王凤龙
- 作品数：114 被引量：237H指数：7
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金北京市农林科学院青年基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- TNF-α对培养奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响
- 【目的】研究肿瘤坏死因子-α对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响,从细胞凋亡的角度为乳房炎的防治提供可靠的理论根据和重要的实验依据。【方法】以0.1ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL...
- 吴娟王申元王凤龙
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α凋亡乳腺上皮细胞
- 文献传递
- 山西黄土高原地区羊消化道蠕虫感染现状与防治对策
- 2010年
- 对山西黄土高原地区羊消化道主要寄生虫进行了调查,调查结果表明:在该地区,消化道寄生虫感染率最高可达100%,且常为数种寄生虫混合感染,有的虫种感染强度最高达8 000条/只。依据此次寄生虫病调查结果有针对性地对寄生虫病流行特点和防治现状进行分析,提出了加强羊群寄生虫病控制的综合性防治措施。
- 王瑞丁玉林王仲兵杜长春王金玲刘兴国焦光月郭彦王凤龙杨晓野
- 关键词：寄生虫消化道
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒BJBLZ株序列剖析被引量：2
- 2011年
- 预测与分析HP-PRRSV BJBLZ株序列特点,为进一步该毒株的研究做准备。利用分子生物学软件及服务器,对HP-PRRSV BJBLZ株全序列及各结构蛋白的生化特性、溶解性和核定位信号等进行了分析,结果显示HP-PRRSV BJBLZ株至少可划分12个非结构蛋白和6个结构蛋白;同源性比较显示GP3和GP5蛋白变异性高,M和N蛋白保守。GP3、GP5和M蛋白糖基化位点与参考株有变化,GP2、GP4和N蛋白糖基化位点与所有参考株一致。服务器预测显示,N蛋白的碱性氨基酸比例明显高于其他蛋白,总平均亲水值明显低于其他蛋白;GP2、GP3和GP4蛋白不稳定,GP5、M和N蛋白稳定。6个结构蛋白预测不溶性概率均占66%以上,GP3不溶性概率最高。可以利用以上一些不同于以往各代表株的特点,为PRRS的诊断和防治进行进一步的研究。
- 刘永宏赵丽刘俊峰王凤龙刘月焕
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征
- 鸡包涵体性肝炎肿瘤坏死因子α基因mRNA表达的研究
- 应用分子克隆获得的鸡肿瘤坏死因子α基因片段,通过地高辛标记制备DNA核酸探针,核酸原位杂交检测鸡包涵体肝炎病毒Hb株在感染鸡组织细胞的肿瘤坏死因子α mRNA的表达水平,结果表明,Hb株感染雏鸡后,在肝脏、脾脏、胸腺、法...
- 王凤龙葛金英
- 关键词：肿瘤坏死因子Α包涵体肝炎核酸探针原位杂交
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒强毒株gag和gp45基因的体内进化分析
- 2012年
- 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)强毒株体内进化规律,将3匹马分别以1×105 TCID50/匹接种EIAVLN40强毒株后,在不同时间点采取外周血,分离单核白细胞。提取白细胞中的DNA,并以其为模板,应用套式PCR技术分别扩增EIAV前病毒DNA的p15,p9和gp45基因,经克隆后进行序列分析。结果显示,与接种前EIAVLN40相比较,p15基因核苷酸和氨基酸平均差异率分别为1.8%(0～2.9%)和1.7%(0～3.6%);p9分别为2.5%(0.3%～3.8%)和2.9%(0～4.8%);gp45-Ⅰ分别为1.3%(0.3%～2.1%)和1.8%(0～3.2%),gp45-Ⅱ分别为2.1%(0～3.4%)和2.6%(0～4.7%)。在EIA发热期,每个基因核苷酸和氨基酸差异率最小;在亚临床阶段,每个基因平均差异率总体上相对较高。氨基酸变异位点分析发现,发病期(2-2、3-1)各基因氨基酸序列回复到亲本株EIAVLN40,其余时期p15基因氨基酸稳定变异位点16N/S、88T/S和112M/E;p9基因115E/G和122K/M;gp45-Ⅰ基因9T/F/L;gp45-Ⅱ基因21E/K和29G/S。此外,p15基因进化树结果显示,发热期(2-2、3-1)p15基因序列与EIAVLN40序列处于同一分支上,亚临床阶段大多数p15基因序列处于另一个大分支上;其他基因进化情况与p15基因类似。对EIAV p15、p9、gp45基因体内进化分析,有助于对EIAV在马体内感染进程的研究,为进一步研究EIAV持续感染和逃避免疫监视的机制提供参考。
- 刘强王雪峰王珊珊韦华冕杜承林跃智马建周建华王凤龙
- 关键词：马传染性贫血病毒P15基因
- 含有TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁对奶牛乳腺上皮细胞凋亡影响
- 本研究探讨含有TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁对奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响.经奶牛乳腺上皮细胞体外培养后,用含有不同浓度的TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁作用,分别于不同时间用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果表明,体外培养奶牛乳腺上...
