程志祥
- 作品数:14 被引量:55H指数:5
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金南京医科大学校科研和教改项目江苏省国际科技合作项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达及其亚型的分离和鉴定被引量:2
- 2002年
- 目的:研究转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达并分离鉴定其亚型。方法:应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)对转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达进行半定量分析,同时利用双向电泳免疫印迹技术分离、鉴定转醛醇酶的亚型。结果:①转醛醇酶在生后1周小鼠睾丸中表达量平均比成年高47.8%(P<0.005)。②双向电泳Westernblotting示小鼠睾丸转醛醇酶共有10余个亚型,生后1周小鼠睾丸中a8亚型表达量极低,而在成年小鼠睾丸中a8亚型高表达。结论:①生后1周小鼠生长发育快,合成代谢旺盛,转醛醇酶基因绝对表达量高。②a8亚型可能与生殖功能(精子发生、睾酮生成)密切相关。
- 顾冬民程志祥刘颖朱慧德伟
- 关键词:转醛醇酶发育小鼠睾丸
- 大鼠胰腺发育中巢蛋白的表达变化
- 目的:探讨巢蛋白(nestin)在大鼠胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化。方法:应用RT-PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均...
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 文献传递
- 巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表达变化被引量:25
- 2004年
- 目的 :探讨巢蛋白 (nestin)在胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化 .方法 :取三个发育时期的胰腺 ,应用RT PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析 .结果 :在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均有表达 ,阳性细胞主要分布在胰岛 ,在腺泡周围的外分泌中有少量分布 .结论 :随大鼠胰腺的生长发育 ,核酸、蛋白表达下调 .
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 关键词:巢蛋白胰腺逆转录-聚合酶链反应免疫组化
- 重组腺病毒ΔN IκBα的构建及其对A549细胞中NF-κB活性的抑制
- 2005年
- 目的: 探讨ΔNIκBα基因对NF -κB活性的调节作用。方法: 构建去除Ser32和Ser36磷酸化位点的IκBα重组腺病毒Ad- ΔNIκBα。A549细胞分为 3组: 即LPS组、Ad- LacZ+LPS组和Ad -ΔNIκBα+LPS组。LPS组单纯用内毒素(LPS)激活NF -κB; Ad -LacZ+LPS组及Ad ΔNIκBα+LPS组在用LPS前 2d, 分别感染Ad -LacZ和Ad- ΔNIκBα。用West ernblot、电泳迁移率变动分析 (EMSA)和ELISA法分别检测LPS刺激后 5h, 细胞总蛋白中NF κB的活性和培养上清中TNF -α及IL- 6的含量。结果: Ad -ΔNIκBα+LPS组NF -κB的活性, TNF- α和IL -6的含量, 均显著低于LPS组及Ad- LacZ+LPS组。结论: 突变后的IκBα可明显抑制NF- κB活化, 减少TNF- α和IL- 6的释放, 有望成为一种强有力的抗炎治疗制剂。
- 朱自路程志祥熊俊陈丙莺
- 关键词:IKB重组腺病毒
- INS-1细胞中生长激素及催乳素受体和IGFBP-3的表达调控被引量:1
- 2003年
- 目的 :研究生长激素 (GH)和催乳素 (PRL)受体在鼠胰腺肿瘤 β细胞中的表达和调控及GH调节IGFBP 3的表达调控 .方法 :Northern ,检测PRL ,GH和IGFBP 3的mR NA表达 .细胞培养 ,受体蛋白竞争结合实验 ,检测细胞膜受体特异结合 .Western共价杂交 ,检测INS I细胞中IGFBP 3蛋白表达 .结果 :在INS 1中 ,每个细胞有 6 6 0 0个人生长激素 (hGH)受体蛋白结合点 .GH受体的mRNA分子为 1 .6kb,PRL受体mRNA为 0 . 5kb.bGH和rPRL抑制GH受体mRNA的表达 ,而bGH和rPRL上调促进PRL受体mRNA的表达 .在INS 1中GH ,PRL和IGF I对IGFBP 3的mRNA和蛋白表达均有促进作用 .结论 :GH和PRL控制鼠胰腺β细胞的GH和PRL受体表达 ,GH对IGFBP 3表达作用不是通过IGF
