王新军
- 作品数：23 被引量：230H指数：7
- 供职机构：滨州医学院附属滨州市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省重点学科建设基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 牛黄千金散对中枢的抑制作用被引量：3
- 1999年
- 目的探讨牛黄千金散对中枢的抑制作用。方法给小白鼠灌胃牛黄千金散 ,分别采用苯甲酸钠咖啡因和电刺激引起惊厥 ,观察牛黄千金散的对抗作用 ;加用戊巴比妥钠给小白鼠灌胃 ,药后15min内观察翻正反射消失作为催眠指标 ;加用可待因给小白鼠灌胃 ,用扭体法观察小白鼠的镇痛作用 ;牛黄千金散小白鼠灌胃 ,用抖笼法观察对小白鼠自发活动的影响。结果牛黄千金散对药物和电刺激引起的惊厥均有对抗作用 ,并能加强戊巴比妥钠的催眠作用 ;加强可待因的镇痛作用 ;对小白鼠自发活动也有一定的抑制作用 ,与生理盐水对照组比较有非常显著的差异(P<0.01)。结论牛黄千金散有明显的中枢抑制作用。
- 徐庆荣李娜许勇刘卫东田春林王新军
- 关键词：牛黄千金散抗惊厥催眠镇痛中药动物实验
- 人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因重组腺病毒载体的构建及表达被引量：4
- 2005年
- 目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因腺病毒载体,并在真核细胞表达。方法用PCR法,扩增出HPV11E7基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体形成重组质粒TOPO-E7。TOPO-E7与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DESTTM重组反应,E7基因被重组到腺病毒载体上。该载体经PacI酶切,脂质体法转染人胚肾293A细胞,获得重组腺病毒载体pAD-E7。pAD-E7转染人HaCaT细胞,激光共聚焦显微镜分析E7蛋白表达情况。结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒TOPO-E7成功构建。重组子pAD-E7转染293A细胞后,获得滴度为1.4×107pfu/mL的重组腺病毒载体。该载体转染HaCaT细胞,48h后激光共聚焦显微镜下可见细胞内E7蛋白表达。结论重组腺病毒载体能有效介导HPV11E7基因在真核细胞的表达。
- 王飞毕志刚李光富吴海玮王群刘丰王新军张兆松
- 关键词：人乳头瘤病毒11型基因重组腺病毒载体HPV11真核细胞表达脂质体法人胚肾
- 人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因的克隆和表达被引量：2
- 2004年
- 目的从尖锐湿疣皮损标本中扩增出人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定。方法用PCR法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV11E7蛋白基因,与pGEX-6P-1载体连接成重组表达质粒pGEX-6P-1/E7;重组质粒转入BL21大肠杆菌,经诱导表达融合蛋白GST-E7;该蛋白经剪刀酶切除GST,GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测鉴定。结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pGEX-6P-1/E7成功构建,诱导后高表达GST-E7融合蛋白并得到纯化,蛋白质印迹证实表达蛋白为E7蛋白。结论获得高表达、高纯度的HPV11E7蛋白,为该蛋白的功能及免疫学分析及尖锐湿疣疫苗研究打下了基础。
- 王飞毕志刚王群李光富王新军张兆松
- 关键词：人乳头瘤病毒11型基因克隆基因表达人乳头瘤病毒感染尖锐湿疣
- 人乳头瘤病毒11型E6基因与人IFN-α2b融合基因原核表达质粒的构建与鉴定
- 2005年
- 目的构建HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体,为进一步原核表达奠定基础。方法在IFNα2b的起始密码子之前加入ccatggct,同时以编码(GGSGS)3的45个碱基序列取代其终止密码子,将改造后的人IFNα2b基因人工合成,然后将其装入质粒pET32a的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间;PCR扩增HPV11E6基因片段。将含有IFNα2b基因片段的质粒pET32a和含有BamHⅠ,EcoRⅠ酶切位点的HPV11E6同时用BamHⅠ,EcoRⅠ酶切,将酶切产物纯化回收后做连接反应,连接产物常规转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定,同时将挑选的阳性克隆菌液送公司测序。结果测序结果表明成功的将HPV11E6和人IFNα2b通过连接肽(GGSGS)3连接并装入pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,且基因序列与设计完全一致。结论HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体的成功构建,为进一步原核表达奠定了基础。
