蒋磊
- 作品数：18 被引量：20H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 草莓轻型黄边病毒CP蛋白的原核表达及抗血清制备
- 2023年
- 利用PCR技术扩增草莓轻型黄边病毒(strawberry mild yellow edge virus, SMYEV)中国分离物的外壳蛋白(coat protein, CP)基因,将SMYEV CP基因克隆至原核表达载体pET-32a,重组质粒pET-cp转化大肠杆菌BL21菌株,37℃振荡培养,1 mmol·L^(-1)IPTG诱导表达,检测发现CP融合蛋白大量存在于细胞裂解上清液中。Ni^(2+)-NTA亲和树脂纯化CP融合蛋白,Western blot可检测到较单一的特异性条带,分子量约为46 kDa。用纯化的CP融合蛋白免疫家兔获得多抗血清,间接ELISA法测定抗血清效价达1∶512 000。以此多抗血清建立了Dot-ELISA和胶体金试纸条检测方法,不仅可以检测感染SMYEV的草莓样本,用于感病草莓的早期诊断和鉴定,还可以用于SMYEV CP蛋白的瞬时表达和系统表达等分析。
- 卢静韩金成孙遗鑫蒋磊江彤
- 关键词：外壳蛋白原核表达抗血清
- 草莓镶脉病毒(SVBV)ORFⅠ基因的克隆及序列分析
- 2012年
- 用CTAB法从感染草莓镶脉病毒(SVBV)的草莓叶片中提取总DNA,设计特异性引物扩增含有SVBVORFⅠ的片段,克隆并测序。序列分析表明,该片段全长1 033个核苷酸,其中包含的ORFⅠ全长987个核苷酸,编码328个氨基酸。结果表明:将其与花椰菜花叶病毒属其他成员的ORFⅠ序列相比较,中国SVBVORFⅠ与美国SVBV ORFⅠ序列相似性最高,达88.3%。进一步构建SVBV及其同属其他成员ORFⅠ的系统关系树,结果显示:中国SVBV ORFⅠ与美国SVBV ORFⅠ单独形成1个亚分支,说明来源于草莓的2个SVBV亲缘关系最近。
- 贾琳倪方锐李瑞蒋磊丁菲江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒克隆
- 一种快速检测草莓轻型黄边病毒的试纸条
- 本实用新型公开了一种快速检测草莓轻型黄边病毒的试纸条，包括PVC外壳，所述PVC外壳的内部开设有空腔，且空腔的一端连通于外界，所述空腔的内部设有胶体金垫和吸水试纸，所述空腔的内部安装有NC膜，所述NC膜的两端分别搭接于胶...
- 江彤杨先初范奥奇蒋磊黄锡桂
- 利用酵母双杂交系统筛选与草莓镶脉病毒移动蛋白P1互作的寄主因子
- 2019年
- 构建感染草莓镶脉病毒(SVBV)森林草莓的酵母c DNA文库,利用酵母双杂交系统,筛选出与SVBV P1蛋白互作的15种寄主因子。生物信息学分析发现,这15种寄主因子参与茉莉酸途径、泛素化、光合作用、抗病抗逆、蛋白修饰、蛋白运输和氧化还原等多种生物过程。另外,这些寄主因子还具有其他分子功能,包括氧化还原酶活性、蛋白二硫化物异构酶活性和金属离子结合活性等。本研究初步探讨了P1与寄主因子的互作机理,为揭示SVBV侵染森林草莓以及SVBV在寄主中扩展的分子机制提供理论依据。
- 张享享蒋西子李帅蒋磊江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒
- 草莓镶脉病毒(SVBV)ORF Ⅵ基因的克隆及蛋白特性分析被引量：2
- 2011年
- 用CTAB法从感染草莓镶脉病毒(strawberry vein banding virus,SVBV)的草莓叶片中提取总DNA,设计特异性引物扩增SVBV ORF Ⅵ基因的全长片段,进行克隆并测序.序列分析表明SVBV ORF Ⅵ基因完整序列全长1 557bp,编码518个氨基酸.将其与SVBV美国分离物以及花椰菜花叶病毒属其他成员的ORF Ⅵ基因相比较,结果表明SVBV中国分离物ORF Ⅵ基因与SVBV美国分离物ORF Ⅵ基因核苷酸序列相似性最高,达84.5%;而与花椰菜花叶病毒属其他成员的ORF Ⅵ基因序列相似性均较低,仅为23.7%～27.9%.构建SVBV及其同属其他成员ORF Ⅵ基因的系统关系树,结果显示SVBV中国分离物与SVBV美国分离物单独形成1个分支,说明来源于草莓的2个SVBV亲缘关系最近,而与其同属其他成员的亲缘关系均较远.生物信息学分析表明SVBVORF Ⅵ基因表达的P6蛋白序列含有多种蛋白激酶磷酸化位点,其二级结构N端是1个α-螺旋富集区.该研究将为进一步研究P6蛋白的功能提供理论依据.
