费仁仁 作品数:34 被引量:90 H指数:8 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家攀登计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
LHRH拮抗剂TX53对大鼠精子碱性核蛋白的影响 2000年 费仁仁 孙亦彬 等关键词:精子 避孕药 动物实验 哺乳动物P1精蛋白基因表达的研究 2002年 目的:研究哺乳动物P1精蛋白基因在大鼠和小鼠中的表达。方法:用RT-PCR法制备大鼠P1精蛋白(rP)cDNA,用小鼠P1精蛋白(mP1)DNA重组质粒(pUC8)制备mP1cDNA,rPcDNA和mP1cDNA经迪高辛标记后作为探针,用Northern杂交等技术分析基因表达情况。结果:rPcDNA与大鼠睾丸RNA有杂交反应,而与肝、脑RNA无交叉反应;rPcDNA和小鼠睾丸RNA有交叉反应;mP1cDNA探针与性成熟不同阶段小鼠睾丸RNA杂交结果表明:小鼠性成熟过程中,在睾丸出现圆形精子细胞后mP1基因开始转录,而翻译成蛋白质是在性成熟小鼠睾丸内出现长形精子细胞后。结论:哺乳动物P1精蛋白的表达有器官特异性,是睾丸特异表达的基因,P1精蛋白基因在进化上保守,因而在大、小鼠睾丸中均能检测到杂交讯号;精蛋白基因的表达表现为翻译延迟,该基因在圆形精子细胞阶段开始转录,而在长形精子细胞阶段翻译成蛋白质。 纪林 陈晖 吴小芳 陈惠琼 费仁仁 李建国 王一飞 阎月敏 王莎丽 陈啸梅 薛社普关键词:精子发生 精蛋白 基因表达 弱精子症患者精核蛋白含量的分析 被引量:11 2005年 目的:研究精核蛋白在男性不育诊治中的意义.方法:对199例临床确诊的弱精子症患者的精液提取精子总碱性核蛋白(简称精核蛋白,TNBP),进行电泳及扫描分析,并用总组蛋白(TH)与总精核蛋白(TP)的比值来表示组蛋白-精核蛋白的取代(HPRR)程度.结果:在199例患者中,42例(21.1%)TNBP含量正常,157例(78.9%)异常,其中99例(49.7%)TH/TP高于正常,属HPRR受阻;45例(22.6%)为HP1/(HP2+HP3)比值升高,属P2型精核蛋白减少;51例(25.6%)HP2+HP3全部缺失;44例(22.1%)TP全部缺失.从TNBP含量异常的157例患者中随机抽出30例进行2~7个月的有效治疗后,再次进行TNBP电泳及扫描分析,发现14例(46.6%)TNBP含量无明显变化;11例(36.6%)显著变化;5例(16.6%)TNBP含量恢复正常.结论:HPRR受阻和P2型精核蛋白异常与男性不育相关,TNBP含量的变化可作为不育患者治疗效果的监测指标之一. 陈松 曹坚 费仁仁 毛全宗 李汉忠关键词:男性不育 弱精子症 精核蛋白 腺嘌呤诱导不育大鼠精子中精蛋白mRNA的研究 被引量:11 2003年 目的 :研究正常生育大鼠和腺嘌呤诱导的不育大鼠附睾精子中精蛋白及其 m RNA的含量以及它们的相关性。方法 :大鼠喂服腺嘌呤制备不育动物模型 ,收集对照组和不育组大鼠附睾精子 ,提取总碱性核蛋白 ( TNBP) ,电泳分析 ;提取总 RNA,用 RT- PCR分析精蛋白 m RNA相对含量。结果 :不育组大鼠附睾精子中精蛋白含量明显低于正常组 ( P<0 .0 1 ) ,对精蛋白 m RNA的分析也得到了相似结果 ,正常组和不育组相比较 ,有非常显著差异 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :精子中精蛋白 m RNA的相对含量能反映出精子中精蛋白的相对含量 。 费江枫 李海松 陈晖 梁前进 李曰庆 费仁仁 王永潮关键词:不育 精子 精蛋白 MRNA 大鼠精核蛋白抗血清的制备 被引量:1 1994年 用大鼠精核蛋白(Rat Protamine,RP)-核糖核酸(RNA)复合物(RP-RNA Complexes)免疫大鼠,得到了特异的抗RP抗血清,并用Immunodotting和Immunoblotting方法验证了其特异性。该抗血清和RP有特异的反应,并和哺乳动物小鼠和羊的精核蛋白有一定程度交叉反应,而与体细胞类型核蛋白(H1,H2a,H2b,H3,H4)无交叉反应。并对制备该抗血清的意义予以讨论。 戴文平 左晓春 陈晖 费仁仁关键词:精子 细胞 精子发生 鱼精蛋白 大鼠精核蛋白的纯化 被引量:12 1994年 用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核,用盐酸胍法提取总碱性蛋白(Total basic protein,TBP)。通过Sephadex G-100分子筛层析,其第三峰用5%TCA沉淀,得到纯大鼠精核蛋白(Rat protamine,RP)。RP也可用TBP通过HPLC反相柱得到纯化,RP位于26%-28%乙腈梯度。 费仁仁 戴文平 戴巾 陈晖 朱斌 邓锦松关键词:精子发生 精子 细胞 鱼精蛋白 提纯 小鼠精子发生过程中泛素的表达 被引量:4 2001年 于晖 王永潮 费仁仁 陈晖关键词:小鼠 精子发生 泛素 基因表达 精蛋白基因在MEL细胞中表达的研究 在精子细胞变态过程中,精子细胞核内体细胞型组蛋白逐步被精蛋白取代,这个过程称为组蛋白-精蛋白取代反应(Histone—Protamine Replacement Reaction,HPRR),在HPRR过程中,精蛋白(p... 费仁仁 陈宇 陈晖 葛晔华 吴小芳 马静 韩代书 薛社普文献传递 人与大小鼠精子中精蛋白mRNA的分析 被引量:2 2001年 目的 :研究人与大小鼠精子中精蛋白 m RAN存在情况。方法 :应用 RT-PCR法分别从人、大鼠和小鼠精子总 RNA中扩增得到精蛋白 (protamine) c DNA片段。结果 :人、大鼠和小鼠精子中均存在精蛋白基因相应的 m RNA,并发现头部畸形率高的精子中精蛋白 m RNA明显减少。结论 :精子的 m 吴小芳 陈晖 陈松 曹坚 费仁仁关键词:精子 精蛋白 MRNA 基因表达 人磷酸二酯酶同工酶3A在昆虫杆状病毒系统中的表达 被引量:1 2005年 目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RTPCR,SDSPAGE和Westernblotting技术检测HPDE3A表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显,获得表达产物,RTPCR扩增结果证实了Tn细胞中HPDE3A的mRNA水平增高,Tn细胞能够表达出与HPDE3A多克隆抗体结合的蛋白,蛋白分子质量约为120kD。结论HPDE3A在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定表达,为进一步研究HPDE3A的生物学活性及筛选HPDE3A抑制剂奠定了基础。 严永敏 许文荣 朱海波 张岭 费仁仁 王晓良 钱晖 郝顺祖 王文兵关键词:杆状病毒表达系统