染高血糖结直肠腺瘤复发COX回归分析
- 下食管括约肌与膈肌分离对食管裂孔疝患者的诊断价值被引量：1
- 2013年
- 目的 分析下食管括约肌（LES）与膈肌分离患者的胃镜表现,探究其在诊断食管裂孔疝（HH）中的意义.方法 回顾性分析2011年1月至2012年6月的高分辨率食管测压（HRM）患者资料,从中筛选提示LES与膈肌分离的患者,排除上消化道手术史及缺乏完整胃镜资料的病例,共93例纳入分析.按芝加哥标准分成3组,Ⅰ型组（LES与膈肌分离＜1 cm）21例；Ⅱ型组（LES与膈肌分离1～＜2 cm）37例；Ⅲ型组（LES与膈肌分离≥2 cm） 35例.分析各组间胃镜表现差异.以HRM为金标准,计算胃镜诊断HH的敏感度、特异度.计量资料以（-x）±s表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法或Dunnett T3检验.两组间率的比较采用卡方检验或Fisher确切概率法.结果 3组间胃食管连接部（EGJ）与门齿的距离差异无统计学意义（P＞0.05）,而EGJ与膈食管裂孔压迹的距离：Ⅲ型组[（3.57±0.78） cm]＞Ⅱ型组[（1.89±0.81） cm]＞Ⅰ型组[（1.14±0.67） cm],差异均有统计学意义LSD-t=9.26、11.44、3.57,P均＜0.05].贲门久开和胃囊上压迹出现率：Ⅲ型组＞Ⅱ型组＞Ⅰ型组（80.0％、40.5％、4.8％,x2=11.64、29.76、8.59,P均＜0.05；91.4％、27.1％、4.8％,x2=30.69、40.73、4.32,P均＜0.05）.His角变钝（可从食管看到胃体）和疝囊出现率：Ⅲ型组大于Ⅰ型组和Ⅱ型组（分别为74.3％和77.1％,24.3％和24.3％,4.8％和4.8％;x2=17.97、25.41,P均＜0.05）,Ⅰ型组和Ⅱ型组差异均无统计学意义（P均＞0.05）.食管炎发生率：Ⅲ型组和Ⅱ型组皆大于Ⅰ型组（71.4％,59.5％,14.3％；x2=17.14、11.15,P均＜0.05）,Ⅲ型组和Ⅱ型组差异无统计学意义（P＞0.05）.Barrett食管在：3组各1例.胃镜诊断HH敏感度为91.4％,特异度为81.0％.结论 HH的胃镜表现中,EGJ与膈食管裂孔压迹距离、贲门久开、His角变钝、胃囊上压迹及疝囊是比较重要的指标.胃镜诊断HH敏感度较高,特异度偏�
- 汪之沫余晓云蔺蓉熊汉华谢小平侯晓华
- 关键词：胃镜检查
- 芬太尼联合异丙酚用于小儿无痛肠镜检查的临床分析被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨芬太尼联合异丙酚比单用异丙酚用于小儿肠镜检查的优越性。方法：选取96例拟行肠镜检查的患儿,年龄3-13岁,随机分成两组,每组48例,A组为芬太尼联合异丙酚组,静脉注射芬太尼1μg/kg,再静脉注射异丙酚2 mg/kg;B组单用异丙酚,静脉注射异丙酚2 mg/kg。记录分析患儿麻醉期心率（HR）、平均动脉压（MAP）和血氧饱和度（SpO2）的变化,以及异丙酚用药量、检查时间和清醒时间。结果：A、B两组患儿HR、MAP比麻醉前有所下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组SpO2无明显变化,差异无统计学意义（P〉0.05）;A组异丙酚用药量明显少于B组,清醒时间明显短于B组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组检查时间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：芬太尼联合异丙酚用于小儿肠镜检查是安全有效的,优于单用异丙酚。
- 汪之沫孙志鹏
- 关键词：芬太尼异丙酚
- RNA干扰抑制IL-23表达对感染后内脏高敏感小鼠肠黏膜固有层DC活化Th17细胞功能的影响被引量：1
- 2012年
