洪献忠
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:遵义医学院附属口腔医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 变形链球菌表面蛋白抗原表位和霍乱毒素B亚单位嵌合表达质粒的构建及其表达
- 该课题旨在将变形链球菌表面蛋白PAc中富集T、B细胞表位的氨基端A区(PAc 39-477位氨基酸残基)及中央区P区(PAc 803-1210位氨基酸残基)的编码基因通过不同长度的连接肽与粘膜免疫佐剂CTB编码基因ctx...
- 洪献忠
- 关键词:表面蛋白霍乱毒素B亚单位表位连接肽原核表达载体
- 文献传递
- 变异链球菌表面蛋白PAc基因A区与霍乱毒素B亚单位融合基因植物表达载体的构建被引量:4
- 2011年
- 目的构建变异链球菌表面蛋白PAc A区与霍乱毒素B亚单位的植物表达载体,为可食嵌合体防龋疫苗的进一步研究提供实验基础。方法从中间载体pBPC55获得含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的片段,定向连接到植物双元表达载体pCAMBIA2301上,构建重组载体p2355;通过PCR扩增从重组质粒pEAC10中获得表面蛋白PAcA区与霍乱毒素B亚单位的融合基因pacA-ctxB,克隆至重组质粒p2355中,构建植物表达载体p2355-PAcA/CTB,电转化法导入根癌农杆菌EHA105。PCR及酶切鉴定。结果 PCR扩增得到了含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的1.1kb大小片段,经酶切鉴定,该片段已经插入到植物双元载体pCAMBIA2301中。PCR扩增得到了pacA-ctxB基因;构建的质粒p2355-PAcA/CTB经XhoⅠ和KpnⅠ双酶切及PCR检测,均得到1.7kb大小的片段,与预计的嵌合目的基因片段大小相同。结论成功构建pacA-ctxB融合基因的植物表达载体p2355-PAcA/CTB。
- 吴家媛马欣荣唐琳张绍伟管晓燕洪献忠吴志刚张剑梁文红刘建国
- 关键词:变异链球菌植物表达载体表面蛋白霍乱毒素B亚单位
- 变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合基因转基因黄瓜植株的获得及鉴定被引量:5
- 2016年
- 目的:经农杆菌介导将变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合基因导入黄瓜,获得转基因黄瓜植株,为转基因可食防龋疫苗的研究提供实验基础。方法:利用双元载体pCAMBIA2301构建变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合质粒(PAcA-ctxB)的植物表达载体p2355-PAcA-CTB;电转化法导入农杆菌EHA105;采用叶盘转化法转化黄瓜,转基因植物经过卡那霉素抗性筛选、GUS基因染色、PCR及Southern blot杂交分析检测目的基因鉴定。结果:成功得到转基因黄瓜植株,卡那霉素抗性筛选、GUS基因染色、PCR及Southern blot杂交分析检测证实目的基因PAcA-ctxB已整合至黄瓜基因组中。结论:获得了含有变异链球菌表面蛋白A区与霍乱毒素B亚单位嵌合基因的转基因黄瓜植株,为转基因可食防龋疫苗的进一步研究提供了实验基础。
- 吴家媛刘建国马欣荣洪献忠吴志刚张剑梁文红
- 关键词:变异链球菌霍乱毒素B亚单位
- 连接肽为五肽的PAc-A和CTB嵌合质粒的构建及表达
- 目的:通过五肽的连接肽构建含变形链球菌表面蛋白A区(PAc-A)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的嵌合表达质粒,并表达融合蛋白质,为下一步利用转基因植物技术生产可食嵌合体防龋疫苗的研究打下基础。方法:用PCR方法扩增pacA...
- 洪献忠刘建国吴志刚唐琳吴家媛
- 关键词:变形链球菌表面蛋白霍乱毒素B亚单位连接肽佐剂
- 文献传递