肖进文
- 作品数：28 被引量：136H指数：5
- 供职机构：重庆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目重庆市科技攻关计划国家质检公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 传统腌腊制品中亚硝酸盐的危害及其替代物的研究进展被引量：36
- 2012年
- 亚硝酸盐是一种传统的发色剂,能赋予肉制品诱人的色泽,对肉毒梭状芽孢杆菌有抑制作用,并且有助于肉制品风味的产生和保持。但亚硝酸盐添加过量能引起中毒,同时又是强致癌物N-亚硝胺的前体物。腌腊制品在生产上需保证良好的色泽及安全性,完全不添加亚硝酸盐几乎是不可能的,应尽可能降低亚硝酸盐的使用量并积极寻找高效、安全的替代物。本文介绍了腌腊制品中亚硝酸盐替代物的研究进展,由于微生物制品迎合了人们要求食品天然化,不加或少加化学添加剂的愿望,因此本文对天然微生物制品替代亚硝酸盐进行了着重介绍。最后本文还对未来减少食品中亚硝酸盐危害的研究方向进行了展望。
- 周蓓莉肖进文刘生峰李应国
- 关键词：亚硝酸盐腌腊制品
- TaqMan探针荧光PCR检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7方法的建立被引量：5
- 2012年
- 肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157:H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157:H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157:H7核酸的荧光定量PCR检测方法。实验结果表明荧光定量PCR检测方法特异性好,最低检测限为20 cfu/mL,线性范围是102～108cfu/mL。稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数分别为2.06%和2.45%。
- 刘生峰肖进文刘利成杨俊王昱聂福平周庆李应国
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌O157:H7荧光PCR
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立被引量：8
- 2016年
- 为建立快速检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）的鉴别方法，衣研究根据APP ApxIVA基因的保守区设计6条环介导等温扩增（LAMP）引物，利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c实时浊度仪对反应体系和条件进行优化，建立了APP的LAMP方法。结果显示：该方法在64℃下反应15rainDNA即可出现扩增，扩增后2～3min内即可判定结果，最低检测限为0．307ng／L，具有良好的重复性及稳定性，与其他病原菌无交叉反应，同时，试验结果可实现肉眼可视化观察。采用建立的LAMP方法与SN／T14472011标准公布的方法同时对36份临床疑似APP样品进行检测分析，结果显示：APP阳性10份，阴性26份，两种方法的符合率为100％。本研究建立的方法为防止猪传染性胸膜肺炎的传播提供了有效的检测手段。
- 刘亚娟聂福平杨俊王昱石宝石保雨叶自霞王国民李贤良李应国肖进文刘力
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- FPA98型树脂对肝素钠的吸附特性研究被引量：2
- 2013年
- [目的]筛选适宜的离子交换树脂,并优化提取工艺条件。[方法]通过比较4种阴离子交换树脂对肝素钠的吸附效果,研究吸附时间、温度、溶液pH、盐浓度对FPA 98型树脂对肝素钠的吸附率的影响。[结果]FPA 98型大孔树脂对肝素钠的吸附效率最高。在吸附温度60℃、pH为8.8、盐浓度3%的条件下吸附7.0 h,FPA 98树脂对肝素钠的吸附率达92%。[结论]FPA 98型树脂对肝素钠的吸附特性研究为肝素钠的生产提供了参考。
- 刘生峰刘毅杨俊肖进文李应国聂福平王昱谭科唐伏伦
- 关键词：离子交换树脂肝素钠
- 牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达被引量：1
- 2012年