- 德伟徐桦程志祥熊俊倪雪峰
- 关键词:IGFBP-3胰腺Β细胞
- 大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术的初步建立被引量:5
- 2003年
- 目的:初步建立大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法:应用大鼠成年和胚胎18天胰腺组织提取的总蛋白,对以载体两性电解质pH梯度为第一向的双向电泳关键因素与环节,如样品处理、凝胶制备、电泳参数等进行一系列的优化。结果:获得了分辨率及重复性均很好的双向电泳图谱。结论:通过对各种条件的优化,初步建立了双向电泳技术,为研究胚胎胰腺不同时期特异性蛋白的表达及分子标志打下基础。
- 程志祥熊俊倪雪峰顾冬民德伟
- 关键词:双向电泳胰腺蛋白质组
- 胰岛素样生长因子Ⅱ基因在大鼠INS-1细胞中表达的调控
- 2002年
- 目的 研究不同浓度葡萄糖对INS 1细胞IGF Ⅱ基因表达的调节及对INS 1细胞增殖的作用 ,并比较其对IGF Ⅱ与胰岛素基因表达的关系。方法 采用Northern杂交分析IGF ⅡmRNA表达 ,用3 H 胸腺嘧啶掺入法检测细胞增生。结果 IGF Ⅱ在INS 1细胞中表达。当葡萄糖浓度为 10~ 2 0mmol/L时 ,IGF ⅡmRNA表达量提高 3倍以上。佛波醇十四乙酸对INS 1细胞的IGF ⅡmRNA的表达及增生不起作用 ,而Forskolin可抑制INS 1细胞的IGF ⅡmRNA表达。结论 高浓度葡萄糖促进INS 1细胞中IGF ⅡmRNA表达 ,低浓度的葡萄糖环境中胰岛素mRNA的表达量高。
- 德伟吴月徐桦程志祥熊俊Paul Czernichow
- 关键词:胰岛素葡萄糖基因表达
- 巢蛋白和胰岛素在大鼠胰腺不同发育阶段的表达被引量:7
- 2004年
- 目的:探讨巢蛋白(nestin)在胚胎后期、新生期、成年3阶段的mRNA、蛋白水平表达的变化。方法:应用RT-PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:在胚胎后期、新生期、成年3阶段Nestin在mRNA、蛋白水平均有表达,Nestin阳性细胞主要分布在胰岛中,腺泡周围的外分泌组织中有少量分布。结论:Nestin随大鼠胰腺的生长发育,核酸、蛋白表达下调,胰岛内Nestin阳性细胞百分数表达也下调。
- 倪雪峰彭韬程志祥熊俊顾冬民徐桦德伟
- 关键词:巢蛋白胰岛素胰腺RT-PCR
- 大鼠成年胰腺与胚胎18.5天胰腺蛋白表达谱初探
- 该研究利用双向凝胶电泳技术分离SD大鼠成年胰腺组织和胚胎18.5天胰腺组织总蛋白,银染和考染显色,获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱.用ImageMaster(Pharmacia公司)图像软件分析,发现1000±5...
- 程志祥
- 关键词:胚胎胰腺双向电泳
- 文献传递
- 大鼠胰腺β肿瘤细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白-2和3的表达调控被引量:1
- 2003年
- 目的:研究大鼠胰腺β肿瘤细胞(INS-1)中,生长激素(GH)、催乳素(PRL)、葡萄糖和胰岛素对胰岛素样生长因子结合蛋白-2和3(IGFBP-2、3)的表达调控,探索IGFBP-2和3对维持正常β细胞生理功能的作用。方法:RNA印迹法检测INS-1细胞中IGFI3P-2和3的mRNA表达情况及蛋白免疫印迹法分析INS-1细胞中IGFBP-3和2蛋白表达。结果:在INS-1细胞中,GH和PRL调控IGFBP-3 mRNA和蛋白表达。葡萄糖对IGFBP-2 mRNA调节作用不同:高浓度(10 mmol/L)葡萄糖条件下,IGFBP-2 mRNA表达被抑制;低浓度(1.0~5.6 mmol/L)葡萄糖条件下,IGFBP-2 mRNA有表达。葡萄糖浓度为5.6 mmol/L时,加入GH孵育16 h,IGFBP-2 mRNA表达被抑制。外源胰岛素抑制 IGFBP-2 mRNA的表达。结论:GH和PRL可以调控IGFBP-3的mRNA和蛋白表达,IGFBP-2 mRNA表达主要通过胰岛素调控。
- 张春举程志祥熊俊倪雪峰周锦勇钟燕德伟
- 关键词:胰岛素样生长因子结合蛋白-2胰岛素样生长因子结合蛋白-3葡萄糖胰腺Β细胞