- 背景:前期研究发现感染后内脏高敏感小鼠肠黏膜固有层树突细胞(DC)诱导活化Th17细胞与肠道感染消退后肠黏膜免疫系统的持续激活有关。推测DC可能系通过分泌白细胞介素-23(IL-23)活化Th17细胞。目的:应用RNA干扰技术抑制DC分泌IL-23,探讨感染后内脏高敏感小鼠肠黏膜固有层DC活化Th17细胞的机制。方法:建立旋毛虫感染后内脏高敏感小鼠模型,以免疫磁珠分选肠黏膜固有层DC和脾脏CD4+T细胞。构建、鉴定小鼠IL-23小发夹RNA(shRNA)干扰质粒,以脂质体法转染DC(A组)以抑制IL-23表达,同时设置转染空脂质体的DC(B组)和转染无关序列shRNA干扰质粒的DC(C组)作为对照。各组DC与CD4+T细胞共培养120 h,以单独培养的CD4+T细胞(D组)作为对照。以ELISA方法检测DC转染前后培养上清液中的IL-23水平,以及DC与CD4+T细胞共培养上清液和CD4+T细胞单独培养上清液中的IL-17水平。结果:A组DC培养上清液中的IL-23水平较转染前显著降低(P<0.05),B、C两组转染前后IL-23水平无明显变化。A、B、C组DC与CD4+T细胞共培养上清液中的IL-17水平均较D组显著增高(P<0.05),其中A组显著低于B、C两组(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义。结论:感染后内脏高敏感小鼠肠黏膜固有层DC可能通过分泌IL-23活化Th17细胞,参与维持肠道感染消退后肠黏膜免疫系统的持续激活。
- 汪之沫王文峰龙艳芹汪欢钱伟侯晓华
- 关键词：感染后肠易激综合征内脏高敏感TH17细胞白细胞介素23RNA干扰
- hfg12凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的构建方法及其应用
- 本发明公开了一种hfgl2凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的构建方法及将构建的hfgl2凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的应用。它是根据hfgl2凝血酶原酶的mRNA或cDNA序列合成或扩增产生dsRNA或ASON的...
- 宁琴罗小平汪之沫习东严伟明朱传龙
- 文献传递
- 抗TGF-β抗体对小鼠病毒性肝炎预后及其转导激活因子的影响
- 目的:我们的前期研究表明3型鼠肝炎病毒(MHV-3)感染不同种系近交小鼠后可产生类似于人类各种不同临床类型的肝炎模型,而淋巴细胞信号转录传导激活因子1、3剪接体α、β(STAT1 α/β、STAT3 α/β)活性的检测有...
- 严伟明宁琴朱传龙汪之沫韩梅芳习东罗小平
- 文献传递
- 代谢及肿瘤相关因素在结直肠癌切除术后患者异时性腺瘤发生中的作用研究被引量：3
- 2019年
- 目的评估代谢和肿瘤相关危险因素在结直肠癌切除术后患者异时性结直肠腺瘤发生中的作用。方法对109例行结直肠癌切除术患者的临床资料及结肠镜检查结果,进行回顾性分析。结果平均随访(30.08±13.00)个月,39例(35.8%)患者发生异时性结直肠腺瘤。多因素Cox回归分析显示,代谢相关危险因素:年龄大于或等于60岁[HR=2.53,95%CI(1.08,5.93)]、长期吸烟[HR=2.37,95%CI(1.12,5.01)]、合并高血压[HR=5.42,95%CI(2.19,13.40)]、长期使用胰岛素[HR=2.73,95%CI(1.15,6.48)]及术后首次结肠镜检查间隔时间超过1年[HR=5.26,95%CI(1.84,15.08)]和肿瘤相关危险因素:原发结直肠癌为中低分化[HR=2.48,95%CI(1.20,5.11)]及原发结直肠癌伴有同时性高级别上皮内瘤变腺瘤[HR=4.36,95%CI(1.63,11.69)]的患者,其异时性结直肠腺瘤发生的风险明显增加。结论具有代谢相关危险因素和肿瘤相关危险因素的结直肠癌切除术后患者异时性结直肠腺瘤的发生风险明显增加,应增加结肠镜检查频率。
- 张江国汪之沫
- 关键词：结直肠肿瘤结肠镜检查
