衡燮
- 作品数：19 被引量：44H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 无细胞百日咳疫苗生产用培养基的改进和培养条件优化被引量：2
- 2018年
- 目的:改进无细胞百日咳疫苗生产用培养基并优化培养条件。方法:用不同浓度溶血(0. 1%)赫氏琼脂及酸水解酪蛋白制备百日咳活性炭培养基,选择最优培养条件;使用百日咳活性炭培养基成功复苏菌种后,优化传代代次和培养时间,评价百日咳活性炭培养基替代羊血包姜氏培养基的可行性;用酸水解酪蛋白代替自制50%酸水解酪蛋白制备改良SS液体培养基,并用ELISA、SDS-PAGE电泳和CHO细胞簇集等方法评价对菌种的培养效果。结果:溶血(0. 1%)赫氏琼脂的加入量为33. 2g/L、酸水解酪蛋白加入量为8g/L时,菌苔生长最快;百日咳活性炭培养基培养第1代72 h、第2代48 h、第3代48 h、第4代24 h和第1代72 h、第2代36 h、第3代24 h的血凝(HA)和UV600均较高,这两组细菌生长状态较好;酸水解酪蛋白制备的百日咳活性炭培养基在优化条件后复苏菌种生长良好,和羊血包姜氏培养基没有明显差异; 8g/L酸水解酪蛋白制备的改良SS液体培养基所得菌量优于50%酸水解酪蛋白制备培养基(P=0. 001),改良SS液体培养基培养所得百日咳毒素纯度、产量和CHO细胞簇集活性均较好。结论:使用酸水解酪蛋白的百日咳活性炭培养基和改良SS液体培养基所得的百日咳杆菌纯度、产量、活性均较高,适用于无细胞百日咳组分疫苗的生产。
- 梁疆莉姬秋彦罗娜姬光高娜马艳史荔孙明波衡燮
- 关键词：百日咳百日咳毒素培养基
- 培养基、接种菌量和pH值对破伤风梭状芽孢杆菌产毒的影响
- 2018年
- 目的:探讨培养基、接种菌量与pH值对破伤风梭状芽孢杆菌产毒的影响。方法:采用示胨三号、示胨二号、胃蛋白胨及自制肉汤4种培养基培养破伤风梭状芽孢杆菌,比较毒素产量;选择最优培养基,按照培养基体积的1%,2%,3%,4%接种破伤风梭状芽孢杆菌,培养160 h,选取合适接种菌量;使用最优培养基与接种量,分别用初始pH 7. 5、7. 2、7. 0的3种培养基培养破伤风梭状芽孢杆菌,比较毒素产量。结果:示胨三号产毒量优于其他3种蛋白胨,差异具有统计学意义(P <0. 05);接种菌量大于2%时产毒量最优,3种初始pH培养条件对产毒量无明显影响(P> 0. 05)。结论:初步筛选出最优破伤风毒素培养基及接种量,为破伤风疫苗工艺研究及扩大化生产提供依据。
- 高娜衡燮姬秋彦梁疆莉顾琴马艳史荔孙明波
- 关键词：破伤风梭状芽孢杆菌类毒素培养基
- 去除百日咳毒素、丝状血凝素中内毒素的工艺探索被引量：2
- 2018年
- 目的探讨无细胞百日咳疫苗纯化工艺中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)的内毒素去除问题。方法选用Triton法和离子交换层析法,分别对百日咳杆菌发酵液上清和经Capto SP Imp Res柱纯化的发酵液进行内毒素去除,按《中国药典》三部(2015版)相关方法检测纯化样品的蛋白含量、内毒素含量、抗原含量,并进行SDS-PAGE分析。结果使用Triton法和离子交换层析法均可以将FHA和PT这两种成分的内毒素在脱毒前阶段降低至200 EU/mg以下。在合适的纯化条件下使用离子层析去除内毒素的能力高于Triton法,而在对抗原的回收率上Triton法又稍占优势。结论使用Triton法和离子交换层析法均可解决FHA和PT去除内毒素的问题,两类工艺下对目的蛋白活性的影响有待进一步研究。
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- 关键词：无细胞百日咳疫苗百日咳毒素丝状血凝素内毒素
- 不同氢氧化铝佐剂和吸附方式对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗免疫效果的影响被引量：1
- 2018年
- 目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用顺序吸附和分别吸附两种方式吸附抗原,使用进口和自制氢氧化铝,比较各抗原的吸附率、各抗原抗体水平以及百日咳、破伤风、白喉疫苗效价.结果 0.52 mg/ml铝含量组吸附率最高,0.42 mg/ml铝含量组吸附率最低;顺序吸附和分别吸附两种吸附方式没有明显差异;使用进口氢氧化铝佐剂和自制氢氧化铝佐剂组分抗体反应各有不同,差异无统计学意义.结论 0.52 mg/ml铝含量、自制氢氧化铝佐剂和分别吸附的方式适用于DTaP-sIPV疫苗的制备.
