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汪萍: 作品数：10 被引量：25H指数：4; 供职机构：南京军区南京总医院更多>>; 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省“135”工程重点医学人才基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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外源性人Id3基因表达对A549细胞生长功能影响的研究: 李晓军朱传东汪萍陈芳芳贾丽虞伟

外源性人Id3基因表达对A549细胞生长功能影响的研究: 目的研究外源性人细胞分化抑制因子3(hId3)基因表达在人肺腺癌细胞系A549细胞生长中的作用。方法采用脂质体介导的转染技术将含hId3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因的真核表达质粒pEGFP/hid3导入A54...; 李晓军朱传东汪萍陈芳芳贾丽虞伟; 文献传递

Verisyse虹膜固定型人工晶状体植入术后10年角膜内皮丢失影响因素分析被引量：1: 2021年; 目的观察高度近视患者Verisyse虹膜固定型人工晶状体(IOL)植入术后10年角膜内皮细胞计数(ECD)的变化,分析其丢失影响因素,并应用眼前节相干光层析成像术(AS-0CT)评估IOL在眼内的相对位置。方法回顾性分析2008年9月至2010年7月在我院行Verisyse IOL植入术的高度近视患者的临床资料。所有患者均于术前、术后10年进行眼科检查,术后10年应用AS-0CT测量IOL到周围组织的距离,多元线性回归分析术后10年角膜内皮细胞丢失率的影响因素。结果IOL前表面中央和边缘到角膜内皮的最短距离分别为(2.13±0.23)mm和(1.30±0.21)mm,IOL后表面到自然晶状体前表面的距离为(0.70±0.13)mm。Verisyse植入术后10年ECD丢失率为(11.56±12.01)%,多元线性回归提示IOL前表面中央和边缘到角膜内皮的最短距离为主要影响因素。结论Verisyse IOL植入术后10年内皮丢失与IOL前表面中央和边缘到角膜内皮的最短距离有关,建议长期随访中,要关注角膜内皮细胞丢失率及人工晶状体在前房的位置以评估其安全性。; 陈亦路戴伟陆燕王春红曹茜汪萍黄振平; 关键词：人工晶状体虹膜固定型

Id3-EGFP融合基因表达载体的构建及其在人肺癌细胞A549中的表达被引量：5: 2006年; 目的构建人分化抑制因子3(Id3)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因表达载体pEGFP/Id3,使Id3-EGFP融合蛋白在人肺癌细胞A549中得到表达。方法扩增并克隆人Id3cDNA,构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3。用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞,使Id3-EGFP融合蛋白在A549细胞得到表达。结果经转化细菌、抽提质粒、酶切鉴定和DNA序列分析证实,Id3基因已正确插入pEGFP-N1中EGFP基因的上游,获得融合基因表达载体pEGFP/Id3。利用脂质体转染技术将pEGFP和pEGFP/Id3转入A549细胞,24h后,在激光共聚焦荧光显微镜下可观察到表达EGFP的细胞发出绿色荧光,流式细胞术分析表明,转染48h时EGFP阳性表达细胞率最高,分别可达65·40%和60·50%。pEGFP/Id3转染的A549细胞S期细胞和G2期细胞比例均明显高于pEGFP转染细胞组和未转染细胞组,表明Id3基因的导入可诱导细胞从G1期向G2期发展,从而促进细胞增殖。结论真核表达载体pEGFP/Id3的成功构建及其在A549细胞中的表达,为研究Id3的细胞定位表达及Id3在细胞生长调控中的作用奠定了实验基础。; 李晓军汪萍贾丽马百坤夏欣一虞伟武建国; 关键词：分化抑制因子肺肿瘤重组融合蛋白

人精子蛋白SP22在睾丸、精子中的分布与定位: 2005年; 目的:以原核表达的人精子蛋白SP22制备其兔多克隆抗体,研究人精子蛋白SP22在人睾丸和精子中的分布与定位。方法:在E.Coli中诱导表达SP22基因,以纯化出的重组人精子蛋白htSP22为抗原制备兔抗人SP22多克隆抗体,运用免疫组织化学分析SP22在人睾丸和精子中的分布与定位。结果:表达出了分子量约22 000的重组htSP22蛋白,制备获得了能特异性识别睾丸、精子中天然SP22蛋白的兔抗人SP22多克隆抗体。免疫组织及细胞化学证明SP22存在于曲细精管中各类生精细胞及精子头部表面。结论:制备的抗体具有特异性,SP22存在于睾丸曲细精管中各类生精细胞及精子头部表面。; 宛传丹黄宇烽汪萍; 关键词：睾丸精子免疫组织化学

分化抑制因子3的表达调控机理及其功能被引量：4: 2008年; 分化抑制因子3(inhibitor of differentiation 3,Id3)属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录因子家族成员之一,该分子参与细胞周期调控过程,在细胞生长与发育、机体的生理及病理过程中发挥重要调控作用。其表达和功能涉及许多复杂的调控机制。; 李晓军汪萍贾丽; 关键词：信号转导

