贺龙刚
- 作品数：29 被引量：161H指数：7
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- 健脾益气利水汤通过OCT-MATE转运体缓解顺铂所致小鼠肾上皮细胞毒性作用
- 2022年
- 目的在体外水平探讨健脾益气利水汤对小鼠肾上皮细胞及肿瘤细胞的细胞毒性缓解作用,并从OCT-MATE转运系统探索其调控机制。方法通过MTT法检测不同给药组健脾益气利水汤对顺铂诱导的原代肾上皮细胞和肿瘤细胞的细胞毒性作用的影响,再通过ICP-MS检测不同给药组对顺铂诱导的原代肾上皮细胞和HEK293肾癌细胞内Pt含量的影响,最后通过RT-PCR和Western Blot检测不同浓度健脾益气利水汤对顺铂诱导的原代肾上皮细胞内OCT-1/2、MATE-2基因及蛋白表达变化。结果健脾益气利水汤能有效降低12.9μmol/L顺铂所致对体外小鼠肾上皮细胞的细胞毒性作用,其中预防组和同时组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);同时发现健脾益气利水汤24h内对6.25~50μmol/L顺铂诱导的食管癌细胞EC109;大肠癌细胞HP-29;鼻咽癌细胞HK-1;肾癌细胞HEK293;肺癌细胞A549;胃癌细胞MKN-45的细胞毒性作用均无显著性差异(P>0.05)。ICP-MS检测发现,预防给药组和同时给药组能显著降低原代肾上皮细胞内Pt的含量(P<0.05),而在HEK293细胞内,各给药组细胞内Pt含量与模型组之间均无显著差异(P>0.05)。RT-PCR和Western Blot检测均发现,健脾益气利水汤显著降低顺铂诱导的小鼠肾上皮细胞内OCT-2表达水平(P<0.05),而OCT-1和MATE-2无明显差异(P>0.05)。结论健脾益气利水汤通过抑制OCT-2表达从而抑制顺铂进入肾上皮细胞,具有预防降低顺铂肾细胞毒性作用,同时对顺铂进入肿瘤细胞发挥抗肿瘤活性无显著影响。
- 周丽翁纯雪邱煌沛高奥林晓辉贺龙刚
- 关键词：顺铂肾毒性
- 青藤碱联合TNF-α抑制剂对RA模型大鼠骨破坏及体外破骨细胞活化的的影响被引量：4
- 2021年
- 目的评价青藤碱(SIN)联合TNF-α抑制剂(阿达木单抗)对Mt佐剂诱导SD大鼠RA模型和体外破骨细胞模型活化的影响,及对AP-1/NFATc1通路分子的调控作用。方法药物分为青藤碱组,阿达木组,联合组(青藤碱+阿达木)。建立SD大鼠Mt佐剂诱导RA模型评价各组对动物的足肿胀度及关节滑膜损伤的影响。建立体外诱导破骨细胞模型,评价各组对破骨细胞生成的影响。建立RAW264.7细胞AP-1-luc和NFAT-luc瞬时转染模型,通过荧光素酶Luciferase测定评价各组对RANKL诱导的核转录因子AP-1和NFAT表达影响,再通过荧光定量RT-PCR和WesternBolt检测各组对RANKL诱导的RAW264.7细胞AP-1/NFATc1通路中c-Fos、c-Jun、Fra-1、Fra-2和NFATc1基因及蛋白表达的影响。结果青藤碱组、阿达木组,联合组均能改善造模14天后大鼠足肿胀水平,且阿达木组和联合组优于青藤碱组;HE染色结果显示各用药组均能减轻模型动物关节滑膜炎症侵润,且阿达木组和联合组优于青藤碱组。体外破骨细胞模型中,与模型组比较,各给药组均能明显抑制破骨细胞数量(P<0.05),阿达木组和联合组均显著优于青藤碱组(P<0.05),阿达木组显著优于联合组(P<0.05)。Luciferase检测发现各给药组均能显著抑制(P<0.05)RANKL诱导的NFAT和AP-1报告基因激活,阿达木组和联合组的抑制作用均强于青藤碱组,且具有显著性差异(P<0.05),而阿达木组和联合组之间无显著差异(P>0.05)。通过荧光定量RT-PCR和Western Bolt检测发现各给药组均能显著抑制c-Fos、c-Jun、Fra-1、Fra-2和NFATc1基因及蛋白表达(P<0.05),阿达木组和联合组作用均强于青藤碱组,且具有显著性差异(P<0.05),而阿达木组和联合组之间无显著差异(P>0.05)。结论青藤碱和TNF-α抑制剂能有效缓解RA大鼠骨破坏及体外破骨细胞生成,同时能对破骨细胞核心通路上的AP-1和NFAT核转录因子及其相关分子的表达产生抑制性调控,且二药联合应用能减�
