胡兆丽
- 作品数：7 被引量：33H指数：4
- 供职机构：苏州大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 杆状病毒转移载体的构建及绿色荧光蛋白在斜纹夜蛾幼虫中的表达被引量：6
- 2005年
- 为构建斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)的重组病毒,以该病毒日本C3株基因组DNA为PCR扩增模板,根据GenBankSpltMNPV中国G2株基因序列,设计了两对引物分别扩增多角体蛋白基因的5′端侧翼序列(含启动子)和3′端侧翼序列(含终止子),将这两个片段依次克隆于pUC18质粒载体后,再将绿色荧光蛋白(GFP)基因亚克隆到上述载体的多角体蛋白基因启动子和终止子之间,获得转移载体pSplt_gfp。将pSplt_gfp与野生型SpltMNPV基因组DNA共转染Spli细胞,通过同源重组和有限稀释法筛选,获得了以gfp基因替代多角体蛋白基因的重组病毒SpltMNPV_gfp。SpltMNPV_gfp感染Spli细胞和斜纹夜蛾幼虫,分别在感染24h和48h后可发现绿色荧光蛋白的表达。该重组病毒的获得,为建立斜纹夜蛾核型多角体病毒表达体系奠定了基础。
- 胡兆丽王文兵朱江李新平沈颂东
- 关键词：绿色荧光蛋白斜纹夜蛾真核表达
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒分子生物学研究进展被引量：6
- 2005年
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera lituramulticapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)属NPV科A亚群。近几年有关该病毒的序列测定、基因结构、功能和表达调控等系统的分子生物学研究工作进展迅速,特别是对一些重要基因的结构分析,有助于筛选毒力较强的杀虫毒株,并为这一病毒杀虫剂的改良和发展以及组建昆虫杆状病毒表达载体奠定基础。综述了与SpltMNPV相关的分子生物学领域的研究进展。
- 胡兆丽朱江
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒分子生物学
- SpltMNPV日本分离株gp41的克隆表达及gp41和ph的进化分析被引量：4
- 2006年
- 从斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)日本分离株(C3)基因组中克隆了gp41基因。该基因编码区含993bp核苷酸,编码分子量为36.9kDa的多肽。将该基因克隆至原核表达载体pET28a,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了表达。应用CLUSTAL程序分析表明,SpltMNPV日本株(C3)gp41的核苷酸序列和氨基酸序列与SpltMNPV中国G2株相似性最高,均达99.9%。用MEGA分别构建了基于gp41和ph的聚类分析图和分子进化树,发现它们具有相似的拓扑结构。将这两个基因序列结合在一起构建进化树,该树的结构与基于gp41的进化树相似。突变率分析显示gp41的突变率高于ph,这意味着在杆状病毒进化过程中,gp41和ph面临不同的选择压力。
- 胡兆丽朱江盛晔王文兵李新平沈颂东
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒GP41
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株(C3)p10基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 从斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)日本株(C3)基因组中克隆了p10基因.核苷酸序列分析表明,该克隆片断涵盖了318bp的读码框及5′端启动子区191bp和3′端终止区62bp的序列.在起始密码子ATG上游-63～-59bp处有一杆状病毒晚期和晚晚期启动子基序TAAG.联配分析表明,SpltMNPV日本株(C3)的核苷酸序列和氨基酸序列与其它9种核多角体病毒的同源性有较大差异.以p10基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树将家蚕核多角体病毒(Bombyxmorinucle opolyhedrovirus,BmNPV)与苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographacalifornicamulticapcidnucleopolyhe drovirus,AcMNPV)归到同一分枝,这与以gp37基因和egt基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树结果一致.
- 朱江沈颂东王文兵朱玉芳曹广力胡兆丽盛晔
- 关键词：10基因杆状病毒核型多角体病毒斜纹夜蛾
- 日本三株斜纹夜蛾核型多角体病毒的增殖特性及其多角体蛋白基因的序列分析被引量：20
- 2004年
- 利用斜纹夜蛾Spodopteralitura培养细胞 ,对近年来在日本本州、九州和四国等地发现并筛选出的对斜纹夜蛾幼虫具有强烈杀虫活性的 3株斜纹夜蛾核型多角体病毒 (SpltMNPV) (K 3、G1 2和G10 3)进行了生物学活性和分子生物学的初步研究 ,克隆了多角体蛋白基因 ,并进行了序列分析和比较。结果表明 :(1)SpltMNPV日本分离株K 3、G1 2和G10 3分别具有不同的特征性酶切图谱 ,分别属于 3种基因型 (A型、B型和C型 ) ;(2 ) 3个分离株的芽生型病毒 (buddedvirus)产生能力和多角体产生能力有差异 ,免疫印迹分析表明 ,多角体蛋白的分子量也不同 ;(3)日本株SpltMNPV核型多角体蛋白结构基因由 74 7个核苷酸编码序列 (编码 2 4 9个氨基酸 )组成 ,其序列与中国株SpltMNPV的同源性为 98 9% ,与其他 6种核型多角体病毒有较高的同源性 (6 1 7%～ 74 2 % ) ,但其 5′端侧翼序列 (nt_1～_10 0 )与AcMNPV和BmNPV相比差异显著 ,在对该基因表达调控起决定性作用的 8个高度保守核苷酸序列中 (nt_4 4～_5 1)有 2处发生自然突变。
- 朱江沈颂东王文兵朱玉芳池田素子胡兆丽盛晔
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体蛋白增殖
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株(C3)ie0基因的序列分析和表达被引量：4
- 2007年
- 从斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)日本株(C3)基因组中克隆了ie0基因。核苷酸序列分析表明,该克隆片断涵盖了864 bp的读码框及5′端启动子区475 bp和3′端终止区90 bp的序列。氨基酸序列分析显示,在SpltMNPV IE0蛋白N-端23～47位以及111～126位富含酸性氨基酸和疏水性氨基酸残基,C′端第225～271位具有典型的CX2CX14CCX4CX2CX15CX2C双锌指基序,该结构在所比较的9个昆虫杆状病毒IE0蛋白中是十分保守的。联配分析表明,SpltMNPV日本株(C3)的核苷酸序列和氨基酸序列与其他9种核多角体病毒的同源性有较大差异。以ie0基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树将家蚕核多角体病毒(Bombyx mori Nu-cleopolyhedrovirus,BmNPV)与苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multicapcid nucle-opolyhedrovirus,AcMNPV)归到同一分枝,这与以p10、gp37和egt基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树结果一致。并进行了大肠杆菌表达和Western Blotting分析。
- 盛晔胡兆丽王文兵李新平朱江
- 关键词：病毒学斜纹夜蛾核型多角体病毒
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体蛋白基因与gp41基因分析及带GFP标记的转移载体的构建
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus，SpltMNPV)属NPV科A亚群。本研究在Spli-SpltMNPV的模型中对ph及gp41基因进...
- 胡兆丽
- 关键词：斜纹夜蛾多角体病毒多角体蛋白基因
- 文献传递
