王永谦
- 作品数：7 被引量：52H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 霍乱灭活口服疫苗效力的测定方法及检测试剂盒
- 本发明公开一种用于检测霍乱灭活口服疫苗效力的检测方法，和这种检测方法使用的检测试剂盒。本发明的方法是分别从霍乱弧菌O1菌群和O139菌型提取脂多糖，以O1菌群和O139菌群的脂多糖为抗原，或者以抗O1LPS、O139LP...
- 李生迪陈翠萍朱卫华宣俊文王永谦
- 文献传递
- b型流感嗜血杆菌结合疫苗的制备及免疫学特性被引量：8
- 2000年
- 目的制备ｂ型流感嗜血杆菌结合疫苗，观察免疫学特性。方法通过已二酸二肼（ＡＤＨ），将纯 化的荚膜多糖抗原与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备ｂ型流感嗜血杆菌结合物。以２．５μｇ多糖或含２．５μｇ 多糖结合物经皮下免疫ＮＩＨ雌性小鼠，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＰＲＰ抗体及Ｔ抗体水平。结果用本实验方法提 取的多糖、合成的多糖衍生物、多糖－蛋白结合物都具有ｂ型流感嗜血杆菌的抗原特异性，其化学组成及结构特性 与国外文献报道结果基本一致。单独用多糖免疫小鼠未能诱导高水平的血清ＰＲＰ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱 导出高水平的血清ＰＲＰ抗体及ＴＴ抗体，并存在免疫记忆性。结论本实验为进一步临床评价结合物的体内保护 性效果提供了实验基础。
- 靳志刚杨辉田玉珍谭小梅蒲江张谦沈玉霖王永谦谢贵林王秉瑞李凤祥何莉袁曾麟
- 关键词：B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫学
- Hib流行病学的研究状况及方法被引量：5
- 2000年
- Hib主要在儿童中引起侵袭性疾病 ,发达国家已积累了大量的Hib疾病的流行病学资料 ,但大多数发展中国家在这方面的工作并不足以描述Hib在该地区的流行状况。本文综述了不同地区Hib流行病学的研究状况及特点 ,并对其研究方法作了概述。
- 王永谦王秉瑞
- 关键词：B型流感嗜血杆菌流行病学
- 工程菌种子制备方法对rEPA表达量影响的研究
- 2006年
- 由重组E.colirPE553D所表达的基因缺失突变脱毒的重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA),目前大量以载体蛋白用于多种细菌多糖蛋白结合疫苗研究。rEPA的表达量受众多因素的影响,种子的制备方式就是重要因素之一。本文用长期冷冻保存的和新鲜提取的质粒分别转化宿主菌E.coliBL21(λDE3)后制备种子,并将它们和冻干保存的E.colirPE553D在相同条件下培养和诱导,经SDS-PAGE分析表明长期保存的质粒转化宿主后的重组工程菌生长速度较慢,但rEPA的表达量和新鲜质粒转化制备的工程菌基本相同,而冻干保存的工程菌E.colirPE553D几乎丧失了表达rEPA的能力。
- 王永谦赵志强宣俊文谢贵林王燕杜琳
- 关键词：表达量工程菌
- IgY抗体在体外和体内对幽门螺杆菌作用的研究被引量：39
- 2002年
- 目的 通过口服IgY抗体制剂中和幽门螺杆菌 (Hp)的毒性蛋白 ,以达到根除Hp感染的目的。方法 将空泡毒素基因阳性Hp株培养后 ,用超滤浓缩的上清和超声破碎的菌体蛋白免疫产蛋母鸡 ,从鸡蛋中提取 2种IgY抗体 ,用MTT法进行IgY抗体对Hp毒素细胞毒活性的中和作用试验 ,将此 2种IgY抗体间隔 2d分 3次口服已感染Hp的小鼠 ,2、4、6、8周后分批处死小鼠 ,进行细菌培养、尿素酶试验和病理检查。结果 2种IgY抗体分别能够中和培养上清和菌体蛋白诱导的Vero细胞毒活性。感染小鼠经治疗后细菌培养阴转率分别达 6 6 .7%、10 0 %、10 0 %、10 0 %。病理切片显示 ,炎症明显减轻甚至消失。
- 陈翠萍杨朝晖王永谦
- 关键词：幽门螺杆菌IGY抗体细胞毒性胃疾病药物
- 重组铜绿假单胞菌外毒素A工程菌发酵及表达产物的纯化被引量：2
- 2006年
- 目的建立稳定、高效表达重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)的工程菌发酵及表达产物纯化工艺。方法规模化发酵表达rEPA的重组大肠杆菌rPE553D,离心收集菌体,渗透压调解使菌体周质间隙蛋白释放后,高速离心收集蛋白溶液。经DEAESepharoseFF、PhenylSepharose6FF疏水层析和SOURCE30Q强离子交换层析,超滤浓缩纯化rEPA。用HPLC、SDS-PAGE和Westernblot等方法检定生化和免疫学特性,并用小鼠和Vero细胞检定毒性。结果每55L培养基中rEPA产量超过4g,纯度在95%以上,细胞毒性降低了至少32000倍。其余各项指标均符合《中国生物制品规程》要求。结论已建立了收率高、纯度好、稳定、适合规模化生产rEPA的工艺。
- 赵志强杜琳谭小梅杜送田王永谦蒋奕王燕谢贵林
- 关键词：铜绿假单胞菌外毒素A工程菌
- O1/O139新型霍乱疫苗口服免疫动物后的自动免疫保护及被动保护试验研究
- 2003年
- O1/O139霍乱口服疫苗是一种新型疫苗。本文通过 2种不同途径免疫动物 ,检测血清抗菌抗体和肠道分泌性IgA抗体以及保护力试验 ,并探讨了它们之间的关系。通过家兔肠袢试验和细胞四甲基偶氮唑盐 (MTT)试验检测免疫后抗血清的被动保护作用。试验提示 :在霍乱的保护性免疫应答中 ,除粘膜免疫可能占主导作用外 。
- 陈翠萍宣俊文王永谦杨朝晖
- 关键词：霍乱疫苗保护性免疫粘膜免疫