- 贺龙刚高奥林晓辉周丽
- 关键词：青藤碱TNF-Α抑制剂破骨细胞AP-1
- HPLC法比较不同血液样品中丹参素和原儿茶醛的含量被引量：1
- 2009年
- 目的比较丹参注射液不同血液样品中丹参素和原儿茶醛的含量。方法制备丹参注射液不同处理方法和不同剂量含药血浆及血清,运用HPLC法检测其丹参素和原儿茶醛含量。结果各剂量含药血浆中丹参素和原儿茶醛含量采用乙酸乙酯提取法回收率均高于水浴提取法;各含药血浆组中丹参素和原儿茶醛含量均高于其血清组;且6.0、4.8、4.0 g/kg剂量血浆组丹参素含量明显高于与同剂量血清组(P<0.05);6.0、4.8g/kg剂量血浆组原儿茶醛含量明显高于与同剂量血清组(P<0.05)。结论丹参素和原儿茶醛血液样品分析宜采用乙酸乙酯提取法和血浆样品。
- 柳培宗贺龙刚周丽陈明嘉吴符火
- 关键词：高效液相血浆丹参素原儿茶醛
- HIV gp41融合多肽对抗原特异性Treg活化的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨HIV gp41融合多肽(fusion peptide,FP)与机体免疫细胞的相互作用,观察FP能否影响抗原特异性的调节性T细胞活化。方法用免疫磁珠分离DO11.10小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、CD4+CD25-效应性T细胞(Teff)共培养,3d后采用CCK-8法分析FP对OVA323-339抗原激活的Treg抑制Teff细胞增殖的影响。另外,ELISA法检测FP对Treg细胞IL-10分泌的影响,荧光共聚焦分析FP多肽在Treg细胞表面与TCR的共分布。结果25 mg·L-1的FP能降低Treg的抑制活性和IL-10分泌,在活化的Treg细胞表面有FP和TCR荧光的重叠。结论 FP降低抗原特异性Treg细胞的抑制功能,可能与其抑制IL-10合成有关;它与TCR在细胞膜的相互作用也可能影响APC向Treg细胞递呈活化信号,干扰Treg的活化。
- 胡义平贺龙刚李润明李珉珉张嘉杰刘叔文李晓娟
- 关键词：TCRHIV-1
- 淫羊藿次苷Ⅰ及其代谢产物淫羊藿次苷Ⅱ通过AP-1/NFATc1信号通路调控破骨细胞生成被引量：26
- 2017年
- 目的:观察淫羊藿次苷Ⅰ及其代谢产物淫羊藿次苷Ⅱ在体外对破骨细胞(OCs)分化形成的影响,并探索其通过AP-1/NFATc1信号通路的调控机制。方法:首先采用AP-1和NFAT核转录因子报告基因进行体外活性筛选,再通过体外RAW264.7细胞诱导OCs评价药物对OCs生成的影响,最后通过AP-1/NFATc1信号通路相关基因表达,探索其可能的作用机制和靶点。结果:淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能抑制AP-1和NFAT报告基因表达,且在48h内对前体细胞RAW264.7细胞无明显生存抑制作用。淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能抑制体外诱导OCs生成,且淫羊藿次苷Ⅱ明显强于淫羊藿次苷Ⅰ(P<0.05)。淫羊藿次苷Ⅰ能显著抑制AP-1/NFATc1信号通路中c-Fos和Fra-1基因表达(P<0.05),而淫羊藿次苷Ⅱ对c-Fos、Fra-1、Fra-2和NFATc1基因表达均有显著抑制作用(P<0.05)。结论:淫羊藿次苷Ⅰ及其代谢产物淫羊藿次苷Ⅱ在体外均能通过AP-1/NFATc1信号通路抑制OCs生成,且淫羊藿次苷Ⅱ作用较淫羊藿次苷Ⅰ更优,提示淫羊藿可能在体内通过生物转化进一步增强其骨保护作用。
- 贺龙刚高奥邱煌沛李文林晓辉周丽
- 关键词：破骨细胞激活蛋白1
- 青藤碱通过调控 RANKL信号通路抑制Mt诱导的关节炎大鼠骨破坏及破骨细胞形成
- 核因子κB受体活化因子配体( RANKL)是破骨细胞形成的关键分子,近年靶向 RANKL通路成为治疗骨质疏松(OP)和类风湿关节炎( RA)等骨侵蚀类疾病的一个有效策略。青藤碱在临床和动物实验均表现出治疗 RA的作用,但...