- 杨磊王凤龙
- 关键词：肿瘤坏死因子奶牛上皮细胞凋亡
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在自然病例组织中的定位(英文)被引量：15
- 2009年
- 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起，以怀孕母猪发生流产、早产和死胎等严重的繁殖障碍及仔猪和育肥猪发生呼吸道疾病为主要症状的传染病，是一种免疫抑制性疾病。猪感染PRRSV后的组织学病理变化主要集中在肺脏和淋巴结等器官；急性PRRS表现为败血症，全身性巨噬细胞和血管内皮细胞肿大、活化或增生，间质性肺炎，
- 刘永宏赵丽韩春华王凤龙刘月焕林健杨汉春郭鑫李栋梁韦海涛祝俊杰赵景义赵振华马明杨龙峰王金玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒自然病例高致病性免疫抑制性疾病PRRSV
- H3N8亚型马流感病毒人工感染马的病理学观察及抗原定位被引量：1
- 2010年
- 为验证鸡胚传代对H3N8亚型马流感病毒致病性的影响,利用F3代马流感病毒经鼻腔感染2匹蒙古马,应用苏木素-伊红染色和免疫组织化学染色方法,对1例临床症状明显的马进行了病理组织学观察和抗原定位。结果表明,该人工感染马镜检病变明显,鼻黏膜、气管、肺、心肌、肝、肾和脾等组织器官均出现不同程度的充血、淤血、水肿,并伴以各实质细胞的变性、坏死以及炎性细胞的渗出和增生。其中呼吸系统病变最为严重,肺表现为支气管性间质性肺炎。免疫组织化学染色结果显示,病毒抗原主要存在于呼吸系统的黏膜上皮组织中,初步证明了马流感病毒F3代对马具有致病性。
- 丁旭娜刘月焕王凤龙林健韩春华刘永宏
- 关键词：马流感病理组织学观察免疫组织化学抗原定位
- 分泌抗重金属铜抗体的杂交瘤细胞克隆方法的建立
- 2011年
- 为了建立有效地克隆分泌抗铜抗体杂交瘤细胞的方法,试验用不同浓度的甲基纤维素半固体培养基法培养杂交瘤细胞。结果表明:培养杂交瘤细胞的甲基纤维素最佳浓度为1.6%;获得多株阳性细胞,其中阳性细胞株3B1-C5的染色体数在100个以上,腹水抗体效价达到1∶102 400,其分泌的抗体属IgM亚类,轻链为Kappa型;经间接ELISA方法检测,连续培养单细胞系93 d,3B1-C5细胞株能较稳定分泌抗体。说明含1.6%甲基纤维素的半固体培养法适合克隆分泌抗铜抗体的杂交瘤细胞。
- 赵丽王凤龙杨慧李鹏刘满杏李霞
- 关键词：铜杂交瘤细胞甲基纤维素克隆抗体
- 大肠杆菌及脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞基质金属蛋白酶表达的影响
- 2022年
- 为研究大肠杆菌(E.coli)及脂多糖(LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,以及MMPs与基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)系统在调控细胞外基质(ECM)代谢中的作用,分别以106 CFU/mL热灭活E.coli菌液、7.5μg/mL LPS以及E.coli菌液与LPS混合液作用于体外培养的BMECs,分别在作用细胞6、12、24、48 h后提取细胞总RNA和总蛋白,通过qPCR、Western blot检测MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、uPA、uPAR、PAI-1 mRNA转录水平和相应蛋白表达水平,并通过明胶酶谱试验检测细胞上清液中MMP-2和MMP-9蛋白活性。结果显示:E.coli菌液和LPS作用于BMECs后,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、uPA、uPAR、PAI-1 mRNA转录水平和相应蛋白表达水平均有不同程度上升。MMP-2、TIMP-1、uPA、uPAR、PAI-1 mRNA转录水平在菌液作用后显著上升,MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-2、uPAR mRNA转录水平在菌液与LPS联合作用后显著上升;MMP-9、MMP-13、TIMP-2蛋白表达水平在LPS作用后显著上升;TIMP-1、uPA、uPAR蛋白表达水平在菌液作用后显著上升;MMP-9、MMP-13、uPA、uPAR蛋白表达水平在菌液与LPS联合作用后显著上升。3个作用组MMP-2蛋白活性在不同时间均显著上升;菌液、菌液与LPS联合作用12 h时MMP-9蛋白活性显著上升。结果表明,热灭活E.coli菌液和LPS可诱导BMECs中MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、uPA、uPAR和PAI-1的表达,并激活uPA系统参与调控MMPs的表达。本试验初步探究了大肠杆菌感染奶牛乳腺组织导致乳腺纤维化的发病机理,为奶牛乳腺炎和乳腺纤维化药物研究提供了依据。
- 张媛媛丁玉林刘雅鑫李晓华高琼王凤龙
- 关键词：大肠杆菌LPS乳腺上皮细胞基质金属蛋白酶
