王敏
- 作品数：27 被引量：85H指数：6
- 供职机构：北京农业生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市科委重大项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 低温沼气发酵微生物区系的筛选及其宏基因组文库构建被引量：12
- 2010年
- 从四川、浙江、山西、北京等地采集冬季产气良好户用沼气池及沼气工程中的沼液样品作为微生物接种源,在实验室条件下进行了500ml反应器的梯度降温模拟沼气发酵试验,筛选出5个在21℃、18℃和15℃等不同温度下均可正常产气的沼液样品Z-2、Z-3、Z-6、Z-8和Z-10,选取其中3个产气量较高的沼液样品Z-3、Z-6和Z-10作为接种源,进一步建立了2500ml反应器实验室模拟15℃低温沼气发酵系统,经过连续传代筛选获得一个在15℃低温下产气量较高且稳定的沼气发酵系统Z-6,产气率达到0.15m3/m3d。提取该系统内沼气发酵微生物宏基因组DNA,以pBluescriptSK(+)质粒为载体成功构建了约10000个克隆的沼气发酵微生物宏基因组质粒文库。随机分析文库中的克隆结果表明,该文库的外源片段平均长度约为5kb,文库总容量为48Mb,插入片段带型多样性较高。该文库的建立为沼气发酵过程中水解酶基因资源的挖掘利用奠定了基础。
- 成晓杰仇天雷王敏张姝蔡金国高俊莲
- 关键词：宏基因组文库
- 一种酯酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种酯酶及其编码基因与应用。本发明所提供的酯酶，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添...
- 高俊莲王敏成晓杰刘华伟程敏张姝
- 无草炭型基质及其应用
- 本发明提供一种新型的无草炭型基质及其应用。所述无草炭型基质是由蛭石、珍珠岩以及经过高压蒸汽爆破处理的菌糠腐熟物复配而成。可广泛应用于蔬菜、瓜果类以及花卉的育苗和栽培中。本发明采用高压蒸汽爆破处理菌糠，既解决了菌糠基质保水...
- 孙晓红韩梅琳夏琳王敏
- 文献传递
- 北京地区重金属污染土壤DNA提取及宏基因组文库构建
- 土壤重金属污染已成为全球关注的环境问题之一。重金属污染不仅使农田土壤肥力退化,农产品的产量和品质降低,而且促使水环境恶化,并且通过食物链最终危及人类的生命健康。北京东南郊污灌区曾是全国五大污灌区之一,据报道部分地区存在土...
- 牛泽曾艳王敏杨慧马荣才高俊莲
- 关键词：宏基因组文库生物修复
- 文献传递
- 一株产共轭亚油酸瘤胃细菌Streptococcus infantarius RB111的筛选与鉴定被引量：4
- 2011年
- 从内蒙古鄂尔多斯山羊瘤胃中分离筛选到1株产共轭亚油酸的瘤胃细菌RB111,该菌株的cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA总产量为269.2 mg/L,其中cis9,trans11-CLA占52.64%,trans10,cis12-CLA占47.36%。对菌株RB111进行了形态学观察、生理生化鉴定、脂肪酸组成分析以及16S rRNA基因序列分析。16S rRNA基因序列分析结果表明该菌株与婴儿链球菌(Streptococcus infantarius)的模式菌株NCDO 599的序列相似性为99%,该菌株的形态特征及生理生化特性与文献报道的Streptococcus infantarius一致。脂肪酸组成分析结果显示,菌株RB111的细胞脂肪酸主要成分是C16:0、C18:1ω9c和C18:0,3种脂肪酸占脂肪酸总量的60.64%。综合以上结果,菌株RB111被鉴定为婴儿链球菌Streptococcus infantarius。
- 黄翠丽王敏成晓杰程敏仇天雷宫春波陈强高俊莲
- 关键词：共轭亚油酸瘤胃细菌气相色谱
- 一株高抗汞细菌的分离鉴定及其抗性基因的克隆与表达被引量：9
- 2009年
