潘剑茹
- 作品数：50 被引量：87H指数：7
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学核科学技术更多>>
- GST-SOD1-X-R9融合蛋白及其制备方法与应用
- 本发明涉及融合蛋白领域，具体地提供一种GST‑SOD1‑X‑R9融合蛋白及其制备方法与应用，采用基因重组技术，根据Genbank中人铜锌超氧化物歧化酶的基因序列，融合连接肽X以及穿膜肽R9，得到SOD1‑X‑R9，将合成...
- 潘剑茹李玲玲
- 文献传递
- 一种当归蛋白在制备辅助肿瘤治疗药物中的应用
- 本发明涉及天然中药蛋白领域，更具体地涉及一种当归蛋白在制备辅助肿瘤治疗药物中的应用；所述当归蛋白N端序列为GIQKTEVEAPSTVSA。所述当归蛋白用于制备辅助肿瘤治疗药物，化疗前给予当归蛋白可以减轻化疗药物顺铂对小鼠...
- 潘剑茹王香玲
- 文献传递
- 当归生药中两种PR-10蛋白亚型的纯化与表征
- 2019年
- 为了进一步研究当归(Angelicasinensis)生药中的蛋白质及其功能,通过80%硫酸铵沉淀、Sephadex G-50凝胶过滤层析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析,首次从当归生药中纯化出两种分子量相近的蛋白(命名为ASPR-C-1和ASPR-C-2)。ASPR-C-1和ASPR-C-2在SDS-PAGE上的分子量分别为17.33 kDa和17.18 kDa,在溶液中主要以单体形式存在,但会部分形成二聚体,二者均为糖蛋白,糖基含量分别为2.6%和8.2%。经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF?)鉴定发现ASPR-C-1和ASPR-C-2均为病程相关(Pathogenesis-related 10,PR-10)家族蛋白,且具有核糖核酸酶活性,比活分别为73.60 U/mg和146.76 U/mg。两种蛋白的最适pH相近,均为5.6左右,但最适温度不同,ASPR-C-1的为50℃,ASPR-C-2的为60℃。二者虽然在60℃下都表现出最大的酶活力稳定性,但在更高的处理温度(80–100℃)下,ASPR-C-1迅速失活,最终仅余20%左右活力,ASPR-C-2则表现出良好的热稳定性,最终仍有80%左右活力。此外,Fe^(2+)对二者的酶活性具有激活作用,而Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Mn^(2+)、Ag^+、Cu^(2+)、EDTA、DTT和SDS则会不同程度地抑制二者的酶活性。研究结果为深入研究来自当归生药的PR-10蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 王香玲李娴何火聪李玲玲吕迪陈翠煌叶小强刘树滔潘剑茹
- 关键词：糖蛋白纯化核糖核酸酶
- GST-SOD1-R9融合蛋白的表达、纯化、稳定性与跨膜效应被引量：4
- 2017年
- 穿膜肽TAT介导的双效抗氧化酶GST(谷胱甘肽巯基转移酶)-TAT-SOD1(Cu,Zn超氧化物歧化酶),可有效清除胞内自由基,其预防氧化损伤的效果强于SOD1-TAT,但前者的跨膜能力不如后者。为增强双效抗氧化酶的跨膜效率,本研究融合了SOD1和穿膜肽R9,合成SOD1-R9全基因序列,并将其插入带有GST的原核表达载体pGEX-4T-1中,成功构建了GST-SOD1-R9融合蛋白表达质粒。然后,将重组质粒pGEX-4T-1-SOD1-R9转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达融合蛋白,通过改变诱导温度和诱导时间,确定了融合蛋白在25℃下表达11 h,可得到高表达量的可溶性GST-SOD1-R9融合蛋白。利用80%硫酸铵沉淀和GST琼脂糖树脂纯化得到纯蛋白,应用SDS-PAGE和酶活性鉴定纯化的蛋白为正确表达的目标蛋白。GST-SOD1-R9融合蛋白的温度和pH稳定性实验结果证实,该蛋白在生理条件下具有良好的SOD和GST活性。细胞跨膜实验结果证明其跨膜能力与GST-TAT-SOD1融合蛋白相比显著增强(P<0.05)。这些工作为深入研究GST-SOD1-R9的抗氧化损伤效应建立了基础。
- 潘剑茹吴伦巧何火聪陈莉娟苏颖李玲玲刘树滔
- 关键词：融合蛋白表达纯化稳定性
- 带前导肽的人锰超氧化物歧化酶抗顺铂诱导的肾损伤效应
- 2023年
- 目的 探讨前导肽的融合对人锰超氧化物歧化酶(SOD2)结构以及抗顺铂(DDP)诱导的肾损伤效应。方法 通过结构预测和SOD比活力测定分析线粒体靶向序列(MTS)对SOD2构效的影响;建立昆明(KM)小鼠DDP损伤模型,以阿米福汀(AMFT)为阳性对照,测定小鼠肾功能、肾脏指数、肾脏抗氧化能力,同时观察肾脏表观及病理变化,以评估MTS-SOD2抗DDP诱导的肾损伤效应。结果 MTS前导肽对SOD2的二三级结构有一定影响,但也使MTS-SOD2蛋白的比活力提高。预给予中剂量MTS-SOD2(0.84 mg/kg)可以使损伤鼠肾脏丙二醛(MDA)水平显著降低,SOD活力和总抗氧化能力(T-AOC)显著增加,进而减少肾脏病理损伤,维持肾功能,整体效果与200 mg/kg AMFT相当甚至优于后者。结论 MTS前导肽既增强了SOD2的活性,又使其因具有跨膜功能而发挥优异的抗DDP诱导的肾损伤效应。