- 相文忠王飞李光富王新军刘丰王群张兆松毕志刚
- 关键词：人乳头瘤病毒E6基因IFNΑ-2B融合基因
- 美国糖尿病学会2010年糖尿病诊疗标准实施纲要被引量：7
- 2010年
- 王新军于文译
- 关键词：诊疗标准OGTT试验无水葡萄糖空腹血糖GSP认证2小时血糖
- 日本血吸虫22.6kDa抗原T细胞表位的重组、表达及初步鉴定被引量：12
- 2003年
- 目的 鉴定日本血吸虫中国大陆株 2 2 .6kDa抗原 (Sj2 2 .6 )的T细胞表位。 方法 用计算机软件预测Sj2 2 .6分子的T细胞表位 ,设计并合成其编码核苷酸 ,定向克隆入融合表达载体pET 32c( + ) ,转化大肠杆菌BL2 1感受态细胞 ,经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达 ,表达产物用NTA柱纯化。用纯化后的表位肽融合蛋白体外刺激C3H小鼠脾单个核细胞 ,3 H TdR掺入法检测其增殖。 结果 用计算机软件预测获得Sj2 2 .6抗原的 4个候选表位肽 ,并成功克隆入pET 32c( + )。其重组体均可表达分子量约 2 0kDa的融合蛋白 ,用NTA柱纯化后经 1 2 %聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示单一条带。其中P4、P5、P6融合蛋白能有效刺激小鼠脾单个核细胞增殖。 结论 从Sj2 2 .6抗原中初步鉴定出P4、P5、P6
- 王新军张兆松李光富王勇刘丰季旻珺朱翔蔡晓萍吴观陵
- 关键词：日本血吸虫T细胞表位血吸虫病克隆
- 血管紧张素受体阻滞剂类药物增加癌症的风险
- 2010年
- 血管紧张素受体阻滞剂（ARB）目前广泛用于治疗高血压、心力衰竭、糖尿病肾病及降低心血管疾病的风险。但美国Sipahi等人对随机对照试验进行的荟萃分析显示，ARB与新发癌症的风险增加相关。相关结果发表在2010年7月出版的《柳叶刀肿瘤学》杂志上（Lancet Oncol，2010，11：627—636．）。
- 王新军邱卫海
- 关键词：血管紧张素受体阻滞剂癌症类药物随机对照试验心血管疾病糖尿病肾病
- 日本血吸虫抗原T细胞表位的筛选与鉴定
- 该研究运用生物信息学方法分析和预测日本血吸虫线粒体相关蛋白(Sj338)、22.6 kDa膜相关抗原(Sj22.6)、磷酸丙糖异构酶(SjTPI)和97 kDa副肌球蛋白(Si97)的T细胞表位,设计并合成候选表位的编码...
- 王新军
- 关键词：日本血吸虫表位线粒体相关蛋白磷酸丙糖异构酶副肌球蛋白
- 文献传递
- CpG寡核苷酸的筛选及其对rSj28GST的免疫佐剂作用被引量：6
- 2004年
- 目的 研究 Cp G寡核苷酸 (Cp G ODN)对日本血吸虫重组 2 8k Da GST(r Sj2 8GST)抗原分子的免疫佐剂作用和诱导 Th1型反应的效应。方法 用淋巴细胞增殖试验筛选对鼠有良好免疫刺激作用的 Cp G ODN;用基因工程方法生产 r Sj2 8GST抗原分子 ;EL ISA检测小鼠抗 r Sj2 8GST的同型抗体 Ig G1 、Ig G2 a水平。结果 筛选出的 Cp G ODN如 182 6、2 0 0 2、182 6 4、2 10 2等具有良好的免疫刺激活性 ,其 SI>2 ;纯化的 r Sj2 8GST抗原分子 ,呈单一电泳条带 ;以 Cp G ODN为 r Sj2 8GST免疫佐剂 ,其免疫小鼠产生的抗体滴度显著高于对照组 ,且同型抗体 Ig G2 a与 Ig G1 比值也明显升高。结论 Cp G ODN182 6 4是一种良好的免疫佐剂 ,并可显著诱导
- 李光富张兆松朱鸿飞王勇朱翔王新军季旻珺刘丰蔡晓萍吴海玮吴观陵
- 关键词：CPG寡核苷酸日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶免疫佐剂
- 趋化因子在日本血吸虫感染模型中的表达特征被引量：1
- 2003年
- 目的 研究日本血吸虫感染模型中趋化因子(chemokine)在CD_4^+T细胞中的表达概貌,并探讨其与Th细胞极化和免疫病理的相关性。方法 采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)技术,从基因水平获得日本血吸虫不同感染时期CD_4^+T细胞表达的趋化因子概貌,并用反转录PCR(RT-PCR)凝胶成像半定量技术验证嗜酸性粒细胞趋化因子(ECF-L)的表达水平。同时观察趋化因子表达与病理的的关联。结果 日本血吸虫虫卵沉积前,MIG、RANTES明显增强;感染6周IP-10、MIP-2、MIP-1α、MIP-1β、ECF-L升高,持续到感染13周;GRO、Lymphotactin、MCP-1、RANTES在感染13周显著增强。RT-PCR半定量验证ECF-L表达模式与基因芯片结论一致。结论 日本血吸虫人工感染小鼠的CD_4^+T细胞表达大量趋化因子,它们共同参与Th1/Th2免疫应答,影响免疫病理状态;改变趋化因子格局可能影响疾病的自然转归。
- 蔡晓萍季旻珺李光富苏川朱翔王新军张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫CD4^+T细胞趋化因子基因芯片RT-PCR