- 李晓娟贺龙刚胡义平段恒李湘潋刘叔文
- 关键词：青藤碱破骨细胞RANKL骨破坏关节炎核转录因子
- 文献传递
- 试论“脾主运化”的机制内涵被引量：26
- 2015年
- 脾主运化为脾脏理论的重要内容之一,脾主运化的内在动力是气机的升降运动,实质是通过升清降浊主导人体精、气、血、津液等精微物质的气化过程。脾主运化的是全身组织器官物质和能量新陈代谢活动的调控机制,也是五脏功能正常进行的重要保证,因此,临床应根据脾主升、喜燥恶湿的特性,对于脾失健运之证,宜健脾配合升脾、醒脾之法;对于临诊应用祛邪药物及机体营养及疾病耗损时,亦同时需考虑固护脾胃之气。
- 周丽纪立金梁海凌贺龙刚
- 关键词：脾主运化升清降浊气化
- 丹参注射液含药血浆及血清对血管生成的影响被引量：3
- 2007年
- 目的比较丹参注射液含药血浆及血清对血管生成影响的差异。方法制备丹参注射液不同注射浓度和不同采血时间含药血浆及血清,利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,检测其对尿囊膜的血管增生程度的影响。结果各含药血浆及血清组,丹参注射液组CAM血管数均显著多于空白组(P<0.05);4.8,4.0g/kg剂量和20,40min采血,血浆组与其血清组比较血管数明显增加(P<0.05)。结论丹参注射液具有较好的促进CAM血管生成的作用,其含药血浆促血管增生作用强于含药血清。
- 贺龙刚周丽
- 关键词：丹参注射液鸡胚绒毛尿囊膜血管增生血清
- 13-甲基肉豆蔻酸抗肿瘤作用的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究13-甲基肉豆蔻酸(13-MTD)的抗肿瘤作用。方法:应用台盼蓝排染法、MTT法测定13-MTD对人乳腺癌Bcap-37等6种体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用。观察13-MTD对小鼠移植性实体瘤S180的瘤重抑制率,对白血病P388荷瘤鼠的生命延长率。观察13-MTD对正常及免疫抑制小鼠免疫机能的影响。结果:6种肿瘤细胞株的IC50:13.9～33.0μg·mL-1。400mg·kg-1灌胃对小鼠肉瘤S180的瘤重抑制率为71.74%,对白血病P388荷瘤鼠的生命延长率为41.49%。对机体的免疫机能未见抑制作用,对环磷酰胺(CTX)诱发的免疫抑制,不仅不致恶化,个别指标如胸腺系数等还有缓解作用。结论:13-MTD有较强的体内外抗肿瘤活性。对机体免疫机能未见明显影响,对CTX诱发的免疫抑制状态,联用13-MTD未见恶化现象。
- 黄枚陈旭东贺龙刚
- 关键词：抗肿瘤药13-甲基肉豆蔻酸肿瘤细胞免疫机能
- 基于“脾主运化”探讨脾调控药物代谢被引量：11
- 2015年
- 在中医藏象学说中,脾是一个大的功能系统。"脾主运化"是脾的主要生理功能,传统理论认为"脾主运化"主要指脾对饮食物的运化过程。笔者通过"时空观"以及"脾为气机之枢"的理论,认为"脾主运化"与药物代谢动力学在时空角度以及转运药物方面具有相通性,提出"脾调控药物代谢"的假说,并由此认为临床用药应注重固护脾胃,同时推测健脾类中药或复方通过影响药物体内代谢过程发挥增效减毒的作用。本理论的提出充实了"脾主运化"的理论内涵和应用价值。
- 周丽纪立金贺龙刚
- 关键词：运化归经药物代谢