- 潘剑茹韩亚南何夏琪叶小强何火聪
- 关键词：锰超氧化物歧化酶前导肽顺铂肾损伤
- TAT-ASPP2融合蛋白的制备及其对胶质瘤细胞增殖的抑制作用
- 2011年
- 目的:制备TAT-ASPP2融合蛋白,探讨其对人胶质瘤U-87MG细胞和U251细胞增殖的抑制作用。方法:设计TAT-ASPP2引物,应用IN-Fusion技术构建原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,双酶切、DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E.coliBL21,IPTG诱导TAT-ASPP2融合蛋白的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定TAT-ASPP2融合蛋白。MTT法检测TAT-AS-PP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的作用。结果:成功构建了原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,转化E.coli BL21后成功表达TAT-ASPP2融合蛋白,其相对分子质量约为128000,并可被ASPP2特异性抗体所识别。TAT-ASPP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的抑制率分别为(65.0±3.0)%和(64.7±2.5)%,而ASPP2蛋白则不能抑制U-87MG和U251细胞的增殖。结论:成功地克隆、表达及纯化TAT-ASPP2融合蛋白,该融合蛋白可抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 何火聪苏颖潘剑茹黄争荣
- 关键词：胶质瘤融合蛋白增殖
- 一种当归蛋白自组装颗粒及应用
- 本发明涉及天然中药蛋白领域，更具体地涉及一种当归蛋白（ASPR）及其蛋白自组装纳米颗粒，该蛋白N端序列为GIQKTEVEAPSTVSA。ASPR蛋白在pH 8.0下，经过100℃加热15min，可自组装形成纳米颗粒。通过...
- 潘剑茹李娴
- 文献传递
- 融合蛋白PTD-SOD对顺铂导致的肝脏损伤的保护效应被引量：1
- 2014年
- 建立了顺铂损伤的小鼠模型,通过测定小鼠的体重增长率、肝脏指数以及SOD活力等肝组织抗氧化指标,探讨在注射顺铂前后给予融合蛋白PTD-SOD对顺铂导致的肝脏损伤的保护效应.在注射顺铂后马上注射融合蛋白PTD-SOD的对顺铂导致的肝脏损伤保护效果最好.
- 梁丽丽潘剑茹林夏欢彭飞飞肖美瑜陈琳刘树滔
- 关键词：顺铂肝脏
- 当归蛋白对小鼠的辐射防护作用被引量：5
- 2018年
- 通过80%硫酸铵沉淀与Sephadex G-50凝胶过滤层析,从当归饮片中得到分子量为18.33 kDa的当归蛋白(命名AP)。用X射线对小鼠进行全身照射至吸收剂量6 Gy,建立急性照射损伤模型,以阿米福汀为对照,监测小鼠的体质量、外周血白细胞数、胸腺指数、脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)、脾脏表观、脾组织病理分析和脾脏抗氧化活力等指标,检验当归蛋白AP的辐射防护效应。结果表明,当归蛋白AP可使受照小鼠的外周血白细胞数量、胸腺指数、脾脏指数、CFU-S和脾脏的过氧化氢酶活力分别增加135%、103%、23%、219%和180%,改善脾白髓损伤,使其体质量下降率减少94%。结果提示,当归蛋白AP对小鼠具有辐射防护作用。
- 李娴王香玲何火聪李玲玲陈翠煌潘剑茹
- 关键词：X射线辐射防护小鼠
- 融合蛋白PTD-SOD对受紫外线照射豚鼠皮肤损伤的保护作用被引量：7
- 2010年
- 采用0.26×10-4W/cm2的紫外线(UVB)照射豚鼠背部皮肤,于照射后给予不同的融合蛋白(PTD-SOD1和PTD-SOD2)霜剂和野生型SOD霜剂涂抹受照部位皮肤,利用数码相机拍摄豚鼠背部皮肤颜色的变化情况,用Photoshop软件通过测量分析皮肤红斑度的变化来反映辐射损伤的程度,以探讨两种融合蛋白和野生型SOD对受照豚鼠的皮肤保护作用。结果表明,照射后立即给予PTD-SOD有较好的保护作用,其效果随给药剂量的增加而增加。PTD-SOD1蛋白对一次性UVB辐射损伤的保护作用最好,野生型SOD蛋白对一次性UVB辐射损伤也有保护作用,其效果与PTD-SOD2蛋白相当。
- 潘剑茹彭树美周静宏何火聪刘树滔饶平凡
- 关键词：UVB
