申业
- 作品数：39 被引量：220H指数：9
- 供职机构：中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 丹参ERF转录因子SmERF1基因的表达分析和亚细胞定位被引量：6
- 2013年
- 目的:对前期已经克隆的丹参SmERF1基因进行聚类分析,分析SmERF1基因在不同诱导子处理后不同时间的表达情况;并对其进行亚细胞定位分析。方法:利用MEGA5软件对SmERF1基因及拟南芥ERF基因家族进行聚类分析;利用半定量RT-PCR方法,分析SmERF1基因在不同诱导子处理后不同时间的表达情况;将SmERF1与GFP融合,在洋葱表皮瞬时表达,以确定SmERF1蛋白表达部位。结果:丹参SmERF1属于ERF家族第Ⅶ亚族;YE+Ag+诱导对SmERF1基因的表达没有影响,ABA和MeJA可以抑制该基因的表达,而水杨酸诱导会出现先抑制,后随处理时间加长,SmERF1基因表达又恢复;亚细胞定位确定SmERF1基因在细胞核内特异表达。结论:SmERF1是一个AP2/ERF转录因子,属于AP2/ERF家族第Ⅶ亚族,其表达受ABA,SA,MeJA等激素调节控制。
- 吴文燕蒋喜红刘春生黄璐琦申业
- 关键词：丹参ERF转录因子亚细胞定位
- 丹参小分子热激蛋白SmHSP21.8基因克隆、诱导模式和原核表达被引量：1
- 2022年
- 为揭示小分子热激蛋白在丹参抵御逆境胁迫和有效成分积累的分子机制,根据橙根丹参转录组测序结果并结合RT-PCR技术在丹参中克隆获得一个小分子热激蛋白基因,其开放阅读框长度为585 bp,编码194个氨基酸,根据该基因编码的蛋白分子质量命名为SmHSP21.8。根据氨基酸多重序列比对和系统进化树分析,SmHSP21.8属于小分子热激蛋白的内质网亚族,并含有内质网小分子热激蛋白N端保守基序DPFR-I/V-LE-H/Q-x-P。构建原核表达载体pMAL-c2X-SmHSP21.8,并转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,经诱导,成功表达出目的蛋白。时空表达分析表明,该基因在花中表达量最高,有显著的组织特异性。经38℃、PEG6000、脱落酸(abscisic acid,ABA)和吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)的诱导,该基因的相对表达量均有提高,表明SmHSP21.8参与了丹参幼苗对非生物胁迫高温、干旱,以及外源激素ABA和IAA响应的过程,为进一步研究小分子热激蛋白参与丹参响应逆境的分子机制奠定了基础。
- 王世威屈仁军彭佳铭王新新时晨晶郑汉申业黄璐琦
- 关键词：丹参小分子热激蛋白基因克隆原核表达胁迫处理
- 一个参与丹参酮生物合成的CYP450基因及其编码产物与应用
- 本发明公开一个参与丹参酮生物合成的CYP450基因及其编码产物与应用，属于药用植物基因工程领域。该基因为首次从丹参中克隆得到，为丹参酮类化合物生物合成途径的关键酶基因，催化次丹参酮二烯至铁锈醇的关键步骤。本发明所提供的C...
- 黄璐琦郭娟申业张夏楠高伟
- 萜类合成甲羟戊酸途径的关键基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2011年
- 目的:克隆丹参中普遍表达的转录因子基因全长,分析其在丹参各部位初始表达及诱导表达。方法:以深测序结果为指导,从拟南芥和水稻的已见报道的BHLH基因得到启发,克隆得到全长基因。比较其在丹参植株各个部位的不同表达量推测它与次生代谢途径的相关性,并通过ABA,MJ,AG+等生物及非生物诱导因子的诱导,检测其在根部不同诱导时间的表达量情况,试图找出提高转录因子转录活性或转录效率,从而提高次生代谢产物得量,进而提高丹参作为药用植物的药用活性成分的产量。结果:得到转录因子基因全长,分析得出其在ABA,MJ,AG+等作用下,不同时间段的表达情况。
- 汪婉宜申业黄璐琦陈平
- 关键词：诱导子丹参
- 一种培育抗病毒转基因植物的方法及应用
- 本发明公开了一种培育抗病毒转基因植物的方法及应用。所述培育抗病毒转基因植物的方法包括向受体植物中导入黄瓜花叶病毒壳蛋白和烟草花叶病毒壳蛋白的编码基因得到抗病毒能力高于所述受体植物的抗病毒转基因植物。实验证明，利用本发明提...