- 【目的】本研究旨在从重金属汞抗性细菌中分离鉴定汞抗性基因【方法】从北京凉水河河床底泥中分离抗汞细菌,采用16SrRNA基因序列分析结合生理生化特征对菌株进行鉴定。根据GenBank中已发表的多种抗汞细菌的merA基因序列设计引物,以抗性细菌基因组DNA为模板,扩增merA基因,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)表达。同时对表达菌株的重金属汞抗性进行测定。【结果】分离得到一株能在含HgCl2为70mg/L的平板上生长良好的高抗汞细菌,编号为KHg2。16S rRNA基因序列分析结果表明,菌株KHg2与Bacillus silvestris的模式菌株DSM12223T有96%的同源性,其形态特征及生理生化特性与文献报道的Bacillus silvestris一致。从菌株KHg2中扩增得到1687bp DNA片断,其序列与Pseudomonas putida的merA基因序列同源性达到99%,将该DNA片断克隆于pET-30a(+)得到重组质粒pZY2,转化宿主菌获得表达菌株E.coliBL21(DE3).pZY2,经IPTG诱导后产生相对分子量约为33KD的蛋白。重金属汞抗性测定结果表明,表达菌株E.coliBL21(DE3).pZY2可以在含HgCl2为20mg/L的培养基中生长,而转入空载体pET-30a(+)的阴性对照菌株E.coliBL21(DE3)pET-30a(+)则不能在含HgCl2为20mg/L的培养基中生长。【结论】分离的抗汞菌株KHg2与Bacillus silvestris关系密切;从菌株KHg2中克隆到汞抗性基因merA,并在大肠杆菌中得到了成功表达;表达merA基因的大肠杆菌具有抗重金属汞的特性。
- 曾艳陈强王敏孙建光高俊莲
- 关键词：重金属污染土壤RRNA基因序列分析
- HrpNEcc蛋白农药的中试生产条件和药效研究被引量：5
- 2008年
- 将自行分离得到的HarpinEcc基因在大肠杆菌BL21中进行了表达,通过基因工程菌培养基配方的筛选实验,得到国产LB＋M9培养基为最适培养基;进行了7、80、250 L发酵罐的逐级放大实验,均得到1 g/L以上稳定的HrpNEcc蛋白表达量,为该蛋白质国产化、工业化发酵生产提供了坚实的中试依据;使用HrpNEcc干粉制剂处理6～8叶的大白菜幼苗、大白菜、紫甘蓝、马铃薯、胡萝卜、冬瓜、菊花和马蹄莲等蔬菜和花卉,观察了综合防病效果,均获得了较好的防治软腐病的效果.
- 孙晓红王敏邢仁昌高俊莲马荣才
- 关键词：生物农药软腐病
- 一株产共轭亚油酸的菌株及其应用
- 本发明公开了一株产共轭亚油酸的菌株及其应用。本发明提供的婴儿链球菌(Streptococcus infantarius)RB111，其保藏号为CGMCC No.4426。本发明还提供了一种制备共轭亚油酸的方法，包括如下步...
- 高俊莲王敏黄翠丽陈强程敏成晓杰
- 文献传递
- 一种双孢菇覆土材料及其生产方法
- 本发明涉及一种双孢菇覆土材料及其生产方法。该双孢菇覆土材料由菌糠腐熟物、泥炭或普通土、石灰粉与多菌灵组成。本覆土材料制作简单、成本低廉、具有良好的透气性、吸水性和保水性且营养丰富，不仅充分利用了菌糠废料而且减少了泥炭的使...
- 孙晓红韩梅琳王敏张海萍刘洋
- 文献传递
- 基因重组大肠杆菌表达HrpNEcc蛋白的发酵条件及诱导条件优化被引量：13
- 2009年
- 对已构建好的表达HrpNEcc蛋白的工程菌BL21(DE3)/pET30a(+)hrpNEcc的摇瓶发酵条件及乳糖诱导进行优化,通过在7L发酵罐中放大发酵实验,以期提高蛋白产量并降低生产成本。在摇瓶中优化的发酵及诱导条件是:5%的接种量,TB培养基,菌体培养至对数生长前期,添加3g/L外源诱导剂乳糖时,HrpNEcc蛋白产量可达417.60mg/L,比不添加乳糖时提高了36.73%,比用IPTG诱导时提高了16.85%。7L发酵罐中发酵,获得菌体湿重达到57.24g/L(WCW),可溶性HrpNEcc蛋白产量占细胞总蛋白的50.2%,为3.29 g/L。
- 张姝王敏韩梅琳马荣才陈强高俊莲
- 关键词：重组大肠杆菌