Id3-EGFP融合基因表达载体的构建及其在A549细胞中的表达: ＜正＞分化抑制因子,又称DNA结合抑制因子（inhibitors of differ- entiation／DNA binding,Id）,属于螺旋-环-螺旋（helix-loop-helix, HLH）转录因子家族成员...; 李晓军汪萍贾丽夏欣一马百坤虞伟; 关键词：肺癌基因表达载体细胞增殖; 文献传递

分化抑制因子基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达被引量：4: 2006年; 目的研究分化抑制因子(Id)基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达。方法提取血液病患者及正常人外周血单个核细胞、人Burk itt s B淋巴瘤细胞(Daud i)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)和人组织细胞性淋巴瘤细胞(U937)的细胞总RNA,根据Id1、Id2和Id3 cDNA全长序列合成三对引物,用RT-PCR方法对以上细胞中Id1、Id2和Id3 mRNA的表达进行半定量分析。结果Id(Id1、Id2、Id3)mRNA在Daud i、U937、Jurkat、K562以及血液病患者的淋巴细胞中均有不同程度的的表达;Id2在正常人淋巴细胞中普遍表达;Id1和Id3几乎不表达或表达水平极弱。结论不同的Id基因在不同分化阶段的淋巴细胞中有不同的表达水平,Id1、Id3的异常表达在淋巴细胞的分化、增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。; 汪萍李晓军黄宇烽贾丽马百坤杨家新; 关键词：RT-PCR 淋巴细胞肿瘤

人Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达及其对细胞生长的抑制被引量：8: 2008年; 目的:研究外源性分化抑制因子3(Inhibitor of differentiation 3,Id3)基因表达对人肺腺癌细胞系A549细胞生长的抑制作用。方法:构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3,采用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞。FCM分析转染细胞EGFP表达效率,荧光显微镜观察EGFP表达情况;半定量RT-PCR、免疫细胞化学分析转染后A549细胞Id3 mRNA和蛋白的表达。MTT法检测转染后A549细胞生长抑制情况,FCM分析A549细胞周期进程,Annexin V/7-AAD和Hoechst33258染色检测转染后细胞的凋亡情况。结果:成功构建人Id3与EGFP融合基因表达载体pEGFP/Id3;荧光显微镜和FCM观察到EGFP的有效表达,转染48～72 h时EGFP表达率最高;Id3 mRNA及蛋白在转染后的A549细胞中能有效表达。转染后48 h和72 h,pEGFP/Id3转染组A549细胞生长受到明显抑制(P<0.01);细胞周期分析表明,pEGFP/Id3转染组G_0/G_1期细胞显著高于对照组(P<0.05);Annexin V/7-AAD双染结果显示,pEGFP/Id3转染组细胞的早期凋亡率[(10.67±2.60)%]显著高于pEGFP组[(3.39±2.21)%]和未转染组[(2.35±0.95)%](P<0.05);Hoechst33258染色结果也证实pEGFP/Id3组A549细胞出现明显凋亡形态特征。结论:外源性Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达能抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。; 朱传东李晓军汪萍贾丽仲爱芳陈龙邦; 关键词：肺癌细胞增殖抑制凋亡

分化抑制因子Id2和Id3在肿瘤细胞中的表达被引量：12: 2007年; 目的:研究分化抑制因子(Id)基因家族在不同肿瘤细胞及健康人外周单个核细胞(PBMC)中的表达情况,为探讨Id基因与肿瘤生长的关系提供实验依据。方法:提取血液病患者和健康人PBMC、人Burk itt’s B淋巴瘤细胞(Daud i)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)、人组织细胞性淋巴瘤细胞(U937)、人前列腺癌细胞(PC-3)、人胃癌细胞(SGC)、人肺癌细胞(SPC),人卵巢癌细胞(COC2)的细胞总RNA,根据Id2和Id3 cDNA全长序列合成两对引物,运用RT-PCR方法,对以上细胞中Id2和Id3 mRNA的表达进行半定量分析。结果:不同的Id基因在不同人肿瘤细胞中的表达具有一定差异性:Id2在健康人PBMC和各类肿瘤细胞中均呈普遍表达趋势;Id3在健康人淋巴细胞中未见表达或表达水平极弱,而在不同肿瘤细胞中的表达有差异,Id3在PC-3中的表达最高,K562中最低。不同的Id基因在同种细胞中的表达的差异性也较大,Id2 mRNA的表达水平显著高于Id3mRNA的表达水平。Id2、Id3mRNA在血液病患者PBMC中均有不同程度的的表达。结论:不同的Id基因在不同的肿瘤细胞中有不同的表达水平,Id3的异常表达在肿瘤细胞增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。; 汪萍李晓军贾丽马百坤黄宇烽; 关键词：分化抑制因子逆转录聚合酶链反应血液病肿瘤细胞

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