王玉海
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：北京工商大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一种LCD-PCT基因串联重组表达载体及其应用
- 本发明涉及一种LCD-PCT基因串联重组表达载体及其应用。该载体由从丙酸梭菌基因组分别克隆得到的编码丙烯酰辅酶A转移酶(PCT)的PCT基因和编码乳酰辅酶A脱水酶(LCD)的LCD基因串联构建获得；将该载体转化到大肠杆菌...
- 王凤寰孟青青杨慧敏王玉海
- 文献传递
- 乳酸克鲁维酵母的发酵优势及在食品酶制剂领域中的应用被引量：3
- 2013年
- 乳酸克鲁维酵母是一种能够以乳酸作为其唯一的碳源和能源的酵母,具有营养要求极其简单、生长旺盛、生物量大、生长温度适应范围广、分泌蛋白能力强,不产生内毒素和对人类安全等优点。其作为宿主系统表达食品用酶也已显示出巨大的潜力。从生物学特性、菌种选择、发酵工艺优化、表达效果分析、外源蛋白修饰加工诸多方面阐述了乳酸克鲁维酵母发酵特点,并指出其具有的独特发酵优势。简述了乳酸克鲁维酵母在食品酶制剂领域中的应用。
- 王玉海张慧斌杨慧敏孟青青王凤寰
- 关键词：乳酸克鲁维酵母食品酶制剂外源蛋白
- 一种嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶基因在大肠杆菌中的诱导表达与活性表征被引量：1
- 2015年
- 从嗜酸普鲁兰芽孢杆菌基因组中扩增出普鲁兰酶基因Pul A,并将该基因连接到大肠杆菌表达载体p ET-28a中,构建了普鲁兰酶基因的诱导表达载体p ET-28a-Pul A。测序结果表明,普鲁兰酶基因Pul A长度为2766 bp,编码922个氨基酸。将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,普鲁兰酶基因Pul A在IPTG诱导下获得表达,产生胞内蛋白。SDS-PAGE测定的分子量约为110 k D。细胞超声破碎液酶活为0.45 U/m L。该酶的最适温度为55℃,最适p H为5.0,金属离子对酶活性影响不显著,具有I型普鲁兰酶特性。此重组普鲁兰酶的酶学性质表明此酶具有独特的耐酸性质,具备一定的工业化应用价值。
- 王凤寰续丹丹王玉海于云娟
- 关键词：普鲁兰酶基因克隆
- 一种LCD-PCT基因串联重组表达载体及其应用
- 本发明涉及一种LCD-PCT基因串联重组表达载体及其应用。该载体由从丙酸梭菌基因组分别克隆得到的编码丙烯酰辅酶A转移酶(PCT)的PCT基因和编码乳酰辅酶A脱水酶(LCD)的LCD基因串联构建获得；将该载体转化到大肠杆菌...
- 王凤寰孟青青杨慧敏王玉海
- 文献传递
- 耐酸性高温α-淀粉酶的诱变筛选及表达菌株的构建被引量：3
- 2015年
- 利用化学诱变剂亚硝酸钠对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中高温α-淀粉酶基因amy进行体外诱变,通过定向筛选获得一个耐酸性高温α-淀粉酶突变体,其一级序列含有3个突变位点:第288位的亮氨酸突变为天冬氨酸,第289位的组氨酸突变为酪氨酸,第320位的丙氨酸突变为丝氨酸。克隆突变体基因amyM并构建地衣芽孢杆菌表达质粒pGJ103-amyM,将其转入已敲除内源α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌中获得表达耐酸性高温α-淀粉酶的基因工程菌B.licheniformis AMYM。B.licheniformis AMYM所产新型耐酸性高温α-淀粉酶的最适反应pH为5.2,较野生型降低1.2个单位,且最适反应温度95℃。5 L发酵罐内,B.licheniformis AMYM发酵酶活最高可达19 000 U/m L,具有良好的工业应用前景。
- 温赛孟青青王玉海王凤寰
- 关键词：地衣芽孢杆菌化学诱变耐酸性Α-淀粉酶
- α-淀粉酶的基因改造与菌种选育研究进展被引量：1
- 2014年
- α-淀粉酶是重要的工业用酶制剂之一,能在高温、低pH范围内稳定发挥作用的α-淀粉酶则具有更加广阔的应用前景。本文主要从基因改造与菌种选育两方面阐述了高温α-淀粉酶、酸性α-淀粉酶以及高温酸性α-淀粉酶的研究与开发进展。
- 封棣孟青青王玉海杨慧敏杨建国王风寰
- 关键词：Α-淀粉酶基因改造菌种选育