- 为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV)ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132。生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959株LW132、NI-2490株LSDV132和NW-LW株LD132的相应推导氨基酸同源性分别为100%、100%和94.4%,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒相应推导氨基酸的同源性为20.7%～36%。SDS-PAGE和western blot分析表明,pGEX-LSDV-ORF132在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导主要以包涵体形式存在,其重组蛋白大小约为48.95 ku,并且与特异性抗体具有抗原反应活性。
- 周雪梅聂福平王昱肖进文聂奎李应国
- 关键词：原核表达
- 白色念珠菌检测方法的研究进展被引量：8
- 2012年
- 白色念珠菌是导致真菌感染的重要致病菌之一,文章对白色念珠菌的生物学特性和检测方法进行了综述。目前我国尚未出台食品中白色念珠菌检测的相关标准。本文通过对白色念珠菌检测技术发展历程的梳理,旨在为广大科研工作者、行业法规制定者提供一些参考依据。
- 欧阳珂珮刘生峰肖进文李应国李洪军贺稚非
- 关键词：白色念珠菌
- 猪瘟病毒NASBA-ELISA检测方法的建立与应用被引量：1
- 2012年
- 为建立猪瘟病毒NASBA-ELISA检测方法,以猪瘟病毒(CSFV)E2基因为研究对象,利用Prim-er 5.0和Blastn生物软件,设计并合成了特异的核酸序列依赖扩增(NASBA)引物和探针。经条件优化,确定的最佳扩增反应条件为42℃,反应1.5h。临床检测结果显示,用该方法可特异地扩增CSFV E2基因约155bp的目的片段,而对TGEV、PRRSV、PCV2、PPV、PEDV、APP和PK-15正常细胞等核酸的检测均为阴性,可最低检出1×100～1×101 copies/μL,其灵敏度比RT-PCR略高。应用该方法对采自重庆部分地区猪场的125份样品进行了检测;结果,猪瘟病毒阳性检出率为5.6%,NASBA-ELISA法与RT-PCR法的检出符合率为94.4%。结果表明,NASBA-ELISA方法可应用于CSFV的快速鉴别检测。
- 聂福平肖进文李应国徐自忠王灵强王昱周雪梅李小兰
- 关键词：猪瘟病毒E2基因
- 应用随机引物法鉴定伪劣羊肉卷中的肉种成分被引量：2
- 2014年
- 为鉴定市场抽检的来源不明的伪劣"羊肉卷"中的肉种成分,采用随机引物法,PCR扩增肉制品DNA,将阳性产物回收、克隆并测序,然后根据序列信息设计特异性的荧光定量引物进行再次鉴定。结果表明,获得了针对伪劣"羊肉卷"的阳性克隆,序列比对表明样品中含有北极狐或火狐肉成分,经特异性的荧光定量PCR确认样品为火狐肉。结果表明,可以应用随机引物PCR鉴定伪劣"羊肉卷"中的肉种成分。
- 王昱叶自霞聂福平肖进文杨俊袁增壮王国民李应国李正国
- 关键词：肉制品
- 绵羊痘病毒和山羊痘病毒双重PCR检测方法的建立及应用被引量：4
- 2012年
- 为建立鉴别绵羊痘病毒(SPPV)和山羊痘病毒(GTPV)的检测方法,本研究针对这2种病毒的基因组序列,分别设计2对特异性引物,通过对引物浓度、退火温度等的优化,建立了快速鉴别检测SPPV和GTPV的双重PCR方法。该方法分别扩增出SPPV长度为177 bp和GTPV长度为222 bp的目的片段。特异性试验结果显示,该方法对牛疙瘩皮肤病病毒、犬细小病毒、大肠杆菌O157、沙门氏菌、健康羊组织和牛组织均无扩增。敏感性试验显示,该方法最低可检测1.725×107copies/μL的SPPV和1.71×106copies/μL的GTPV。应用该方法对50份临床病料样品进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致,均检出5份感染GTPV的病料和2份感染SPPV的病料,表明该方法可以用于临床病料样品的检测。
- 肖雯聂福平王昱肖进文周雪梅丁森周庆李应国刘力
- 关键词：绵羊痘病毒山羊痘病毒双重PCR
- 猪衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：4
- 2014年
- 为了建立猪衣原体（Chlamydia suis ）实时荧光定量 PCR（real-time PCR）检测方法，根据猪衣原体（C．cuis ）的 MOMP 基因，选取高度特异保守的区域，设计实时荧光定量 PCR 引物和探针，并构建了重组质粒。结果显示，该方法建立的标准曲线方程为：Y＝-3．2147x＋41．218，线性相关系数为0．9991，扩增效率为104．6％，最低检测量为1．7＆#215;102 copies ！μL。该检测方法特异性较好，与鹦鹉热亲衣原体、流产亲衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、牛羊亲衣原体、鼠衣原体无交叉反应。批内和批间重复试验的变异系数在0．458％～1．174％范围内，具有较好的重复性；与普通 PCR 方法相比较，该方法具有较高的检出率。建立对猪衣原体的监测和流行病学调查都具有非常重要的意义。
- 袁曾壮王昱聂福平杨俊李应国肖进文王国民李贤良刘力
- 关键词：猪衣原体实时荧光定量PCR
