葛凉芳
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PLAGL2对TTF-1结合SP-C基因启动子能力影响的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究甲状腺转录因子-1（thyroid transcription factor1，TTF-1）对表面活性蛋白C（pulmonary surfactant—asso—ciated protein C，SP-C）基因启动子的调控作用及多形性腺瘤样基因2（pleiomorphic adenoma gene like-2，PLAGL2）对TTF-1结合SP-C基因启动子能力影响。方法应用体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究TTF-1对SP-C基因启动子转录活性的调控及PLAGL2的影响作用：利用凝胶电泳迁移实验（EMSA）研究TTF-1对SP-C基因启动子靶点的结合及PLAGL2的影响作用：应用实时荧光PCR技术检测PLAGL2、TTF-1、SP—C在人胚肺和成熟小鼠肺Ⅱ型上皮细胞中mRNA水平。结果TTF-1明显提高SP—C基因启动子荧光素酶活性值（P〈0.01）。而共转染PLAGL2后则明显降低SP—C基因启动子荧光素酶活性值（P〈0．01）；TTF-1能与同位素标记的SP—C基因启动子片段结合形成TTF-1-SP-CDNA蛋白复合物，PLAGL2则明显降低该蛋白复合物形成；TTF-1、SP-C基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐升高，PLAGL2基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐减少。结论在肺Ⅱ型细胞中TTF-1对SP—C基因表达具有促进作用，PLAGL2则对该作用产生明显抑制影响。
- 邓飞涛葛凉芳杨昀李彦旭柴新群
- 关键词：甲状腺转录因子-1实时荧光PCR
- 妊娠期糖尿病大鼠的胎鼠肺结构和肺表面活性蛋白B、C及其调控因子表达被引量：5
- 2015年
- 目的 通过对GDM大鼠胎鼠的肺组织结构及肺表面活性蛋白（surfactant proteins,SP）-B、SP-C、甲状腺转录因子（thyroid transcription factor,TTF）-1、多形性腺瘤样因子（pleiomorphic adenoma gene like,PLAGL）-2蛋白表达水平进行研究,探讨GDM大鼠胎鼠肺发育障碍的机制. 方法 清洁级健康成年Sprague-Dawley大鼠构建孕鼠GDM模型,共20只造模成功,对照组为20只正常孕鼠.于妊娠第21天检测孕鼠随机血糖,并行剖宫取胎术,胎鼠计数并称重.透射电子显微镜下观察肺泡Ⅱ型上皮细胞的超微结构.每组随机取60只胎鼠,取肺组织制作360张石蜡切片,随机取100张不连续切片,光镜下观察肺组织形态结构;随机取另外100张不连续切片,免疫组织化学法检测SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2的蛋白定位及表达.每组取9只胎鼠,蛋白质印迹技术检测胎鼠肺组织中SP-B、SP-C、TTF-l和PLAGL-2蛋白水平.每组取27只胎鼠,荧光实时定量聚合酶链反应检测胎鼠肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2的mRNA水平.采用独立样本t检验进行统计学分析. 结果 GDM组孕鼠平均随机血糖值高于对照组[（26.8±2.8）与（4.9±0.5）mmol/L,t=-34.05,P=0.00].GDM组胎鼠平均体重高于对照组[（5.6±0.6）与（5.2±0.5）g,t=-1.97,P=o.03].GDM组与对照组肺泡个数分别为（10.1±1.6）与（12.1±1.3）个,肺泡面积分别为（986.9±5.5）与（1 257.3±5.0） μm2,GDM组均低于对照组（t值分别为9.84和27.53）;肺泡间隔分别为（11.5±6.2）与（9.9±4.3）μm,GDM组高于对照组（t=-2.17）,差异均有统计学意义（P值均＜ 0.05）.透射电镜下,可见GDM组肺泡Ⅱ型上皮细胞表面微绒毛粗短、减少,板层小体数量减少.胎肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2蛋白均沿胞浆呈颗粒状分布,GDM组4种蛋白表达的平均吸光度分别为1.15±0.12、1.23±0.06、0.87±0.21与1.21±0.18,对照组分别为1.22±0.05、1.31±0.14、1.12±0.09与1.33±0.07,GDM组均低于对照组,
- 邓飞涛张莉葛凉芳张青苗邹丽
- 关键词：核蛋白质类DNA结合蛋白质类
