潘秀华
- 作品数:4 被引量:11H指数:2
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:武汉市科技攻关计划项目“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法
- 发明名称:一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法本发明属于食源性病原菌分子检测技术领域,具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、L...
- 栗绍文张超孟宪荣蔡旭旺潘秀华
- 文献传递
- 单核细胞增生李斯特菌胶体金免疫层析检测试纸条的制备
- 单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)在自然环境中分布广泛,容易污染动物性食品。污染的食品被人食用后可造成胃肠炎、脑膜炎、肺炎、败血病及孕妇流产等,造成严重的危害及高的病死率。因此,...
- 潘秀华
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体胶体金试纸条免疫磁珠
- 文献传递
- 一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法
- 本发明属于食源性病原菌分子检测技术领域,具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、LAMP检测的反应体系、显色溶剂和反应覆盖液。60℃温育5...
- 栗绍文张超孟宪荣蔡旭旺潘秀华
- 文献传递
- 单增李斯特菌胶体金免疫层析试纸条的研制被引量:9
- 2014年
- 目的以单增李斯特菌(LM)内化素A蛋白(InlA)单克隆抗体为基础,研制其胶体金免疫层析检测试纸条。方法采用DNAStar软件对LM inlA全长基因编码蛋白进行抗原表位分析,截取部分inlA基因片段构建原核表达质粒,诱导表达和纯化获得重组蛋白。以该蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高效分泌抗InlA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体;以双抗体夹心的原理研制胶体金免疫层析检测试纸条,并对其特异性、敏感性、稳定性进行评价。结果筛选到2株高效分泌抗InlA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,抗体属于IgG1亚类,小鼠腹水抗体效价为1∶64 000;研制的试纸条可与LM发生阳性反应,而与非LM李斯特菌、链球菌、鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌O157∶H7等食源性致病菌均不发生阳性反应;LM纯培养物敏感性为2.4×105cfu/ml,模拟猪肉样品敏感性为4.0×106cfu/ml;4℃保存期可达16周以上。结论研制的胶体金免疫层析试纸条具有快速、特异、敏感等优点,可以用于样品中LM的快速检测。
- 潘秀华孟宪荣栗绍文张超谢世琦闫少侠蔡旭旺
- 关键词:单增李斯特菌单克隆抗体食源性致病菌