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Vero细胞疫苗生产过程中宿主细胞蛋白含量分析被引量：1: 2005年; 目的了解Vero细胞疫苗中间产品中宿主细胞蛋白(Host cell protein,HCP)的含量变化。方法模拟Vero细胞疫苗生产工艺流程,制备Vero细胞HCP,免疫家兔制备Vero细胞HCP免疫血清,经Protein ASepharose CL-4B亲和层析,制备纯化的抗Vero细胞HCPIgG,通过SDS-PAGE和Western blot分析Vero细胞乙型脑炎疫苗及Vero细胞SARS疫苗各中间产品的蛋白、HCP及病毒抗原成分的含量变化。结果Vero细胞乙型脑炎疫苗和Vero细胞SARS疫苗中间产品中均存在一定量HCP,不同的纯化工艺均可以去除大部分HCP,随着生产工艺的进行,疫苗中间产品中HCP的含量逐渐降低,病毒成分的纯度逐渐增高,但纯化后产品中仍存在少量HCP。结论Vero细胞乙型脑炎疫苗和Vero细胞SARS疫苗均存在一定量HCP。; 田博丁志芬; 关键词：细胞疫苗细胞蛋白生产过程 VERO细胞宿主 SEPHAROSE

酶标法相对定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白被引量：6: 2005年; 目的　建立定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白 (hostcellprotein ,HCP)的方法 ,并用该方法检测Vero细胞乙脑疫苗中HCP含量。方法　模拟Vero细胞疫苗生产工艺 ,制备Vero细胞HCP及其免疫血清 ,经过DEAEProteinASepharoseCL -4B亲和层析 ,制备纯化的抗Vero细胞HCPIgG。通过对检测条件的优化 ,确立了酶标法相对定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白的方法 ,并用该方法对Vero细胞乙脑疫苗的收获物、中间产品及纯化样品收样前杂蛋白中HCP进行定量分析。结果　该方法可以检测Vero细胞疫苗加入保护剂前任何阶段产品中HCP含量。结论　ELISA法可以相对定量检测Vero细胞HCP的含量。; 田博丁志芬; 关键词：VERO细胞宿主细胞酶标法蛋白乙脑疫苗保护剂

Vero细胞蛋白过敏原性研究被引量：1: 2004年; 目的　研究Vero细胞蛋白的过敏原性。方法　取不同剂量Vero细胞宿主细胞蛋白和裂解蛋白致敏豚鼠 ,隔日 1次 ,共 3次 ,每组 3只 ,以牛血清及生理盐水分别为阳性及阴性对照 ,末次致敏后 2 1d攻击 ,并观察攻击后的反应。结果　攻击后 30min ,10 0ng 只以上剂量组均出现过敏反应 ,且反应强度与剂量呈正相关。 2 4h各剂量组过敏反应的恢复情况各不相同。结论　Vero细胞宿主细胞蛋白及裂解蛋白均可以引起过敏反应 ,裂解蛋白的反应强度高于宿主细胞蛋白。; 田博靳萍黄浩丁志芬; 关键词：VERO细胞过敏反应

第5批百日咳疫苗效力国家标准品的建立: 2004年; 目的　建立第 5批百日咳疫苗效力国家标准品。方法　选用百日咳菌株 (编号 5 80 0 4 ) ,采用B G培养基固体培养 ,将培养的百日咳菌液经脱毒灭活后分装冻干。以WHO的效力标准品 # 3和中国效力标准品 # 4为标准进行协作标定。结果　该标准品经 7个实验室协作标定 6 3次 ,最终合并效价为 14IU ml(95 %CI=13 10 9～15 32 0 )。结论　第 5批百日咳疫苗效力标准品各项指标均符合要求 ,可以作为新的国家百日咳效力标准品使用 ,效价拟定为 14IU ml。; 侯启明张庶民田博梁雅文张路民项美娟黄佐林肖詹荣付春晖郑晓丽刘志强孟丽李松金于兰冯洁朱丽萍宋继萍; 关键词：百日咳疫苗效价菌种

中国不同区域婴儿抗百日咳白喉破伤风母体抗体水平的调查被引量：10: 2006年; 目的调查中国不同区域婴儿抗百日咳、白喉、破伤风母体抗体水平。方法在10年内分别在中国6个不同区域,对3月龄左右未接种过百白破联合疫苗(DPT)的健康婴儿体内抗百日咳、白喉、破伤风抗体水平进行了8次调查。分别检测了抗百日咳凝集原(Aggs)抗体1 602人,抗百日咳毒素(PT)和抗丝状血凝素(FHA)抗体790余人,白喉、破伤风抗体1 196人。结果未接种过DPT健康婴儿体内的抗百日咳Aggs抗体和抗PT、FHA抗体都分别<1∶320和<20EU/ml的保护水平;抗白喉、抗破伤风抗体水平都<0.01HAU/ml的保护水平,而且在婴儿群体中这种低抗体水平不随时间、不依城市或农村、发达地区或不发达地区而变化。结论DPT的初免月龄建议提前至2月龄,推广使用无细胞DPT,在低龄婴儿达到有效预防百日咳、白喉、破伤风的目的。; 侯启明马霄田博刘德铮肖詹荣杨晓明陈平纡项美娟付惠兰吴玫王梨苹梁雅文张路民张庶民; 关键词：百白破联合疫苗婴儿抗体

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田博