谌启政
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人可溶性TNF受体Ⅱ克隆、原核表达与活性鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的构建人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)原核基因表达载体,并在大肠埃希菌中高效表达之。方法采用RT-PCR技术,从人外周血的单核细胞中扩增出肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)基因的胞外区,将其克隆入pET28a(+)高效表达载体进行诱导表达,并对表达产物进行纯化及鉴定。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,转入外源基因的大肠埃希菌BL21(DE3)可高效表达sTNFRⅡ蛋白,SDS-PAGE显示在32kD处有一特异表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的30%左右。纯化的sTNFRⅡ经Western blot鉴定具有生物学活性;生物活性实验(MTT法)显示它可有效地封闭分泌性肿瘤坏死因子α(sTNF-α)对L929细胞的胞毒效应;直接免疫荧光显示它可以特异性抑制GFP-sTNF-α与靶细胞肿瘤坏死因子受体的结合。结论通过基因工程技术获得了人sTNFRⅡ的重组蛋白。
- 梁慧芳李清芬谌启政姜晓丹冯玮李卓娅
- 关键词：基因表达
- 跨膜型TNF-α突变体(Δ-28)的正向和反向信号对U937细胞的作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察跨膜段突变TM-TNF-α(Δ-28mTM-TNF-α)正反向信号诱导U937促炎因子表达的影响。方法Δ-28mTM-TNF-α质粒分别转染COS-7,检测表达的Δ-28mTM-TNF-α诱导U937产生NO的量。同样Δ-28mTM-TNF-α质粒转染U937,sTNFRI激活反向信号后,检测U937促炎因子IL-8以及IL-1β的mRNA转录水平。结果Δ-28mTM-TNF-α不能够诱导U937产生NO,但被激活并传递反向信号促使U937的促炎因子转录和表达。结论跨膜段突变抑制了TM-TNF-α正向信号但不影响反向信号的传递。
- 谌启政刘娜王晶姜小丹徐勇冯玮李卓娅
- 关键词：跨膜型TNF-Α反向信号U937
- C-28F TM-TNF-a突变体的正向信号和反向信号效应
- 肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)具有多种生物学功能,在体内以跨膜型(Transmembrane TNF-α, TM-TNF-α)和分泌型(secreted TNF-α, S...
- 谌启政
- 关键词：跨膜型TNF-Α分泌型TNF-Α反向信号
- 文献传递
- C-28F TM-TNF-α突变体的正向信号和反向信号效应
- 肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)具有多种生物学功能，在体内以跨膜型(TransmembraneTNF-α，TM-TNF-α)和分泌型(secretedTNF-α，S-TNF-α)...
- 谌启政
- 关键词：突变体分泌型反向信号
- 文献传递