- 李瑞倪方锐贾琳蒋磊江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒ORF克隆
- 草莓镶脉病毒(SVBV)启动子的克隆及序列分析被引量：1
- 2011年
- 【目的】对草莓镶脉病毒(SVBV)启动子进行序列测定和分析,为进一步研究该启动子稳定表达活性、表达类型及驱动外源基因稳定表达提供理论依据。【方法】用CTAB法从感染SVBV的草莓叶片中提取总DNA,设计特异性引物扩增SVBV启动子,克隆并测序。将SVBV启动子与花椰菜花叶病毒属其他成员的启动子核苷酸序列进行比较,并构建其系统关系树,再用PlantCARE软件分析SVBV启动子序列中的各个作用元件。【结果】获得全长为1017 bp的SVBV启动子。序列比列表明,本研究构建的中国SVBV启动子与美国SVBV启动子序列相似性最高,达77.29%。从构建的系统关系树可以看出,中国SVBV启动子与美国SVBV启动子单独聚成一个亚分支,说明来源于草莓的2个SVBV启动子亲缘关系最近。另外,SVBV启动子和花椰菜花叶病毒(CaMV)启动子亲缘关系虽然相对较近,但二者序列相似性较低,说明SVBV启动子与CaMV 35 S启动子的结构差异较大。进一步分析表明,SVBV启动子除了具有一般植物启动子的典型作用元件TATA-box和CAAT-box外,还具有一些与组织特异性表达或诱导表达相关的调节因子。【结论】SVBV启动子具有多种转录顺式作用元件,可能是一个在双子叶植物中具有较强驱动活性的组成型启动子。
- 倪方锐李瑞李爽贾琳蒋磊宋培培江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒启动子克隆
- 漆树炭疽病病原鉴定及其生物学特性研究被引量：7
- 2010年
- 为了明确漆树炭疽菌的种类及其病原菌生长特性,此研究采集感染炭疽病的漆树病叶,组织分离得到病原菌纯培养,根据病原菌的形态、培养特征、致病性和寄主范围将其鉴定为胶孢炭疽Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.。进一步研究其生物学特性发现,漆树炭疽菌菌丝生长与时间呈直线相关,菌丝在10～35℃范围内均能生长,生长最适温度为25～28℃,分生孢子致死温度为48℃,分生孢子在相对湿度达到90%时才能萌发,连续光照可以促进菌丝生长量和产孢量的增加,菌丝在pH3～12范围内均能生长,生长最适pH为6.0。漆树炭疽菌对多种碳、氮源都能利用,以葡萄糖、果糖为碳源以及以天门冬酰胺、丙氨酸为氮源时,其菌丝生长最佳。
- 江正君贾琳蒋磊李瑞檀根甲江彤
- 关键词：胶孢炭疽菌生物学特性
- 番茄黄化曲叶病毒安徽分离物的基因组结构特征及变异分析
- 2023年
- 利用滚环扩增(RCA)技术从安徽淮北番茄温室表现曲叶症状的番茄上获得番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的2个分离物全基因组。2个TYLCV DNA-A核苷酸序列全长均为2781 nts,共编码6个ORF。序列比对结果表明,2个TYLCV安徽分离物DNA-A核苷酸序列同源性为99.7%,与已报道的国内外其他24个TYLCV各分离物同源性高达97.8%~99.9%。系统进化分析显示,TYLCV安徽分离物与来自吉林、沈阳、天津、邯郸和山东的5个TYLCV分离物亲缘关系最近。
- 蒋磊徐世强徐凯丁菲丁菲
- 关键词：滚环扩增番茄黄化曲叶病毒
- 一种草莓镶脉病毒载体及其构建方法和在外源蛋白表达中的应用
- 本发明公开了一种草莓镶脉病毒载体及其构建方法和在外源蛋白表达中的应用，属于植物基因工程技术领域。草莓镶脉病毒载体为pSVBV<Sub>SY</Sub>‑P1‑MCS或pSVBV<Sub>SY</Sub>‑P4‑MCS；p...
- 江彤杨先初蒋磊赵青青张汉平胡亚会蒋西子
- 文献传递
- 安徽淮北番茄曲叶病的病原鉴定初报被引量：6
- 2010年
- 采用分子手段鉴定了安徽淮北番茄曲叶病的病原。从安徽淮北番茄温室采集番茄叶片样本,用CTAB法从番茄叶片中提取总DNA。利用简并引物PA、PB进行PCR扩增,从大部分样本中扩增出双生病毒500 bp特异性条带。将扩增片段克隆并测序,该片段序列全长541 bp,与我国报道的番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）各个分离物序列相似性均很高,达到95.9%~99.4%,可以初步明确侵染安徽淮北番茄的双生病毒为番茄黄化曲叶病毒（TYL-CV）。安徽淮北TYLCV 500 bp片段序列与山东TYLCV相似性最高,达99.4%,而且从构建的系统关系树也可以看出,安徽淮北TYLCV与山东TYLCV的亲缘关系最近,推测安徽淮北番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）可能来源于山东。
- 丁菲王前蒋磊李瑞贾琳江彤
- 关键词：番茄