- 粱疆莉顾琴高娜马艳姬秋彦史荔孙明波衡燮
- 关键词：疫苗效价
- CHO细胞簇集法与小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性的相关性
- 2018年
- 目的比较CHO细胞簇集试验、小鼠体内检测法(小鼠组胺致敏试验、小鼠白细胞增多试验)检测不同脱毒条件下的百日咳类毒素残余毒性的应用效果和相关性。方法以不同脱毒条件百日咳类毒素作为研究对象,用CHO细胞簇集试验、小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性,并进行相关性分析。结果白细胞增多实验与组胺致敏实验结果存在显著的正相关(r=0.881,P=0.00),CHO细胞法与白细胞增多实验呈负相关(r=0.630,P=0.028),CHO细胞法与组胺致敏实验呈负相关(r=-0.613,P=0.034)。结论分析了无细胞组分百日咳疫苗脱毒工艺中CHO细胞簇集试验和小鼠体内检测法2种检测试验的差异性和相关性,为百日咳毒素脱毒工艺的便捷检测开发提供重要参考。
- 高娜梁疆莉姬秋彦顾琴马艳史荔孙明波衡燮
- 关键词：百日咳毒素
- 利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法
- 本发明涉及病毒灭活疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法。该利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法包括以下步骤：生物反应器无血清培养Vero细胞、病毒接种和培养。通过每天补加胰酶...
- 周健陈洪波赵红玲陈瑜刘雅灵衡燮寸怡娜刘伯川范琪琪鲍晓林雍国胜张泽珩施锦丽
- 生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒被引量：7
- 2008年
- 目的应用生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒。方法用7L、75L和550L生物反应器逐级放大培养Vero细胞,每天取样进行细胞计数。在550L生物反应器中培养脊髓灰质炎病毒,观察细胞病变,并检测病毒感染性滴度。结果一级细胞培养(灌流培养法)、二级细胞培养(循环培养法)和三级细胞培养(批培养法)的平均细胞密度分别为2.79×106、2.38×106和1.04×106个/ml,一级培养的细胞倍增数最高;病毒培养体积达350L,病毒收获液滴度大于7.625lgCCID50∕ml。结论通过三级放大工艺,可大规模培养脊髓灰质炎病毒。
- 衡燮李桂兰奚光跃温嘉纳沈伟何秀莲唐成丽廖国阳姜述德孙明波
- 关键词：生物反应器脊髓灰质炎病毒微载体VERO细胞
- 一种去除无细胞百日咳组分疫苗中内毒素的方法
- 本发明提供了一种去除无细胞百日咳组分疫苗中内毒素的方法，所述方法利用新型复合型阴离子层析填料Capto adhere，通过层析纯化去除百日咳毒素(Pertussistoxin，PT)和丝状血凝素(Filamentous ...
- 孙明波梁疆莉高娜顾琴姬秋彦马艳李琦涵史茘杨净思姚宇峰杨晓蕾车艳春衡燮和占龙赵刚
- 文献传递
- 用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗的研究
- 目的：用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗的工艺研究。
方法：用搅拌式生物反应器培养Vero细胞，接种并培养乙型脑炎病毒，将收获的病毒液进行灭活和纯化。
结果: 细胞密度都增至2.4×106/ml以上，病...
- 衡燮孙明波温嘉纳李佳李桂兰奚光跃周健姬光任邦彦谭振国
- 关键词：乙型脑炎病毒生物反应器纯化灭活生物制品
- 文献传递
- 用生物反应器制备乙脑灭活疫苗的研究被引量：2
- 2008年
- 目的用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗。方法用搅拌式生物反应器培养Vero细胞,接种并培养乙型脑炎病毒,将收获的病毒液进行灭活和纯化。结果细胞密度都增至2.4×106ml-1以上,病毒滴度都>7.25lgLD50/ml。结论用生物反应器制备乙脑灭活纯化疫苗的工艺合理,可以生产出高滴度的乙型脑炎病毒液。
- 衡燮温嘉纳李佳李桂兰奚光跃周健姬光任邦彦谭振国孙明波
- 关键词：生物反应器纯化灭活