- 黄璐琦王敏李萌萌陈秀娟李菁陈贝贝滕中秋申业
- 文献传递
- 不同中药渣对紫苏生长及酚类物质的影响被引量：8
- 2016年
- 中药渣营养成分丰富,是一种优质的有机肥原料,可以发酵成优质的有机肥,但是目前中药渣多数被当作生活垃圾处理,不仅占用了大量的土地资源,污染了环境,而且还造成资源的浪费。针对上述情况,该文采用盆栽的方法研究了不同中药渣对紫苏生长及有效成分的影响。研究结果表明不同种类的中药渣均能促进紫苏生长,其促进生长作用的大小顺序为丹参渣>麦芽渣>连翘渣>白术渣>丹皮渣、苦参渣,其中丹皮渣和苦参渣处理组与CK对照相比无显著性差异;不同种类的中药渣还能改善根系结构,增加叶片面积;同时不同种类的中药渣均能提高地下部分迷迭香酸和咖啡酸的含量,而对于地上部分4种酚类物质的积累量也具有提高的作用。综上所述,中药渣有机肥能够促进紫苏生长,提高紫苏酚类物质的积累量,其中丹参渣作用效果最好。
- 陈美兰申业周修腾李鹏英杨光
- 关键词：中药渣紫苏酚类物质
- 香樟1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因CcDXR1的克隆和表达分析被引量：6
- 2016年
- 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)是萜类甲基赤藓醇-4-磷酸途径(methylerythritol-4-phosphate pathway,DXP/MEP)上的第二个限速酶。本研究以5种化学型的香樟(Cinnamomum camphora)作为实验材料,基于转录组数据,运用快速扩增c DNA末端技术(RACE),从香樟中克隆出DXR基因的c DNA,命名为Cc DXR1(Gen Bank登录号:KU886266)。该基因开放阅读框(ORF)长1 413 bp,编码470个氨基酸残基,生物信息学分析推测其分子质量为51.1 k D,等电点(Theoretical p I)为6.62,不含信号肽,不存在跨膜结构。结合蛋白质保守区以及进化树分析,证实该基因确为DXR家族基因。利用实时荧光定量PCR检测得出香樟中CcDXR1基因在成熟叶片表达量高于幼嫩叶片,根与叶中表达量相当,枝中最低。Cc DXR1在香樟5种化学型中的表达量不同,在龙脑樟中的表达量要高于油樟、芳樟、脑樟和异樟4种化学型。本研究首次从香樟中克隆出了Cc DXR1序列全长,并揭示了Cc DXR1在不同组织、生长时期及5种化学型中的差异表达,为香樟萜类化合物生物合成途径关键酶基因的挖掘提供研究基础。
- 郑汉荆礼姚娜杨青山彭华胜申业黄璐琦
- 关键词：香樟RACE
- 丹参超氧化物歧化酶SmMSD2基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2023年
- 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基(O_(2)^(·-))的关键酶,在植物生长发育和逆境胁迫中发挥重要的作用。本研究基于丹参基因组和转录组数据,共挖掘出9条SOD基因,分别为5个Cu/Zn-SOD、2个Fe-SOD和2个Mn-SOD,并对9条基因进行了生物信息学和基因表达模式分析。结合蛋白质组学和转录组数据,从丹参中克隆得到SmMSD2的全长cDNA,根据氨基酸多重序列比对和系统进化树分析,SmMSD2属于超氧化物歧化酶的锰离子亚族,且C端含有保守的金属结合结构域“DVWEHAYY”。构建原核表达重组载体pMAL-c2X-SmMSD2,成功诱导表达出重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。时空表达分析表明,该基因在各个组织中均有表达,为组成表达型基因。实时荧光定量PCR结果显示模拟干旱(15%PEG6000)、脱落酸(abscisic acid,ABA)和吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)均能够诱导丹参SmMSD2基因表达,推测SmMSD2可能参与丹参响应干旱等非生物胁迫,以及植物激素ABA和IAA的信号传导途径,为进一步阐明超氧化物歧化酶参与丹参逆境响应及有效活性成分的积累奠定了基础。
- 彭佳铭屈仁军王世威王新新查良平彭华胜彭华胜
- 关键词：丹参超氧化物歧化酶非生物胁迫
- 三七及屏边三七病程相关功能基因的克隆
- 本发明涉及三七及屏边三七植物体内的一些病程相关功能基因，该基因系首次利用RT-PCR技术从三七和屏边三七中克隆而得到，详细序列见序列表1。植物在长期进化进程中已发展出一套复杂机制用于抵抗坏境中的有害生物入侵，当病原菌入侵...
- 黄璐琦申业崔秀明李瑞博刘玉忠
- 文献传递
- 一个新的丹参3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶3基因的克隆及其表达分析被引量：7
- 2012年
- 目的:对丹参3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3methylglutary CoA reductase,HMGR3)基因的cDNA克隆并进行序列分析。方法:利用丹参转录组文库克隆一种新的丹参次生代谢途径上的功能基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,Clustal W比对丹参中已有的3条HMGR的氨基酸序列,构建系统进化树,QRT-PCR检测丹参HMGR3基因在根、茎、叶中的mRNA水平,并检测Ag+诱导子诱导后丹参毛状根中该基因的转录水平。结果:克隆得到一个新的丹参HMGR3基因,该基因ORF全长1 692 bp,编码563个氨基酸,具有HMGR基因家族的特征序列,与SmHMGR1和SmH-MGR2分别具有75.04%,80.64%的同源性,QRT-PCR分析表明该基因在丹参根茎叶中均有表达,在叶中表达量最高,Ag+诱导24 h时mRNA水平达到最高值。结论:首次克隆得到了1条新的丹参HMGR家族基因SmHMGR3,这一结果为进一步研究丹参次生代谢途径提供了新的思路和靶点。
- 张夏楠郭娟申业黄璐琦
- 关键词：丹参QRT-PCR
